梅毒的实验室诊断PPT课件
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性。 随着病期的延长，传染性越来越小。 到感染后4年，通过性接触一般无传染性。
2011.8.31
.
5
传播途径
垂直传播：胎传 在妊娠任何阶段，梅毒螺旋体均可通过胎盘传
染。 病期越长，传染性越小。 早期梅毒的母亲，发生流产、死产、胎儿先天
梅毒或新生儿死亡率高于晚期梅毒的母亲。
2011.8.31
2011.8.31
.
8
梅毒实验室诊断方法
病原体检查
梅毒
血清学检查
暗视野检查法 镀银染色法 直接免疫荧光法
初筛试验：VDRL、USR RPR、TRUST
确证试验: FTA-ABS、TPHA、
TPPA、TP-ELISA、 TP-RT 19S-IgM
2011.8.31
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9
梅毒实验室诊断方法
病原体（梅毒螺旋体）检查：
2011.8.31
.
12
病原体检查法
3、羊膜穿刺：梅毒孕妇的羊膜穿刺由专职人 员操作，将取得的羊水直接滴于载玻片上加盖 玻片暗视野镜检。
2011.8.31
.
13
病原体检查法
[结果] 暗视野镜检可观察到特征性的梅毒螺旋体。
◆螺旋整齐，数目固定（8~14）。 ◆白色透明折光性强。 ◆特征性运动方式：旋转运动、伸缩移行、弯曲
2011.8.31
.
21
病原体检查法
三.镀银染色法
标本涂片（TP）
自然干燥
固定、媒染
洗涤
银氨液染色
封片镜检
可见棕褐色梅毒螺旋体
2011.8.31
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22
病原体检查法
观察有无染成棕褐色的梅毒螺旋体。 染色阳性，又有典型皮损可确诊。 染色阴性，不能完全排除梅毒。 某些腐生螺旋体可导致假阳性结果。
2011.8.31
.
23
病原体检查法
常见病原体检查方法比较
方法
评价
暗视野检查 特异性高，可作梅毒确证试验，
需较高技术及暗视野显微镜。
DFA 可区分梅毒螺旋体和非梅毒螺旋 体，对试剂要求较高，需荧光显微 镜。
镀银染色法 染色技术要求较高，银氨液配制非 常关键，标本可长期保存。
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24
2011.8.31
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11
病原体检查法
检查方法
1、皮损取材：在载玻片加一滴生理盐水，用棉拭 子蘸取无菌生理盐水抹去皮损（硬下疳、溃疡、 梅毒疹、扁平疣）表面污物，挤压皮损周围，用 钝刀刮取组织液混入载玻片盐水中，加盖玻片后 暗视野镜检。
2、肿大淋巴结取材：酒精消毒淋巴结表面，用 1ml无菌注射器配12号针头，吸取无菌生理盐水 0.25-0.5ml,无菌操作穿刺淋巴结并注入盐水，再 吸入注射器内，如此反复2-3次，取少量淋巴液于 载玻片上，加盖玻片后暗视野镜检。
一、暗视野检查 二、直接荧光抗体检查 三、涂片染色检查法：镀银染色、吉姆萨染色、墨汁
负染色。
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10
病原体检查法
一、暗视野检查法 原理 ѿ一期梅毒硬下疳、肿大淋巴结的淋巴液。 ѿ二期梅毒皮肤粘膜损害、扁平疣、梅毒疹。 ѿ梅毒孕妇羊水(7周)
以上标本均有梅毒螺旋体存在，此时用暗视野 显微镜检查能找到梅毒螺旋体。
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16
病原体检查法
[注意事项]
1、取材前，要清洁皮损表面的污物。
2、应多取组织液提高阳性率，但要尽量避免 出血。
3、取材后立即观察，以免影响活力
4、注意梅毒螺旋体的特征及运动方式，以鉴 别其它螺旋体。
5、口腔中存在其他螺旋体，不推荐用于口腔 皮损检查。
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病原体检查法
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2
病原体
梅毒螺旋体特点 1.小而细螺旋状，长6~14um,直径0.25~0.3um.
有8~14规则、紧密螺旋。 2.透明不容易着色. 3.微需氧（1~3％）,人工培养不生长。 4.繁殖方式为裂殖. 5. 对热敏感，骤冷超低温保存数年，复活后接种
动物其毒性、活力、形态不变。
2011.8.31
莱果绿色梅毒螺旋体
2011.8.31
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19
直接免疫荧光法镜检图像（×1000）
2011.8.31
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20
病原体检查法
方法学评价： DFA法特异性及敏感性均大于暗视野显微镜
检测。 可区分梅毒螺旋体与非致病性螺旋体，可适
用于口、肛周等部位的损害。 可因取材、荧光素、抗体质量及操作技术等
因素而致假阴性。
.
