重组病毒载体研究进展
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中 图 分 类 号 ： ７ 文 献 标 识 码 ： Ｒ３ ３ Ａ
重组 病毒 载体 是 当今 病 毒基 因工 程研究 的热点
组腺病 毒 载体产 生 的机 体抗 原特 异 性 免 疫 反 应 ， 在
之一 。载 体是供 插 人 目的基 因并将 其 导入 宿 主细胞 内表 达或 复制 的运 载 工具 。近 年来 ， 组 病毒 载 体 重
中 国 人 兽 共 患 病 学 报
２ ４ ８ Ｃｈｉ ｅ ｅ Ｊ ｕｒ ｌｏ ｎ ｓ ｎａ ｆＺｏｏ ｏｓ ｓ ｏ ｎ ｅ
文 章 编 号 ：０ ２ ６ ４ ２ １ ） ３ ２ ４ ５ １ ０ —２ ９ （ ０ ２ ０ —０ ８ —０
重 组 病 毒 载 体 研 究 进 展
王培 园 ， 李 结 ， 朱兴 全 杨 桂连。 袁 子 国 ， ，
行 深 入 研 究 ， 已 成 为 最 有 效 的 基 因 表 达 载 体 现
之 一［ 。
腺病 毒 的可能 性 ， 比第 一代 具 有 更 低 的免 疫 原 性 和 更 大 的载 体容 量 ； ３代 腺病 毒 载体 又 称 辅 助 病 毒 第 依 赖型 腺病 毒载 体 （ ｚ ｒ Ｈ ｅ ｇ ａ ｅ ｏ ｉｕ ， ｄ ｎ ｖｒ ｓ
了其 缺乏 靶 向性 ， 介导 的转 基 因表达 时 间短 ， 限 其 并
制其 反 复 应 用 。由 此 可 见 ， ｖ载 体 的免 疫 原 性 、 Ａｄ
安全 性 和靶 向性 已成 为其构 建策 略 中改造 的重 点 。
构建 新 一代腺 病 毒载体 有 如下 目标 ：１ 降低 重 （）
＊家畜疫病病 原 生物学 国家重点 实验 室开 放基金（ ＫＩ Ｂ ０ ９ Ｋ ０４ Ｓ ＶＥ ２ｏ ＫＦ Ｔ ｌ 、
为 由病 毒介导 的基 因表 达 提供 了更 为安全 可靠 的载
ＷＴ Ｃ — Ｐ的衣 壳蛋 白 中插入 一 个 Ｐ Ｃ — ／ ＳＧＦ ｙ Ｓ Ｂ的抗 原表 位 ， 壳修 饰性 腺病 毒研 制 的多疫 苗接 种 后 ， 衣 可
大 幅提 高小 鼠的抗 疟 疾 水 平 ， 得 腺 病 毒 介 导 的基 使 因表 达 的 时 问 明显 延 长 。Ｅ ｉ ｂ ｔ ］ ｌ ａ ｅｈ等 系 统 地 探 ｚ
腺 病 毒 （ ｅ ｏ ｉ ｓ Ａｄ ） 于 腺 病 毒 科 ， Ａｄ ｎ ｖｒ ， ｖ 属 ｕ 线 状 、 包膜 的双链 Ｄ 无 ＮＡ 病 毒 ， 因组 大 小 约 ３ ｋ ， 基 ６ ｂ
由 ２ ０个 六邻 体 和 １ ４ ２个 五邻 体 构 成 二 十 面 体病 毒 壳体 。Ａｄ ｖ于 １ ５ ９ ３年 被病 毒学 家发 现 ， 此后不 断进
讨 ＴＬ 信号 的细胞 免 疫 应答 和替 代 型 与 普 通 肌 肉 Ｒ
注 射 免疫 小 鼠产 生 重 组 腺 病 毒 载 体 ， 究 表 明 研 Ｍｙ ８ Ｄ ８的依 赖 的 信 号 通 路 能 有 效 改 变 其 免 疫 原 性 。（ ） ］ ２ 增强 腺病 毒靶 向性 ， 可更 换 病毒 外壳 采 用
体渠 道 ， 制 能 高 效 转 移 基 因 、 达 高 度 组 织 特 异 研 表 性、 精确 控制 表 达 的病 毒 载 体 迫 在 眉 睫 。利 用 病 毒
载 体可 治疗 一些 特 殊疾 病 ， 时探 索 病 毒 载 体 所 面 同 临 的安 全性 和毒性 问题 ｌ 。 目前研 究 最多 的 主要有 ＿ ｌ Ｊ
１ 腺 病 毒 载 体
不 同类 型血 清型 获得 ； 除 ＡＤ载 体与 ｃ 消 ＡＲ结合 进
入 细胞 内 的通路 ； 与 靶 细 胞 表 面特 异 性 受 体 选 现 能
有 的腺 病毒 大致 可分 为 ３代 。第 １代腺 病毒 载 体 主
要 通过 去 除 Ｅ 、 ３区而 获 得 ， 转 染 分 择 性 结 合 。 １Ｅ 可
