细胞治疗用无血清培养基国内外现状
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这个产品避免了任何蛋白激酶c刺激物，适用于人类和 鼠淋巴细胞第二信使激活的研究，成分完全包含药用级的 人类白蛋白、重组人类胰岛素和经巴氏消毒的人转铁蛋白。 所有X-VIVO培养基都是在目前GMP条件下生产，并且通 过FDA认证，查询认证可联系产品经理。
宝日医生物技术 (北京) 有限公司 Takara Biomedical Technology (Beijing) Co., Ltd.
免疫细胞培养的一般操作步骤
单核细胞树突状细胞(DC)培养： 1、准备新鲜的外周血单个核细胞（PBMC）。 2、将外周血单个核细胞在铺在培养瓶中，用加入25 mL免疫细胞无血清培养基。 3、在37℃，5％CO 2的潮湿培养箱中孵育2〜3小时。 4、弃掉含非贴壁细胞的培养基。 5、用生理盐水洗涤贴壁细胞（主要是CD14 +单核细胞）三次。 6、往免疫细胞无血清培养基添加50至100 ng / mL的重组人IL-4和50 ng / mL的
百恩维生物科技有限公司（Biowit Technologies）(深圳南山科技园 )，是一家专业从事 生物科技前沿技术研发的高新技术企业。为国内外众多药厂和科研机构提供病毒包装， 蛋白表达，载体构建，干细胞培养基，转染试剂、细胞因子等产品及技术服务。公司 专家团队曾在国内外知名学府和国际一流制药公司从事研发多年。
CIK、 DC-CIK细胞无血清培养基
标准： • 可用于免疫细胞临床治疗研究的无血清培养基，
生产过程符合cGMP的标准规范。可用于人类体外 组织及细胞培养。 • 有效避免人畜共染疾病问题，同时无血清细胞培 养基批间差异小，培养条件容易保持一致，实验 的重复性大为提高。
• 使细胞大量增殖、不分化。
来自百度文库
常用国外公司产品
重组人GM-CSF。细胞密度应介于1~3x105细胞/ mL之间。研究者可视情况 加入灭活的人自体血浆。 7、在37℃，5％CO 2的潮湿培养箱中连续孵育5天。培养3天左右换液。同时添 加IL-4和GM-CSF。 8、 6天之后，细胞表现出典型的树突状细胞的形态和表面标记（细胞CD1a， CD80，CD86，HLA-DR）。 9、向培养基中添加1μg/ mL的LPS或者50μl/mL的TNF-α诱导的树突状细胞的成 熟。
百恩维人免疫细胞无动物源培养基 经过测试对比，百恩维的免疫细胞无动物源培养基质量 远优于进口培养基，细胞增速、支持免疫细胞Marker、 杀伤能力等技术指标更胜一筹。 1、百恩维免疫细胞无动物源培养基(产品号：BW12002, 1000ml)的特点 适用范围广：适用于人体各种免疫细胞的无动物源培养。 培养性能优越：支持高密度细胞培养。 可维持细胞的高杀伤力。 质量保证：按cGMP标准生产，配制用水符合国家药监 局《人体细胞治疗研究和制剂质量控制指导原则》中注 射用水标准。
免疫细胞培养的一般操作步骤
CIK细胞培养： 1、准备新鲜的外周血单个核细胞（PBMC）；或根据标准的外周血单个核细胞
解冻程序，在37°C的水浴，快速解冻（<1分钟）冷冻小瓶的外周血单个核 细胞 2、用生理盐水洗涤细胞，根据需要也可加入2-5％的热灭活的的人自体血浆。 3、计数细胞可以使用电子（即Coulter计数器，VI-细胞）或手动的方法（即血球 计数仪）。 4、离心细胞，清除洗涤缓冲液。 5、培养初期，用含细胞因子（如IL-2）的培养基重悬PBMC；CD3 + T细胞密度 保持在大约0.5-1×10 6/ mL。转移细胞到相应的细胞培养容器（培养袋、培 养瓶）。随后可应用各种操作激活T细胞，包括添加刺激的抗体或抗原抗原呈 递细胞。无论培养T细胞的规模大小，细胞均可被隔离，激活和扩大。 6、在37℃，5％CO 2的潮湿培养箱。在潮湿的气氛中，在37°C，5％CO2孵育 培养容器。在对数生长期细胞，需要维持细胞所需的浓度。为了保持细胞指 数生长期，当细胞密度超过1×10 6/ mL时，需要分离传代，维持细胞密度在 0.5-1×10 6/ mL（例如，2×10 6个细胞/ mL以上，按1:4比例0.5x106细胞/ mL）。在静态平板培养中为了获得最佳的气体交换，建议培养基深度不超过 1到1.2厘米。
