离子色谱

1.3 离子色谱的诞生
我们很早就知道，离子交换色谱可以对许多物质进行分离，如阳离子交换树脂可以分离阳离子，而阴离子交换树脂可以分离阴离子。离子交换色谱是高效液相色谱分离的一种方法，但传统的高效液相色谱分析方法，主要采用紫外及可见光检测器。大多数有机化合物有足够的共轭双键，具备一定的紫外吸收，因此高效液相色谱可以对大多数有机化合物进行分析。对于大多数无机离子虽然可以用离子交换色谱分离，但是由于没有紫外吸收和合适的检测手段，使之无法用高效液相色谱(HPLC)进行分析。前面已经提到离子色谱最早是在1975年，由美国Dow化学公司的H.Small等人首先提出的，离子色谱与传统的HPLC方法不同点在于检测原理我们知道，对于大多数电离物质，在溶液中电离，产生电导，通过对它们的电导检测，就可以对它的电离程度进行分析。由于在稀溶液中大多数电离物质完全电离，因此可以通过电导检测被测物质的含量。所以，电导率的测定已经成为一种十分有用的水溶液分析工具。能否采用电导作为色谱检测的工具呢?以前也有人进行了大量的尝试，但问题尚未得到最后解决。传统的水溶液中阴离子和阳离子的定性和定量分析，往往对不同离子需要采用不同的方法，而样品基体对测定会产生干扰，影响测定，因此痕量的、性质相似的离子测定往往是十分困难的。在分离离子态物质时，可以采用离子交换树脂，例如用树脂去除离子态的不纯，将其浓缩成一种或多种物质，并催化化学反应和分离不同离子。对于离子的分离有大量的离子交换树脂分离方案，但却没有出现相关的商品化仪器。仪器在线的检测器可以提供快速、重复性的分析，这在离子色谱诞生前就已经出现，而液相色谱中采用的检测器，对离子色谱却不太适合。如光度检测器是高效液相色谱中最常用的检测器，它可以测定在一定波长有吸收的物质，而采用的淋洗液必须是在此波长下没有任何吸收，但大多数常见离子只有在低波长条件下才能吸收，将这些物质转化为有光度吸收的物质，需要一定的试剂、反应条件和特定的分析波长，这方面典型的例子就是氨基酸分析采用茚三酮(ninhydrin)和邻苯二醛(o-phthaldehyde)发色后进行吸光光度或荧光检测。折光指数检测器难以对痕量离子进行高灵敏的检测，而电化学检测需要离子态物质具有易氧化或还原性质，它只有在特定的情况下才可以采用。由于在溶液中不同离子都不同程度地表现出一定的电导，所以离子色谱通用检测器可以电导检测器为基础，但关键问题是不仅被测离子具有电导，而且一般淋洗液本身是一

种电离物质，具有很强的电离度，因此采用电导检测时，被测离子的电导会被湮没在淋洗液电导之中，以致无法对低含量被测离子进行检测。为了减少高背景电导问题，当时在Dow公司的W.Bauman博士提出了很关键的设想：在分离柱后串联第二种树脂以减少背景电导。即在一根色谱柱中，一大半填入低交换容量含有磺酸基的苯乙烯二乙烯苯聚合物作为分离树脂，而小部分大交换容量的季铵盐的苯乙烯二乙烯苯聚合物树脂填入色谱柱的下半部分作为抑制树脂，它可以很好地分离钠离子和钾离子。这一系统的关键是将高电导的HCl转化成低电导的水，当色谱柱的抑制树脂中的氢离子逐步转化成氯离子后，这种双功能色谱柱就不再有抑制HCl的功能，而且抑制树脂从氯离子型再生成氢离子型也比较困难。
H.Small和T.S.Stevens采用这一原理，制成了第一台离子色谱仪，在分离用的离子交换柱后端加入不同极性的离子交换树脂填料，该树脂填料呈氢型或氢氧根型。如阴离子交换柱后端加入氢型的阳离子交换树脂填料，阳离子交换柱后端加入氢氧根型的阴离子交换树脂填料。当由分离柱流出的携带待测离子的洗脱液，在检测前发生两个简单而重要的化学反应：一个是将淋洗液转变成低电导组分，以降低来自淋洗液的背景电导；另一个是将样品离子转变成其相应的酸或碱，以增加其电导。
这种在分离柱和检测器之间降低背景电导值而提高检测灵敏度的装置，后来组成独立组件称为抑制柱(或抑制器)，通过这种方式使电导检测的应用范围扩大了，在H.Small等人提议下，称这种液相色谱为离子色谱。离子色谱一经诞生就立即商品化，美国从20世纪70年代中期就生产了离子色谱仪，并获得有关的专利。Dow化学公司组建Dionex公司专门生产和研制离子色谱仪。
由于H.Small等人研制的抑制型离子色谱仪是专利产品，只有Dionex公司可以生产和销售，人们设想采用其他途径研制离子色谱仪。这其中最为成功的是在美国依阿华州立大学J.S. Fritz等人提出非抑制型离子色谱，即采用低交换容量的离子交换树脂制成色谱柱，采用弱酸及其盐类作为淋洗液对不同离子进行淋洗，在控制一定pH值的条件下，背景电导比较低，可以不加抑制器直接电导检测。该方法称为非抑制电导离子色谱。由于非抑制型离子色谱只采用了分离柱，人们通常称之为单柱型离子色谱；而对应的称为抑制型离子色谱，由于采用分离柱和抑制器，又称为双柱型离子色谱。
20世纪80年代初，离子色谱已经广泛地被人们所认同、接受，离子色谱的销售量每年以15%以上的速度递增。美国化学文摘及英国的分析化学文摘专

