病理学进展复习 梦丽姐

病理性进展

1.简述现代病理学方法有哪几类？请例举两种你熟悉的现代病理学方法，简述其原理、优势和不足。

(1)细胞的表型——免疫组织化学检查:

原理：根据抗原抗体反应和化学显色原理，组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合，再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应，前者再用标记辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如链霉亲和素等）结合，最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分，在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物，从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。基本原理：形成“抗原－抗体复合物”。

可用于临床诊断和鉴别诊断，肿瘤的分型，肿瘤起源的判断，靶向药物的筛选，肿瘤生物学行为的判断病原体的检测等。

优势：相比于其他蛋白检测方法，免疫组化具有特异性强，定性灵敏度高、定位较直接准确的优点，是定位检测分析首选方法。尤其对于有些因子的转位研究十分有用。

不足：操作比较复杂，对技术要求较高。

(2)细胞的基因型变化：

●肿瘤染色体不平衡分析：

➢CGH

用不同荧光标记体系标记待测基因和正常基因的全基因组DNA，各取等量标记产物制成混合探针，与足够量的同一种属来源的Cot-I DNA预杂交以封闭重复序列，然后与正常中期分裂相进行染色体原位抑制杂交，测试分析。优点：1.做单一的一次杂交即可检查肿瘤整个基因组的染色体拷贝数量的变化。2.此法不仅适用于外周血、培养细胞和新鲜组织样本的研究，还可用于对存档组织的研究，也可用于因DNA量过少而经PCR扩增的样本的研究。缺点：CGH 技术所能检测到的最小的DNA扩增或丢失是在3-5Mb,故对于低水平的DNA扩增和小片段的丢失会漏检。此外在相差染色体的拷贝数量无变化时，CGH技术不能检测出平等染色体的易位（就是姐妹染色单体同源序列的互换）

➢FISH

如果被检测的染色体或DNA纤维切片上的靶DNA与所用的核酸探针是同源互补的，二者形成杂交体，将核酸探针的某一种核苷酸标记上报告分子如生物素、地高辛，可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的免疫化学反应，经荧光检测体系在镜下对待测DNA进行定性、定量或相对定位分析。优点：①安全、快速、灵敏度高；②探针能较长时间保存；③多色标记，简单直观；④可用于中期染色体及间期细胞的分析；⑤可应用于新鲜、冷冻或石蜡包埋标本以及穿刺物和脱落细胞等多种物质的检测。缺点：不能达到100%杂交，特别是在应用较短的cDNA探针时效率明显下降

●肿瘤等位基因不平衡分析

●肿瘤DNA 不稳定性分析

●肿瘤的单克隆性分析

（3）.随访检验

（4）.形态学——电子显微镜技术

2.例举你所感兴趣的现代病理学前沿领域的动态:领域、现状、问题所在、现有的解决办法、可能的解决方案。

结直肠癌（CRC）属危害严重的消化道恶性肿瘤，其发病率约占所有恶性肿瘤的10％－15%，是西方国家导致癌症相关死亡的第二大疾病。目前，中国CRC 发病也逐年上升速，每年新增病例高达40 万。研究显示，K-ras基因是细胞内信号传导通路中重要的“开关”，从而影响肿瘤的生长和扩散。K-ras基因可以是正常状态（野生型）或异常状态（突变型），约有35%结直肠癌患者为K-ras突变型。

如今新兴的一个药物是爱必妥，爱必妥是抗EGFR（表皮生长因子受体）单克隆抗体（单抗），用于治疗结直肠癌的生物靶向治疗药物。但是K-ras基因编码异常的蛋白，刺激促进恶性肿瘤细胞的生长和扩散，并且不受上游EGFR 的信号影响，所以对爱必妥治疗效果差。

解决方法：K-RAS 基因检测则是了解结直肠癌患者癌基因状况最直接、最有效的方法。只有KRAS 基因未发生突变的患者才适合使用EGFR 靶向药物治疗。因此，K-RAS 基因检测可以筛选出EGFR 受体靶向药物治疗有效的CRC 癌患者，实现患者的个体化治疗，从而获得良好的预后，延长患者的生命。更为重要的是，此检测能够帮助早期症状不明显的结直肠癌患者尽早得知病情，实现癌症的早发现、早治疗，避免错过最佳治疗时机。

3. 现代癌症研究中的重要人物科学上有哪些贡献?

Weinberg 发现了第一个癌的抑制基因RB。

Vogelstein B 等人从分子水平上建立了解释导致肠癌发生的模型。

Vogelstein 和Lengauer合作发表肠癌细胞中染色体得到和失去的显著性提高，并提出染色体的不稳定早于原癌基因与抑癌基因突变之前。

第一个病毒癌基因的发现：Duesberg PH 是发现者之一。经过紧20 年的反潮流研究，几乎被踢出美国NIH 的Duesberg于90 年代末和他的学生们提出了癌变的非整倍体假说。Reid 识别出人体子宫颈癌和肠癌的周期性的非整倍体模式。

美国麻省理工学院怀特黑德研究所的A．Weinberg 提出：“5、6个不同的调节系统必须依次受到干扰后，才能使正常细胞生长成为癌症。”——Weinberg 是标准模式的创立者之一。

乳腺癌——张伟

1.乳腺癌目前常用的组织学分级系统？如何分级

改良Scarff-Bloom-Richardson分级系统。腺管形成的比例、细胞的多形性和核分裂象计数。

腺管形成：低倍镜下腺管有明确的中央腺腔；细胞核的多形性：观察肿瘤中多形性最显著的区域：1级: 大小一致，<1.5(正常乳腺上皮)，核仁不明显、2级: 轻-中度多形，1.5-2倍(正常乳腺上皮)，小核仁、3级: >2倍(正常乳腺上皮)，泡状核，核仁明显；核分裂象计数：计数肿瘤中增殖最活跃的区域。

乳腺浸润性癌的危险评估体系中，低级别是低度危险指标，中级别和高级别是中度危险指标。

2.乳腺癌相关分子标志有哪几类？与乳腺癌生物学行为的关系

目前乳腺癌分子标志大致以下几类：

原癌基因和抑癌基因：Her-1，Her-2,c-myc,ras,p53,muc1

【Her-2：编码具有酪氨酸激酶活性的跨膜生长因子受体P185蛋白（即Her-2），参与调控细胞生长、增殖和分化；Her-2状态是除淋巴结转移外对乳腺癌预后最有价值的标记；原发性乳腺癌中20-25%过表达，预后较差，有中-高度的复发和转移风险。】

增殖与凋亡相关标志：Ki67,p27,bcl2,CyclinD1

与侵袭性和转移性相关的因子：VEGF,CD44,nm23

激素受体：ER,PR

【激素受体：乳腺是性激素的靶器官，正常情况下存在ER和PR两类受体。

•当癌变时ER、PR会全部或部分消失

•如乳腺癌表达ER、PR，表明肿瘤受内分泌调节，可采用内分泌治疗

•疗效和预后：性激素受体阳性的肿瘤普遍好于性激素受体阴性的肿瘤。

•ER：ERα——用于临床诊断，对预后提示弱，对疗效评价有显著意义。

ERβ

•ERα、PR均阳性疗效高于ERα单独阳性】