GT-T551产品特点 :日本原装进口无血清培养基，适 用于人体淋巴细胞及DC细胞培养。
日本原装进口无血清培养基，已经加入人血白蛋白组 分 支持淋巴细胞的高密度细胞培养 在日本多家医院用 于临床治疗的细胞培养 配制用水符合国家药监局《人体细胞治疗研究和制剂 质量控制指导原则》中注射用水标准
国内公司产品
LONZA的X-VIVO TAKARA的GT-T551
都是非常好的无血清培养基，适合CIK、DC-CIK的培养都可用于临床。
Lonza
X-VIVO™培养基说明书
Lonza’s的努力和许多临床实验的合作已经证明lonza 有条件和技术推进免疫、癌症、基因和其他细胞治疗的发 展，lonza的宗旨就是用无血清组分在细胞治疗中为细胞提 供一个营养全image面.baidu.c和om - 查平衡的环境，这里面不含任何外源性生 长因子，细胞增殖人工刺激物或者不确定成分。
细胞治疗用无血清培养基国内外现状
邵宁生
CIK 和 DC细胞
CIK细胞，即细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine-Induced Killer， CIK)是一种新型的免疫活性细胞，CIK增殖能力强，细胞毒作 用强，具有一定的免疫特性。由于该细胞同时表达 CD3 和 CD56 两种膜蛋白分子，故又称为NK 细胞（自然杀伤细胞） 样 T 淋巴细胞，兼具有 T 淋巴细胞强大的抗瘤活性，和 NK 细 胞的非 MHC 限制性杀瘤优点。该细胞对肿瘤细胞的识别能力 很强，如同 “ 细胞导弹 ” ，能精确 “ 点射 ” 肿瘤细胞，但 不会伤及 “ 无辜 ” 的正常细胞。尤其对手术后或放化疗后患 者效果显著，能消除残留微小的转移病灶，防止癌细胞扩散和 复发，提高机体免疫力，因此， CIK 细胞被认为是新一代的肿 瘤过继细胞免疫治疗的首选方案。 DC(树突状细胞)：一个独特的调控初始免疫反应的白细胞群落。
宝日医生物技术 (北京) 有限公司 Takara Biomedical Technology (Beijing) Co., Ltd.
免疫细胞培养的一般操作步骤
单核细胞树突状细胞(DC)培养： 1、准备新鲜的外周血单个核细胞（PBMC）。 2、将外周血单个核细胞在铺在培养瓶中，用加入25 mL免疫细胞无血清培养基。 3、在37℃，5％CO 2的潮湿培养箱中孵育2〜3小时。 4、弃掉含非贴壁细胞的培养基。 5、用生理盐水洗涤贴壁细胞（主要是CD14 +单核细胞）三次。 6、往免疫细胞无血清培养基添加50至100 ng / mL的重组人IL-4和50 ng / mL的
百恩维生物科技有限公司（Biowit Technologies）(深圳南山科技园 )，是一家专业从事 生物科技前沿技术研发的高新技术企业。为国内外众多药厂和科研机构提供病毒包装， 蛋白表达，载体构建，干细胞培养基，转染试剂、细胞因子等产品及技术服务。公司 专家团队曾在国内外知名学府和国际一流制药公司从事研发多年。
CIK、 DC-CIK细胞无血清培养基
标准： • 可用于免疫细胞临床治疗研究的无血清培养基，
生产过程符合cGMP的标准规范。可用于人类体外 组织及细胞培养。 • 有效避免人畜共染疾病问题，同时无血清细胞培 养基批间差异小，培养条件容易保持一致，实验 的重复性大为提高。
• 使细胞大量增殖、不分化。
来自百度文库
常用国外公司产品
重组人GM-CSF。细胞密度应介于1~3x105细胞/ mL之间。研究者可视情况 加入灭活的人自体血浆。 7、在37℃，5％CO 2的潮湿培养箱中连续孵育5天。培养3天左右换液。同时添 加IL-4和GM-CSF。 8、 6天之后，细胞表现出典型的树突状细胞的形态和表面标记（细胞CD1a， CD80，CD86，HLA-DR）。 9、向培养基中添加1μg/ mL的LPS或者50μl/mL的TNF-α诱导的树突状细胞的成 熟。