ＨＤ Ａｄ） ］ 仅 含有反 向末端 重复 序列 （Ｉ ｓ 和包 － ｌ， ６ ＴＲ ） 装 信号 （ ） 载体 容 量 达 ３ ｋ ， ， ７ ｂ 细胞 毒 性 和 免 疫 原 性 大 幅减 弱 ， 目的基 因 的 表 达 时 间 则 大 大 延 长 。 而 然而 ， 它需 要有辅 助 病 毒 和 互 补 细 胞 系才 能 够 包 装 产生病 毒 粒子 ， 即所 谓 的空壳 载体 ， 辅助 病毒 产量 且 很高 ， 离 困 难 ， 重 组 腺 病 毒 产 量 比例 为 １：ｌ 分 与 。 因此 ， 对第 ３ 腺病 毒进 行改 良研 究 ， 代 生产 出安 全 高 效 ， 向性 强 ， 靶 表达 时 间长并 可调 控 的新 一代 腺病 毒
（ ） 用 脂 质 体 作 为 转 染 Leabharlann Baidu 质 构 建 人 ＶＥ ３采 ＧＦ基 因 ｒ ＡＤ载体 ， 大提 高 了 转染 效 率 ］ 极 。分 裂期 细 胞 和
静止期 细 胞 。但 外 源 基 因 表达 水平 低 ， 易诱 发 机体 产生 免疫 反应 ； ２代 腺 病 毒 载 体 进 一 步 去 除 了 部 第 分或 全部 的 Ｅ ２基 因或 Ｅ ４基 因 ， 除 了产 生复 制 型 消
腺 病毒 载体 、 伪狂 犬 病 毒 载 体 、 病 毒 载体 、 痘 病 慢 鸡 毒 载体 、 ５型 腺 病 毒 载体 等 。理想 的病 毒 载 体 在 人 基 因治 疗 、 疫苗研 制 、 疫病 防控 等领 域 的贡献 不可 估
量 。本 文对 上 述 ５种 病 毒 载 体 的 研 究 进 展 作 一 综 述， 旨在 为开发 出更 安全 、 有效 的重组 病毒 载体 提 更 供参考。
腺病 毒 具有 宿 主范 围广 、 整合 人 宿主细 胞 内 、 不 插 入外 源基 因大 （ ７ ｂ 、 同时 表 达 多个 基 因且 表 ３ ｋ ）能 达 水平 高等 优点 ， 因此 成 为 表 达 和传 递 治 疗 基 因 的
主 要 候 选 者 。 而 腺 病 毒 感 染 的 广 泛 性 ， 时 也 决 定 同
重组 病毒 载体 是 当今 病 毒基 因工 程研究 的热点
组腺病 毒 载体产 生 的机 体抗 原特 异 性 免 疫 反 应 ， 在
之一 。载 体是供 插 人 目的基 因并将 其 导入 宿 主细胞 内表 达或 复制 的运 载 工具 。近 年来 ， 组 病毒 载 体 重
中 国 人 兽 共 患 病 学 报
２ ４ ８ Ｃｈｉ ｅ ｅ Ｊ ｕｒ ｌｏ ｎ ｓ ｎａ ｆＺｏｏ ｏｓ ｓ ｏ ｎ ｅ
文 章 编 号 ：０ ２ ６ ４ ２ １ ） ３ ２ ４ ５ １ ０ —２ ９ （ ０ ２ ０ —０ ８ —０
重 组 病 毒 载 体 研 究 进 展
王培 园 ， 李 结 ， 朱兴 全 杨 桂连。 袁 子 国 ， ，
行 深 入 研 究 ， 已 成 为 最 有 效 的 基 因 表 达 载 体 现
之 一［ 。
腺病 毒 的可能 性 ， 比第 一代 具 有 更 低 的免 疫 原 性 和 更 大 的载 体容 量 ； ３代 腺病 毒 载体 又 称 辅 助 病 毒 第 依 赖型 腺病 毒载 体 （ ｚ ｒ Ｈ ｅ ｇ ａ ｅ ｏ ｉｕ ， ｄ ｎ ｖｒ ｓ
了其 缺乏 靶 向性 ， 介导 的转 基 因表达 时 间短 ， 限 其 并
制其 反 复 应 用 。由 此 可 见 ， ｖ载 体 的免 疫 原 性 、 Ａｄ
安全 性 和靶 向性 已成 为其构 建策 略 中改造 的重 点 。
构建 新 一代腺 病 毒载体 有 如下 目标 ：１ 降低 重 （）
＊家畜疫病病 原 生物学 国家重点 实验 室开 放基金（ ＫＩ Ｂ ０ ９ Ｋ ０４ Ｓ ＶＥ ２ｏ ＫＦ Ｔ ｌ 、
为 由病 毒介导 的基 因表 达 提供 了更 为安全 可靠 的载
ＷＴ Ｃ — Ｐ的衣 壳蛋 白 中插入 一 个 Ｐ Ｃ — ／ ＳＧＦ ｙ Ｓ Ｂ的抗 原表 位 ， 壳修 饰性 腺病 毒研 制 的多疫 苗接 种 后 ， 衣 可