3
致病机理
梅毒螺旋体→破损皮肤及粘膜感染→ 2～4周 潜伏→感染局部螺旋体大量繁殖→硬下疳→ 经3～8周→ 症状自行消失→ TP附近淋巴结→ 血液播散→ 全身组织和器官→ 二期梅毒→ 三 期梅毒→ 心血管、神经等损害。
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4
传播途径
性传播：性接触 是主要的传染途径 未经治疗的患者在感染后的1年内最具有传染
前行。
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暗视野显微镜法直接镜检图像（×1000）
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病原体检查法
[临床意义] １、暗视野检查可作为梅毒诊断的确证试验， 若发现有梅毒螺旋体，即可确诊为梅毒感染。 ２、此法特别适用于血清学试验阴性的早期梅 毒诊断，尤其对早期有硬下疳，但梅毒血清反 应尚未呈阳性者意义更大。 3、暗视野检查是目前快速诊断先天性梅毒可 靠的检查方法。
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6
传播途径
间接传播： 污染物、输血。
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各期梅毒标本采集及检查方法
临床症状 取材部位
检查方法
一期梅毒 硬下疳、淋巴结 暗视野检查
血液
血清学检查
二期梅毒 皮损、淋巴结 暗视野检查
血液
血清学检查
源自文库
隐性梅毒
血液
血清学检查
三期梅毒
血液
血清学检查
神经梅毒 血液、脑脊液 血清学检查
梅毒的实验室诊断
珠海市慢性病治站 刘小凤
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1
梅毒的实验室诊断
梅毒（Syphilis）是由苍白螺旋体 （Treponema Pallidum TP）感染引起的一种慢
性性传播疾病，本病表现复杂、病期长，几乎 可侵犯全身各个器官，发展过程时隐时现，症 状和体征呈多样化，自然感染过程（不治疗） 可产生不同临床症状的一期、二期、三期梅毒。
梅毒血清学试验
根据抗体的特性和反应性质梅毒血清学试验分 为： ◆非梅毒螺旋体血清试验(初筛试验) ◆梅毒螺旋体血清试验(确证试验)
6、阴性结果不能排除梅毒，应稍后复查或做 血清学检查。 原因可能是： ⑴ 螺旋体数量不足 ⑵已用过抗生素或某些外用药 ⑶损害接近自然消退
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病原体检查法
二.直接免疫荧光试验（DFA）
TP-Ag （标本） ＋TPMcAb-FITC
37 ℃x30分
TPAg-Ab-FITC
洗涤封片荧光镜检
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传播途径
垂直传播：胎传 在妊娠任何阶段，梅毒螺旋体均可通过胎盘传
染。 病期越长，传染性越小。 早期梅毒的母亲，发生流产、死产、胎儿先天
梅毒或新生儿死亡率高于晚期梅毒的母亲。
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梅毒实验室诊断方法
病原体检查
梅毒
血清学检查
暗视野检查法 镀银染色法 直接免疫荧光法
初筛试验：VDRL、USR RPR、TRUST
确证试验: FTA-ABS、TPHA、
TPPA、TP-ELISA、 TP-RT 19S-IgM
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梅毒实验室诊断方法
病原体（梅毒螺旋体）检查：
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病原体检查法
3、羊膜穿刺：梅毒孕妇的羊膜穿刺由专职人 员操作，将取得的羊水直接滴于载玻片上加盖 玻片暗视野镜检。
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13
病原体检查法
[结果] 暗视野镜检可观察到特征性的梅毒螺旋体。
◆螺旋整齐，数目固定（8~14）。 ◆白色透明折光性强。 ◆特征性运动方式：旋转运动、伸缩移行、弯曲
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病原体检查法
三.镀银染色法
标本涂片（TP）
自然干燥
固定、媒染
洗涤
银氨液染色
封片镜检
可见棕褐色梅毒螺旋体
2011.8.31
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病原体检查法
观察有无染成棕褐色的梅毒螺旋体。 染色阳性，又有典型皮损可确诊。 染色阴性，不能完全排除梅毒。 某些腐生螺旋体可导致假阳性结果。
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病原体检查法
常见病原体检查方法比较
方法
评价
暗视野检查 特异性高，可作梅毒确证试验，
需较高技术及暗视野显微镜。
DFA 可区分梅毒螺旋体和非梅毒螺旋 体，对试剂要求较高，需荧光显微 镜。
镀银染色法 染色技术要求较高，银氨液配制非 常关键，标本可长期保存。
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病原体检查法
检查方法