百恩维人免疫细胞无动物源培养基 经过测试对比，百恩维的免疫细胞无动物源培养基质量 远优于进口培养基，细胞增速、支持免疫细胞Marker、 杀伤能力等技术指标更胜一筹。 1、百恩维免疫细胞无动物源培养基(产品号：BW12002, 1000ml)的特点 适用范围广：适用于人体各种免疫细胞的无动物源培养。 培养性能优越：支持高密度细胞培养。 可维持细胞的高杀伤力。 质量保证：按cGMP标准生产，配制用水符合国家药监 局《人体细胞治疗研究和制剂质量控制指导原则》中注 射用水标准。
免疫细胞培养的一般操作步骤
CIK细胞培养： 1、准备新鲜的外周血单个核细胞（PBMC）；或根据标准的外周血单个核细胞
解冻程序，在37°C的水浴，快速解冻（<1分钟）冷冻小瓶的外周血单个核 细胞 2、用生理盐水洗涤细胞，根据需要也可加入2-5％的热灭活的的人自体血浆。 3、计数细胞可以使用电子（即Coulter计数器，VI-细胞）或手动的方法（即血球 计数仪）。 4、离心细胞，清除洗涤缓冲液。 5、培养初期，用含细胞因子（如IL-2）的培养基重悬PBMC；CD3 + T细胞密度 保持在大约0.5-1×10 6/ mL。转移细胞到相应的细胞培养容器（培养袋、培 养瓶）。随后可应用各种操作激活T细胞，包括添加刺激的抗体或抗原抗原呈 递细胞。无论培养T细胞的规模大小，细胞均可被隔离，激活和扩大。 6、在37℃，5％CO 2的潮湿培养箱。在潮湿的气氛中，在37°C，5％CO2孵育 培养容器。在对数生长期细胞，需要维持细胞所需的浓度。为了保持细胞指 数生长期，当细胞密度超过1×10 6/ mL时，需要分离传代，维持细胞密度在 0.5-1×10 6/ mL（例如，2×10 6个细胞/ mL以上，按1:4比例0.5x106细胞/ mL）。在静态平板培养中为了获得最佳的气体交换，建议培养基深度不超过 1到1.2厘米。
GT-T551产品特点 :日本原装进口无血清培养基，适 用于人体淋巴细胞及DC细胞培养。
日本原装进口无血清培养基，已经加入人血白蛋白组 分 支持淋巴细胞的高密度细胞培养 在日本多家医院用 于临床治疗的细胞培养 配制用水符合国家药监局《人体细胞治疗研究和制剂 质量控制指导原则》中注射用水标准
国内公司产品
LONZA的X-VIVO TAKARA的GT-T551
都是非常好的无血清培养基，适合CIK、DC-CIK的培养都可用于临床。
Lonza
X-VIVO™培养基说明书
Lonza’s的努力和许多临床实验的合作已经证明lonza 有条件和技术推进免疫、癌症、基因和其他细胞治疗的发 展，lonza的宗旨就是用无血清组分在细胞治疗中为细胞提 供一个营养全image面.baidu.c和om - 查平衡的环境，这里面不含任何外源性生 长因子，细胞增殖人工刺激物或者不确定成分。
细胞治疗用无血清培养基国内外现状
邵宁生
CIK 和 DC细胞
CIK细胞，即细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine-Induced Killer， CIK)是一种新型的免疫活性细胞，CIK增殖能力强，细胞毒作 用强，具有一定的免疫特性。由于该细胞同时表达 CD3 和 CD56 两种膜蛋白分子，故又称为NK 细胞（自然杀伤细胞） 样 T 淋巴细胞，兼具有 T 淋巴细胞强大的抗瘤活性，和 NK 细 胞的非 MHC 限制性杀瘤优点。该细胞对肿瘤细胞的识别能力 很强，如同 “ 细胞导弹 ” ，能精确 “ 点射 ” 肿瘤细胞，但 不会伤及 “ 无辜 ” 的正常细胞。尤其对手术后或放化疗后患 者效果显著，能消除残留微小的转移病灶，防止癌细胞扩散和 复发，提高机体免疫力，因此， CIK 细胞被认为是新一代的肿 瘤过继细胞免疫治疗的首选方案。 DC(树突状细胞)：一个独特的调控初始免疫反应的白细胞群落。