大 幅提 高小 鼠的抗 疟 疾 水 平 ， 得 腺 病 毒 介 导 的基 使 因表 达 的 时 问 明显 延 长 。Ｅ ｉ ｂ ｔ ］ ｌ ａ ｅｈ等 系 统 地 探 ｚ
腺 病 毒 （ ｅ ｏ ｉ ｓ Ａｄ ） 于 腺 病 毒 科 ， Ａｄ ｎ ｖｒ ， ｖ 属 ｕ 线 状 、 包膜 的双链 Ｄ 无 ＮＡ 病 毒 ， 因组 大 小 约 ３ ｋ ， 基 ６ ｂ
由 ２ ０个 六邻 体 和 １ ４ ２个 五邻 体 构 成 二 十 面 体病 毒 壳体 。Ａｄ ｖ于 １ ５ ９ ３年 被病 毒学 家发 现 ， 此后不 断进
讨 ＴＬ 信号 的细胞 免 疫 应答 和替 代 型 与 普 通 肌 肉 Ｒ
注 射 免疫 小 鼠产 生 重 组 腺 病 毒 载 体 ， 究 表 明 研 Ｍｙ ８ Ｄ ８的依 赖 的 信 号 通 路 能 有 效 改 变 其 免 疫 原 性 。（ ） ］ ２ 增强 腺病 毒靶 向性 ， 可更 换 病毒 外壳 采 用
体渠 道 ， 制 能 高 效 转 移 基 因 、 达 高 度 组 织 特 异 研 表 性、 精确 控制 表 达 的病 毒 载 体 迫 在 眉 睫 。利 用 病 毒
载 体可 治疗 一些 特 殊疾 病 ， 时探 索 病 毒 载 体 所 面 同 临 的安 全性 和毒性 问题 ｌ 。 目前研 究 最多 的 主要有 ＿ ｌ Ｊ
１ 腺 病 毒 载 体
不 同类 型血 清型 获得 ； 除 ＡＤ载 体与 ｃ 消 ＡＲ结合 进
入 细胞 内 的通路 ； 与 靶 细 胞 表 面特 异 性 受 体 选 现 能
有 的腺 病毒 大致 可分 为 ３代 。第 １代腺 病毒 载 体 主
要 通过 去 除 Ｅ 、 ３区而 获 得 ， 转 染 分 择 性 结 合 。 １Ｅ 可
ＨＤ Ａｄ） ］ 仅 含有反 向末端 重复 序列 （Ｉ ｓ 和包 － ｌ， ６ ＴＲ ） 装 信号 （ ） 载体 容 量 达 ３ ｋ ， ， ７ ｂ 细胞 毒 性 和 免 疫 原 性 大 幅减 弱 ， 目的基 因 的 表 达 时 间 则 大 大 延 长 。 而 然而 ， 它需 要有辅 助 病 毒 和 互 补 细 胞 系才 能 够 包 装 产生病 毒 粒子 ， 即所 谓 的空壳 载体 ， 辅助 病毒 产量 且 很高 ， 离 困 难 ， 重 组 腺 病 毒 产 量 比例 为 １：ｌ 分 与 。 因此 ， 对第 ３ 腺病 毒进 行改 良研 究 ， 代 生产 出安 全 高 效 ， 向性 强 ， 靶 表达 时 间长并 可调 控 的新 一代 腺病 毒
（ ） 用 脂 质 体 作 为 转 染 Leabharlann Baidu 质 构 建 人 ＶＥ ３采 ＧＦ基 因 ｒ ＡＤ载体 ， 大提 高 了 转染 效 率 ］ 极 。分 裂期 细 胞 和
静止期 细 胞 。但 外 源 基 因 表达 水平 低 ， 易诱 发 机体 产生 免疫 反应 ； ２代 腺 病 毒 载 体 进 一 步 去 除 了 部 第 分或 全部 的 Ｅ ２基 因或 Ｅ ４基 因 ， 除 了产 生复 制 型 消
腺 病毒 载体 、 伪狂 犬 病 毒 载 体 、 病 毒 载体 、 痘 病 慢 鸡 毒 载体 、 ５型 腺 病 毒 载体 等 。理想 的病 毒 载 体 在 人 基 因治 疗 、 疫苗研 制 、 疫病 防控 等领 域 的贡献 不可 估
量 。本 文对 上 述 ５种 病 毒 载 体 的 研 究 进 展 作 一 综 述， 旨在 为开发 出更 安全 、 有效 的重组 病毒 载体 提 更 供参考。
腺病 毒 具有 宿 主范 围广 、 整合 人 宿主细 胞 内 、 不 插 入外 源基 因大 （ ７ ｂ 、 同时 表 达 多个 基 因且 表 ３ ｋ ）能 达 水平 高等 优点 ， 因此 成 为 表 达 和传 递 治 疗 基 因 的
主 要 候 选 者 。 而 腺 病 毒 感 染 的 广 泛 性 ， 时 也 决 定 同