1、皮损取材：在载玻片加一滴生理盐水，用棉拭 子蘸取无菌生理盐水抹去皮损（硬下疳、溃疡、 梅毒疹、扁平疣）表面污物，挤压皮损周围，用 钝刀刮取组织液混入载玻片盐水中，加盖玻片后 暗视野镜检。
2、肿大淋巴结取材：酒精消毒淋巴结表面，用 1ml无菌注射器配12号针头，吸取无菌生理盐水 0.25-0.5ml,无菌操作穿刺淋巴结并注入盐水，再 吸入注射器内，如此反复2-3次，取少量淋巴液于 载玻片上，加盖玻片后暗视野镜检。
一、暗视野检查 二、直接荧光抗体检查 三、涂片染色检查法：镀银染色、吉姆萨染色、墨汁
负染色。
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病原体检查法
一、暗视野检查法 原理 ѿ一期梅毒硬下疳、肿大淋巴结的淋巴液。 ѿ二期梅毒皮肤粘膜损害、扁平疣、梅毒疹。 ѿ梅毒孕妇羊水(7周)
以上标本均有梅毒螺旋体存在，此时用暗视野 显微镜检查能找到梅毒螺旋体。
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病原体检查法
[注意事项]
1、取材前，要清洁皮损表面的污物。
2、应多取组织液提高阳性率，但要尽量避免 出血。
3、取材后立即观察，以免影响活力
4、注意梅毒螺旋体的特征及运动方式，以鉴 别其它螺旋体。
5、口腔中存在其他螺旋体，不推荐用于口腔 皮损检查。
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病原体检查法
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病原体
梅毒螺旋体特点 1.小而细螺旋状，长6~14um,直径0.25~0.3um.
有8~14规则、紧密螺旋。 2.透明不容易着色. 3.微需氧（1~3％）,人工培养不生长。 4.繁殖方式为裂殖. 5. 对热敏感，骤冷超低温保存数年，复活后接种
动物其毒性、活力、形态不变。
2011.8.31
莱果绿色梅毒螺旋体
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直接免疫荧光法镜检图像（×1000）
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病原体检查法
方法学评价： DFA法特异性及敏感性均大于暗视野显微镜
检测。 可区分梅毒螺旋体与非致病性螺旋体，可适
用于口、肛周等部位的损害。 可因取材、荧光素、抗体质量及操作技术等
因素而致假阴性。
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致病机理
梅毒螺旋体→破损皮肤及粘膜感染→ 2～4周 潜伏→感染局部螺旋体大量繁殖→硬下疳→ 经3～8周→ 症状自行消失→ TP附近淋巴结→ 血液播散→ 全身组织和器官→ 二期梅毒→ 三 期梅毒→ 心血管、神经等损害。
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传播途径
性传播：性接触 是主要的传染途径 未经治疗的患者在感染后的1年内最具有传染
前行。
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14
暗视野显微镜法直接镜检图像（×1000）
2011.8.31
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15
病原体检查法
[临床意义] １、暗视野检查可作为梅毒诊断的确证试验， 若发现有梅毒螺旋体，即可确诊为梅毒感染。 ２、此法特别适用于血清学试验阴性的早期梅 毒诊断，尤其对早期有硬下疳，但梅毒血清反 应尚未呈阳性者意义更大。 3、暗视野检查是目前快速诊断先天性梅毒可 靠的检查方法。
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传播途径
间接传播： 污染物、输血。
2011.8.31
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各期梅毒标本采集及检查方法
临床症状 取材部位
检查方法
一期梅毒 硬下疳、淋巴结 暗视野检查
血液
血清学检查
二期梅毒 皮损、淋巴结 暗视野检查
血液
血清学检查
源自文库
隐性梅毒
血液
血清学检查
三期梅毒
血液
血清学检查
神经梅毒 血液、脑脊液 血清学检查
梅毒的实验室诊断
珠海市慢性病治站 刘小凤
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梅毒的实验室诊断
梅毒（Syphilis）是由苍白螺旋体 （Treponema Pallidum TP）感染引起的一种慢
性性传播疾病，本病表现复杂、病期长，几乎 可侵犯全身各个器官，发展过程时隐时现，症 状和体征呈多样化，自然感染过程（不治疗） 可产生不同临床症状的一期、二期、三期梅毒。
梅毒血清学试验
根据抗体的特性和反应性质梅毒血清学试验分 为： ◆非梅毒螺旋体血清试验(初筛试验) ◆梅毒螺旋体血清试验(确证试验)
6、阴性结果不能排除梅毒，应稍后复查或做 血清学检查。 原因可能是： ⑴ 螺旋体数量不足 ⑵已用过抗生素或某些外用药 ⑶损害接近自然消退
2011.8.31
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18
病原体检查法
二.直接免疫荧光试验（DFA）
TP-Ag （标本） ＋TPMcAb-FITC
37 ℃x30分
TPAg-Ab-FITC
洗涤封片荧光镜检