凝集反应试验 ppt课件

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实验原理
根据IgM类特异性血型抗体与红细胞上 特异性抗原结合能够出现凝集反应的原 理，用已知IgM类特异性标准抗血清与 被检红细胞在盐水介质中反应（室温）， 若出现凝集想象，表明被检红细胞膜上 有与血型抗体相对应的抗原，从而判断 和鉴定被检者的血型。
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实验材料与方法
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实验结果
二、ABO血型鉴定结果： 1、A型血抗A试剂凝集为＋。 2、B型血抗B试剂凝集为＋。 3、O型血抗A、B试剂不凝集为－。 4、AB型血抗A、B试剂都凝集为＋。
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三、RF测定结果
1、有凝集出现RF为阳性。 2、无凝集出现RF为阴性。
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注意事项
1、加强无菌操作、安全防范意识。
3、加抗血清：滴加抗A，抗B血清于玻片标记处、 4、加RBC：在抗A，抗B血清中滴加RBC各一滴。 5、混匀：前后左右摇动，观察有无血细胞凝集出现。 6、结果：记录受检者红细胞凝集情况及血型鉴定结
果。
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ABO血型结果判断
抗B
抗A
血型
-
+
+
-
+
+
-
-
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一、第一次加强免疫 二、ABO血型鉴定
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目的与要求
掌握凝集反应的原理与类型 掌握玻片凝集法操作与结果判断 熟悉ABO血型鉴定的原理与操作
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玻片凝集法-ABO血型鉴定
试验目的
通过标准血清抗体鉴定红细胞上ABO 血型系统抗原，掌握盐水介质法进行 ABO血型系统正定型的基本操作方法和 结果判断。
第二章 抗原抗体反应
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凝集反应
（agglutination）
是指颗粒性抗原，例如细菌、红细胞、 螺旋体、细胞性抗原，或可溶性抗原 （或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒 后，与相应的抗体（或抗原）在适量的 电解质存在的条件下，经一定时间后凝 聚成肉眼可见的凝集现象。
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凝集反应的特点
试剂：抗A血清，抗B血清 材料：玻片，采血针，消毒干棉球，酒
精棉球等
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实验方法与步骤
1、标记玻片：取玻片一张，一分为二，分别标记为 抗A，抗B。
2、采血：用酒精棉球消毒被检者左手无名指或中指 内侧，用采血针刺破皮肤，用干棉球擦去第一滴血， 稍加挤压，使其流出第二滴血，装入盐水试管，摇匀， 即成血细胞悬液。
间接凝集抑制试验，协同凝集试验）
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间接反应的常见类型
– 间接凝集试验 – 间接血凝试验 – 胶乳凝集试验 – 明胶凝集试验 – 间接凝集反应的应用
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1、（正向）间接凝集试验
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2 反向间接凝集试验
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3、间接凝集抑制试验
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本次实验内容
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常用载体：
RBC 聚苯乙烯胶乳（polystyrene latex） 明胶颗粒 活性炭 皂土（bentonite） 火棉胶
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间接凝集反应分类依据
根据致敏载体用的是抗原（正向）或抗 体（反向）
根据载体（RBC，胶乳，明胶） 根据凝集反应的方式（间接凝集试验，
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间接乳凝试验检测类风湿因子
间接凝集反应也称为被动凝集反应，是 将可溶性抗原或抗体吸附于载体颗粒表 面、再与相应的抗体或抗原结合，出现 凝集现象。间接乳凝试验检测类风湿因 子。
常用类风湿因子检测。
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【操作方法】
1、轻轻混匀胶乳试剂 2、核对阴、阳性对照 3、在反应板孔中加1滴未稀释血清20ul 4、然后加1滴胶乳试剂在血清中（阴阳性对 照同此法） 5、轻轻摇动其充分混匀2分钟内观察结果。
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玻片法：（定性）
– 细菌鉴定 – ABO血型的鉴定
试管法： （半定量）
– 肥达试验（Widal test）---伤寒 – 外斐试验（Weil-Felix test）---立克次体 – 交叉配血试验
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间接凝集反应 （indirect agglutination）
将可溶性抗原（或抗体）先吸附或偶联 与免疫无关大小适当的颗粒性载体的表 面，使之成为致敏载体颗粒，然后与相 应抗体（或抗原）作用，在适宜的电解 质存在的条件下，出现特异性凝集现象， 称间接凝集反应（indirect agglutination） 或被动凝集反应（passive agglutination）。 其敏感度高于直接凝集反应和沉淀反应。
正向间接凝集试验 反向间接凝集试验 间接凝集抑制试验 协同凝集试验 间接血凝试验 胶乳凝集试验 明胶凝集试验
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根据凝集反应中抗原的性质，反应的方 式分为：
①直接凝集反应
②间接凝集反应
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直接凝集反应（direct agglutination）
细菌、螺旋体和红细胞等颗粒抗原， 在适当电解质参与下可直接与相应抗体 结合出现凝集，称为直接凝集反应。参 加反应的颗粒性抗原称为凝集原 （agglutinogen），抗体称为凝集素 （agglutinin） 。
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思考题
凝集试验有哪些？可用于检测的原理是 什么？
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颗粒性抗原 致敏颗粒 （可溶性抗原或抗体与载体颗粒结合） 电解质的存在 肉眼可见的凝集现象
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凝集反应的发生分两阶段：
①抗原抗体的特异结合 ②出现可见的颗粒凝集
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凝集反应的Leabharlann Baidu型
直接凝集试验 间接凝集试验
玻片凝集试验：ABO血型
试管凝集试验：外斐试验，肥达试验
2、如一次采血要求采集几个标本时，应按一 下顺序采血：血培养管、无抗凝剂及添加剂管， 凝血现象，有抗凝剂（添加剂）管。
3、在做配型试验时，如发现有不配合现象， 则取受检者血清，用已知A或B血型红细胞进行 反定型试验，以核实原鉴定的血型是否正确。
4、RF试验阴阳性对照经检测HbAg、HCV、 HIV为阴性，但仍须如病人样品一样小心处理。