YPD培养基配制与灭菌
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YPD培养基配制与灭菌
YPD培养基配制
1.溶解10gYeast Extract(酵母膏), 20gPeptone(蛋白胨)于900ml水中,如制平板需加入20g琼脂粉
2.高压121℃下灭菌20min
3.加入100ml 20gDextrose (glucose)(葡萄糖),(葡糖糖溶液灭菌后加入)。
灭菌注意事项
葡萄糖,yeast extract ,peptone溶液混合后在高温下可能会发生化学反应,导致培养基成分变化,所以要分别灭菌后再混合。葡萄糖可以过滤除菌,也可以115℃15min灭菌。
1.葡萄糖是微生物培养过程中常用的有效碳源,但含葡萄糖的培养基经高温灭菌后,容易产生有害色素,其色素成分比较复杂俗称焦糖色,主要是还原糖与氨类物质高温条件的美拉德反应所致。
2.一般培养基中的葡萄糖都要求单独灭菌,温度控制在115℃,15min ,但即使如此,如果葡萄糖未达到分析纯标准,灭菌后依然呈金黄色,不能完全防止色素产生。
3.实际操作发现微量焦糖对许多细菌和酵母菌有明显的抑菌作用 ,建议在
配制细菌或酵母菌的含糖培养基时不宜采用高温灭菌手段 ,应采用过滤除菌方法。