门将离子色谱分成独立的一类；而Journal of Chromatography Science每年在介绍色谱仪器时，将其分为液相色谱、气相色谱、离子色谱和毛细管电泳4大类型。国际上每年都召开国际离子色谱学术会议，至今已经召开了十四届，而国内目前也每两年召开一次全国性离子色谱会议和一些区域性的离子色谱协作会议。由此可见，离子色谱学科以飞快的速度向前发展。
1.4离子色谱的分离类型
离子色谱的分离原理，可以分3种不同类型，主要分为离子交换色谱、离子对色谱和离子排斥色谱。
一、离子交换色谱
离子色谱分离，主要是应用离子交换的原理，采用低交换容量的离子交换树脂来分离离子，它在离子色谱中应用最广泛，其主要填料类型为有机离子交换树脂。以苯乙烯二乙烯苯共聚体为骨架，在苯环上引入磺酸基形成强酸型阳离子交换树脂，引入叔胺基而成季胺型强碱性阴离子交换树脂，此交换树脂具有大孔或薄壳型或多孔表面层型的物理结构，以便于快速达到交换平衡。离子交换树脂耐酸碱，可在任何pH范围内使用，易再生处理，使用寿命长。缺点是机械强度差，易溶胀，易受有机物污染。
硅质键合离子交换剂以硅胶为载体，将有离子交换基的有机硅烷与基表面的硅醇基反应，形成化学键合型离子交换剂。其特点是柱效高，交换平衡快，机械强度高。缺点是不耐酸碱，只宜在pH2～8范围内使用。
二、离子对色谱
离子对色谱的固定相为疏水型的中性填料，可用苯乙烯二乙烯苯树脂或十八烷基硅胶(ODS)，也有用C8硅胶或CN固定相。流动相由含有所谓"对离子"试剂和含适量有机溶剂的水溶液组成。"对离子"是指其电荷与待测离子相反，并能与之生成疏水性离子对化合物的表面活性剂离子。用于阴离子分离的对离子是烷基胺类，如氢氧化四丁基铵、氢氧化十六烷基三甲烷等。用于阳离子分离的对离子是烷基磺酸类，如己烷磺酸钠、庚烷磺酸钠等。对离子的非极性端亲脂，极性端亲水，其-CH2-键越长，则离子对化合物在固定相的保留越强。在极性流动相中往往加入一些有机溶剂以加快淋洗速度，此法主要用于疏水性阴离子以及金属络合物的分离。至于其分离机理则有3种不同的假说：反相离子对分配、离子交换以及离子相互作用。
三、离子排斥色谱
它主要根据Donnon膜排斥效应：电离组分受排斥不被保留，而弱酸则有一定保留的原理制成。离子排斥色谱主要用于分离有机酸以及无机含氧酸根，如硼酸根、碳酸根和硫酸根、有机酸等。它主要采用高交换容量的磺化H型阳离子交换树脂为填料，以稀盐酸为淋洗液。
1.5离子色谱的

