食品中微生物的快速检测
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检测范围
• • • • • • • • • • 活细菌总数 大肠菌群/大肠杆菌/大肠杆菌0157、0111、 0104等 肠道杆菌科 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌、绿脓杆菌 沙门氏菌 李斯特菌 肠球菌 曲霉属真菌、曲霉菌属 酵母菌
主要特点
• 可检测固态、液态、表面、膏状、浆状样本 • 仪器检测原理:集合培养皿法、酶法(β -葡萄糖苷酸酶分析)、免 疫法(抗原搜寻)及基因法 • 8个检测位都是独立作业可满足检测不同样品不同微生物的需求.每 个检测位都是独立的. • 为检测更多的样品可多台机连接至同一台计算机使用, • 可以自动选择控制检验项目温度; • 三光波同时检测(蓝,绿,红) • 检测结束后自动产生定量分析报告 • 操作中如果翻盖则自动停止分析,具光波防护安全装置。 • 样本在检测时无需任何的前处理过程,直接丢入检测瓶即可 • 检测样本只需 1ml/1g; • 灵敏度高达可检测到 1 目标微生物; • 特异性高达 99.999%; • 操作简单 • 仪器便携式,可随时随地进行检测、100%定量分析,并可直接连接电 脑出定量分析检测报告。
• ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ点
检测方法与使用的仪器有高度的特异性,所以应遵循生产 厂商提供的方法。
流式细胞技术
• FOSS公司BactoScan FC牛奶中总菌数快速检测仪
采用流式细胞原理。对微生物进行核酸染色,用流式细胞 技术进行计数。 优点:速度快(50-150样品/小时) 缺点:死活细胞一起检测,消耗成本较高,仪器比较难保 养。灵敏度不够高。 适合牛奶企业检测原奶中细菌总数。
发射测量法
利用细菌在代谢碳水化合物时产生CO2的原理,把微量的 放射性标记引入葡萄糖或其他糖类分子中。细菌生长时, 糖被利用并放出标记的CO2,将生成的放射性标记CO2从 培养装置中导出或用化学法吸收后,利用专用的放射测量 仪来测定放射性CO2 。放射量与菌数成正比。
RVLM微生物快速检测仪
德国RBG公司RVLM微生物快速检测系统是为客户在微 生物检测方面的需要和需求提供创新的解决方案.整套 RVLM微生物快速检测系统包含了检测仪器及电脑软件和专 配的检测瓶.该产品得到美国EPA、美国军方、加拿大政府 和贝尔实验室等权威机构的认可和广泛应用。
通过颜色变化检测
• 微生物生长导致培养基pH值发生变 化,由光学检测器检测底部琼脂层 的颜色变化,记录达到突变点的时 间。 • 与阻抗法类似,可以实现快速检测。 • 缺点:需要购买原厂的预装培养基, 应用范围受限制,成本高昂。
流式细胞技术
• 原理
液体样品流过仪器中的激光照射的流动池,当微生物流过 显微镜聚焦的流动池时就能被自动地检测到。
检测步骤
• • • • • • 放入样本 打开瓶盖,加入11ml无菌水 放入液态(固态)样本0.1~1.0ml(0.1~1.0g) 盖紧瓶盖 摇动瓶子直到溶剂充分溶解 充分溶解混合后立即放入检测仪 ,得到100%定量分析结 果 • 使用后无菌处理 :按下RVL微生物检测瓶的瓶盖上方 • 放心安全丢弃(与过期药物同样处理)
流式细胞技术
• 美国Chemunex公司微生物快速检测系统
将流式细胞技术与活细胞荧光探针标记及激光扫描技术相 结合,推出的最新一代的速度更快的Bactiflow以及更高 端的ScanRDI和D-count微生物快速检测仪。 其最大的特点是只检测活细胞数,速度极快,处理量大。 检测步骤:1、过滤;2、标记,直接对活细胞和酵母进行 标记;3、激光扫描。
微量量热法
利用细菌生长时产生热量的原理设计而成。微生物在生长 和代谢的过程中,能产生大量的代谢热。由于各种微生物 的代谢产物热效应不同,因此可显示出特异性的热效应曲 线图。热效应曲线图的形成,是由于培养基含有多种成分, 微生物则产生多种不同的代谢产物,以此表现出的热效应 为多个曲线峰,如为单一营养成分,则只有一个峰出现。 在细菌生长的过程中,用微量量热计测量产热量等热数据, 经计算机处理,绘制成以产热量对比时间组成的热曲线图, 以此推断细菌存在数量。
ATP生物荧光法 二.应用
可用于:食品、医药 卫生、医药、日化、 造纸、工业水处理、 国防以及环保、水政、 海关出入境检疫及其 他执法部门等多种行 业。
电阻抗法
• 原理
供细菌生长的液体培养基是电的良导体,在特制的测量 管底部装入电极插头,即可对接种生长的培养基的阻抗变 化进行检测。阻抗变化的产生是由于微生物生长过程中的 新陈代谢使培养基中的大分子营养物质(糖、脂类、蛋白 质等)被分解成小分子代谢物,即较小的带电离子(乳酸 盐、醋酸盐、重碳酸或氨等)这些代谢产物的出现和聚集, 增强了培养基的导电性能,从而降低了其阻抗值。
微生物快速检测方法
1.ATP生物荧光法 2.电阻抗法
3.颜色变化
4.流式细胞技术及激光扫描技术 5.热量法、放射测量法
ATP生物荧光法
一.原理
• “ATP荧光法微生物快速检测系统”简称“细菌快检仪”, 依据萤火虫发光原理研制,由试剂组、微量荧光检测仪、 样品预处理耗材三部件组成。该仪器可在短短1-5分钟内即 完成测试,并提供实时检测数据,具备准确、便携、操作 容易等特点,同时可以连接电脑,对数据进行储存。 • ATP+萤光素+萤光素酶+O2—AMP+Ppi+二氧化碳+氧化萤光 素+光