生物化学课程教学大纲

《生物化学实验》课程教学大纲

【课程编号】17315241

【英文名称】Experiments of Biochemistry

【课程学时】48

【适用专业】生物技术、生物工程

一、本实验课程的教学目的和课程性质

生物化学实验是生物技术和生物工程专业学生的必修专业基础课，是一门理论性和实用性很强的课程。本实验课程的教学目的是通过对实验室基本操作规范、大分子物质性质鉴定、比色测定、大分子物质的分离和提纯、电泳分离等方面的理论和实践教学进一步加深和巩固学生对生物化学理论知识的学习，培养学生的实验技能，有效地提高学生的动手能力，为今后的科研工作打下基础。

二、本实验课程的基本要求

通过生物化学实验的教学，使学生达到如下要求：

1.在实验过程中将生物化学的理论知识进一步验证、巩固、扩充和提高。

2.学会正确使用有关生化仪器，了解和掌握生化实验室的基本操作规范。

3.培养学生在进行生物学实验时的实验过程、结果分析、实验设计和动手实验的能力，培养和提高学生的实验操作技能。

4.掌握包括蛋白质、核酸、酶、维生素、脂类和代谢各方面实验方法和技能，掌握离心、滴定、比色、层析、电泳等各种生物化学实验技术。

5.培养学生学习兴趣、重视实践、探索进取、吃苦耐劳、团结合作的精神。。

6.培养科研能力和科学素质，使学生具有严格的科学学风和发现、分析、解决问题的初步能力。

三、本实验课程与其它课程的关系

本实验课程上承《无机化学实验》、《分析化学实验》和《有机化学实验》，下续《植物生理学实验》、《遗传学实验》、《分子生物学实验》等课程，因此生物化学实验的学习是学生进行其他生物学实验的前奏，是今后开展生物学方面实验和研究的基础。

四、实验课程理论教学内容安排（共安排6学时）

第一部分生物化学实验室的基本操作规范（1.0学时）

【目的要求】

1、了解实验的生物学性质和化学性质。

2、了解实验室的基本操作规范和实验误差的控制。

3、了解生物样品的制备方法。

【教学内容】了解生物化学实验的基本操作规范及准确测定的方法。

第一节实验室基本操作规范

第二节准确测量的方法

第三节普通生物样品的制备方法

【教学重点】掌握减少误差提高实验准确性的方法。

【教学难点】如何减少实验误差提高实验准确性。

第二部分层析法的原理与方法（1.5学时）

【目的要求】

1、掌握层析法的原理。

2、了解层析法的种类。

3、运用层析法分离化合物。

【教学内容】通过纸层析法分离氨基酸掌握层析法的原理与方法。

第一节层析法的基本原理

第二节几种常用的层析法

第三节纸层析法分离氨基酸

【教学重点】掌握层析法的基本原理。

【教学难点】如何针对不同的物质分离采用不同的层析法。

第三部分比色测定原理与方法（1.5学时）

【目的要求】

1、了解分光光度计的使用。

2、熟悉实验结果的处理。

3、掌握比色测定的方法与原理。

【教学内容】通过总糖的测定、可溶性蛋白含量的测定、小麦萌发前后淀粉酶活性的比较，掌握比色测定的方法与原理。

第一节比色测定的原理

第二节分光光度计的正确使用

第三节实验结果的处理方法

【教学重点】掌握比色测定的原理及分光光度计的使用方法。

【教学难点】如何减小比色测定的误差及实验结果的处理。

第四部分电泳的原理与方法（2学时）

【目的要求】

1、了解电泳技术的基本原理

2、掌握电泳过程中的关键步骤。

3、掌握实验结果的分析。

【教学内容】通过醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离可溶性蛋白的实验来讲解电泳技术的基本原理，电泳的种类及基本操作步骤。

第一节电泳技术基本原理

第二节电泳的种类

第三节电泳技术的基本操作步骤

【教学重点】掌握电泳技术的基本原理。

【教学难点】电泳技术中的关键步骤。

五、实验内容安排

2、实验项目说明

实验一、糖类的性质实验

【目的要求】了解糖类的某些颜色反应的原理，学习应用糖的颜色反应来鉴别糖类的方法，学习几种常用的鉴定糖类还原性的方法。

【内容】糖类的颜色反应：α-萘酚反应：糖在无机酸作用下，脱水生成糠醛及糠醛衍生物，后者能与α-萘酚生成紫红色物质。间苯二酚反应：在酸的作用下，酮糖脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚反应生成红色物质，此反应是酮糖的特异反应。糖类的还原反应：一些糖类分子中含有的醛基或酮基，在碱性溶液中能够将铜、铁、银等金属离子还原，同时本身被氧化成糖酸及其它产物。斐林试剂与本尼迪克特试剂能够将硫酸铜里的Cu2+还原成红色或黄色的Cu2O。

【方法】α-萘酚反应、间苯二酚反应、斐林试剂与本尼迪克特试剂。

实验二、总糖的测定

【目的要求】学习蒽酮比色定糖法的原理和方法，学习分光光度计的原理与方法。

【内容】糖类在较高温度下被硫酸作用脱水生成糠醛或糠醛衍生物后与蒽酮缩合成蓝色化合物，溶液的含糖量在150µg以内，与蒽酮反应生成的颜色深浅与糖量成正比。

【方法】蒽酮比色法

实验三、粗脂肪的提取和测定

【目的要求】学习和掌握用索氏提取器提取脂肪的原理和方法，学习和掌握重量分析法对粗脂肪进行定量测定。

【内容】利用脂类物质溶于有机溶剂的特性，在索氏提取器中用有机溶剂对样品中的脂类物质进行提取，因提取的物质是脂类混合物故称为粗脂肪。将样品抽提出的粗脂肪，蒸去溶剂，干燥，称重，按公式求出样品中的粗脂肪含量。

【方法】索氏提取法、重量分析法。

实验四、脂肪碘值的测定

【目的要求】学习测定脂肪碘值的原理和方法。