检测方法
随着离子色谱的广泛应用，离子色谱的检测技术，已由单一的化学抑制型电导法，发展为包括电化学、光化学和与其他多种分析仪器联用的方法。
一、抑制电导检测法
抑制型电导技术由最初的抑制柱技术，又经历了可连续再生式的纤维管、微膜抑制器阶段，最新的抑制技术采用电解抑制法，使抑制电导检测可以自动进行而不必采用传统的再生液。通过电导抑制可以使背景电导值很低，而检测灵敏度可以达到很高水平。
因此，目前大多数离子色谱基本上还是采用抑制电导法检测。无论是痕量测定的电场，还是半导体工业，抑制电导检测始终是最理想的方法。
二、直接电导检测法
目前单柱法已发展为可补偿高达6000μS背景电导的电导检测器。五极式电导仪可消除极化和电解效应，以降低噪音水平，提高单柱法检测的灵敏度和稳定性。
阳离子单柱法检测信号是离子电导与淋洗液电导之差，一般情况下为负值。只要淋洗条件得当，单柱法同样可达到很高的灵敏度。
三、紫外吸收光度法
在195～220nm具强紫外吸收的阴离子可用弱紫外吸收的淋洗液直接进行紫外吸收，其选择性和灵敏度都很高，它使硝酸根、亚硝酸根等离子可检测至μg／L。间接紫外检测用于本身不具紫外吸收离子的分析，淋洗液具强紫外吸收，检测信号为负值。阴离子淋洗液多用芳香有机酸和邻苯二甲酸盐、磺基苯甲酸盐等。阳离子则以具紫外吸收的Cu2+或Ce3+溶液为淋洗液。四、柱后衍生光度法
包括重金属、碱土金属、碱金属、稀有金属等40余种金属离子，可用吡啶偶氮间苯二胺(PAR)柱后衍生光度法检测，方法既灵敏又实用。重金属和碱土金属的检出限达μg／L级。偶氮胂Ⅲ亦为稀土金属离子的高灵敏柱后衍生剂。铬天青S、十六烷基三甲胺、Triton X 100对痕量铝离子和铁离子、水溶性卟啉衍生物对痕量Cd2+、Hg2+、Zn2+的检测，均是高选择性和高灵敏度衍生试剂。柱后衍生荧光法主要用于氨基酸和胺类化合物的检测，也可能发展为稀土测定的选择性衍生方法。
五、电化学法
安培法用于选择性检测某些能在电极表面发生氧化还原反应的离子，如亚硝酸根、氰根、硫
酸根、卤素离子、硫氰根等无机离子，以及一些胺类、酚类等易氧化还原的有机离子，亦用于重金属离子的检测，卤素和氰根亦可用库仑法检测或应用银电极的电位检测，还可用铜离子电极电位法检测阳离子和阴离子。库仑法还用于As3+／As5+和Mo6+／Cr3+的检测。
六、与元素选择性检测器联用法
将离子色谱的分离优势与元素选择性检测方法联用，可以结合分离及高选择性和高

灵敏度的优势，并可用于某些元素的形态分析。如用原子吸收检测亚硒酸／硒酸、亚砷酸／砷酸等。等离子体发射光谱用于Cr3+／Cr6+和砷／硒的检测。
1.6离子色谱的新进展
一、新型电化学技术在离子色谱中的应用
当前，离子色谱发展的一个最新动向是，由电化学技术结合新型高分子材料，并逐渐在离子色谱中得到广泛的应用。最显著的例子如下：
(1)电化学自再生抑制器：电解法用于离子色谱抑制，最初由我国厦门大学田昭武院士等提出，并分别申请了中国和美国专利，实现商品化。
美国Dionex公司对这一方法进行了改进，使抑制器的再生液只加水就能完成，通过水电解产生的H+或OH-完成背景电导抑制。抑制器完全不必外加再生液就能完成电导抑制，使抑制型离子色谱的操作更为方便。而美国Alttech公司则采用固相电解法，利用树脂实现电导抑制。由电解产生H＋实现电化学再生，再将碳酸盐淋洗液中的CO2去除，以进一步降低背景电导值，从而实现了碳酸的梯度淋洗。
(2)淋洗液发生器：通过水电解法产生OH-或H+，与树脂中已经结合的K+或C-形成KOH或HCl,成为淋洗液。这种方法减少了OH-因空气中CO2干扰使基线不稳、背景改变的情况，同时所产生的KOH浓度可以通过电流进行控制，很容易地进行梯度淋洗。
(3)离子回流：H.Small等人在1998年提出了离子色谱的新设想--离子回流。其原理是将离子色谱淋洗液发生器及离子色谱电化学自再生抑制器串联。从此，离子色谱的淋洗形成一个循环系统，使离子色谱方法又有一个更新的概念。为此，他本人在1998年日本大阪再次获得离子色谱学术大奖。