组培重点名词解释、填空

一、名词解释（20）

1、植物组织培养:是指用无菌方法，使植物体的离体器官（根、茎、叶、花、果实等）、组织（形成层、分生组织、花药组织、韧皮部、皮层等）和细胞（体细胞和生殖细胞）在人为提供的条件下生长和发育的培养技术的总称。

2、细胞全能型：离体的体细胞，具有母体植株的遗传物质，在适宜的条件下，能按其母株的表型完整地加以表达。在形态建成上具有再生成完整植株的潜势，在代谢上具有合成原植物体所含有的代谢产物的能力。

3、培养基：人工配制的、适合于植物生长发育的“人工土壤”。它含有植物生长所需的各种无机营养元素、有机营养元素、水分、植物生长调节物质以及培养基的支持体等。

4、母液（贮备液）：在组织培养工作中，配制培养基是日常工作，为简便起见，将配方中的药品一次称量供一段时间使用，即配一些浓溶液，用时稀释，这种浓溶液就是贮备液或母液

5、外植体：把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体

6、快速繁殖：在无菌条件下，利用植物体的一部分，包括细胞，组织或器官，在人为控制的营养和环境条件下快速繁殖植物的方法。

7、顶芽萌发：又称器官型再生，是指由培养的顶芽或腋芽直接萌发形成小茎后，再诱导小茎生根而形成完整植株的过程。

8、胚状体发生型：是指外植体在适宜的培养环境中，形成类似于合子胚结构的胚状体或体细胞胚。体细胞胚与合子胚一样具有胚根和胚芽两极性。成熟的胚状体可以像合子胚一样长出根、芽，萌发再生植株。

9、不定器官发生型：离体培养条件下不定器官的发生可以通过直接或间接途径由外植体表面分化出不定芽或不定根等器官，并进一步发育成完整植株。

10、原球茎形成型：原球茎形成型是兰属植物特有的再生植株途径。兰属植物外植体接种于培养基上，经过一段时间的培养便能形成原球茎，然后每一个原球茎可以进一步发育成完整植株，且原球茎可以进一步增殖。

11、玻璃化:是指无菌苗生长异常，茎叶呈透明或半透明的水浸状，植株矮小肿胀、失绿、叶片皱缩成纵向卷曲，脆弱易碎的现象。

12、褐变：指外植体在培养过程中，自身组织从表面向培养基释放褐色物质，以致培养基逐渐变成褐色，外植体也随之进一步变褐而死亡的现象。

二填空（20）

1根据培养对象的不同大致可分为六种类型器官培养、胚胎培养、细胞培养、原生质体培养、组织培养、植株培养

2从所用培养基的角度来分，植物组织培养可分为固体培养、液体培养（①静置培养

②旋转培养③振荡培养④纸桥培养）

3组织培养室培养条件包括(1)温度(2)湿度(3)光照

4培养基的分类固体培养基和液体培养基。

组成基本培养基和附加成分

培养基中的各种组分在培养中的作用（一）水配制培养基时，使用的水原则上以重蒸馏水或蒸馏水为好，可减少水中杂质对植物材料分化生长的影响。（二）无机营养成分是指植物在生长发育时所需要的各种化学元素。根据植物对无机营养的吸收量，可将它们分为大量元素和微量元素，前者是植物的生长发育的基本营养物质，所需的量较大，后者虽然需要量较少，但却具有重要的生理作用。（三）有机营养元素植物组织培养中，分化后的植物体处于异养或半异养状态。因此，在基本培养基中必须加入植物生长发育所需的各种有机物质，如碳水化合物（糖类）、维生素类、氨基酸类等。（四）植物生长调节物质植物组织培养中常用的是生长素类、细胞分裂素类和赤霉素（五）活性炭类活性炭具有较强的吸附功能，可吸收培养物分泌的抑制物质和琼脂中含有的杂质。从而抑制褐变、促进生根（相对黑暗的条件）、减轻玻璃化。

（六）抗氧化物质主要作用是抑制外植体的褐变（七）硝酸银培养基中加入适量的AgNO3，能促使某些原来再生困难的植物分化出再生植株，在某些情况下能促进愈伤组织器官发生和体细胞胚胎发生（六）培养基支持体

5有机营养元素包括碳水化合物（糖类）、维生素类、氨基酸类。

6植物组织培养中常用的植物生长调节物质有生长素类、细胞分裂素类和赤霉素

7外植体消毒原则（1）能全都杀灭外植体附带的微生物；（2）不能伤害材料的生活力；（3）能够易于去除。8无性繁殖的四个阶段阶段无菌培养体系建立阶段、继代增殖阶段、生根成苗阶段、移栽成活阶段。

9引起植物材料褐变有哪几方面原因植物材料、光照、温度、培养基、培养方式

10防止病毒病的方法有哪几种1、物理学方法 2、化学方法3、生物学方法

11茎尖苗病毒检测的方法有哪几种1、生物检测2、电镜观察 3、血清学检测 4、开花鉴定

三、简答题

1. 根据培养对象的不同大致可分为六种类型:

答（1）器官培养：包括茎尖、茎段、叶片、叶柄、根、花器官及未成熟的果实等。多用于无性系快速繁殖及脱毒培养。（2）胚胎培养：包括成熟及未成熟的胚的培养。多用于植物育种方面，培养新品种。（3）细胞培养：培养单细胞或液体悬浮、分散的小细胞团（4）原生质体培养：培养脱壁后仍具有生活力的原生质体。（5）组织培养：指以分离出植物各部分的组织（如分生组织、形成层、木质部、韧皮部、表皮、皮层、胚乳组织、薄壁组织、髓部等）或已诱导的愈伤组织为外植体的无菌培养----狭义的组织培养。（6）植株培养: 指以完整植株形态的材料为外植体的无菌培养（如幼苗和较大植株的培养）。

2培养基配置步骤

答：（1）、先在洁净的不锈钢锅里放入蒸馏水，加入所需要的琼脂和糖，最好能在水浴锅里将琼脂溶化，如果直接加热应不停地搅拌，防止在锅底烧焦或沸腾溢出。（2）、加入贮备液，按需要加入植物激素和其它准备加入的物质。（3）、加蒸馏水将最终体积调整到要求的体积。（4）、充分混合好以后，用1N HCl（或NaOH）调整pH值到所需值（借助精密pH试纸或酸度计）。（5）、趁热将培养基分注到瓶子或试管中，按容器的大小和培养要求放入适当量的培养基。分装时注意不要把培养基沾附到瓶口或管口接近的内壁上，以免今后引起因污染。（6）、包扎覆盖物。（7）、高压灭菌后取出，放至室温即可使用。

3、灭菌方法

答：常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类：（1）物理方法：干热(烘烤和灼烧)、湿热(常压或高压蒸煮)、射线处理(紫外线、超声波、微波)、过滤、清洗等措施；（2）化学方法：使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏儿、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精等化学药品处理。这些方法和药剂要根据工作中的不同材料和目的进行选用。

4消毒时应掌握三个原则：

答：（1）能全都杀灭外植体附带的微生物；（2）不能伤害材料的生活力；（3）能够易于去除。

5植物组织无菌操作的一般步骤：

答：外植体取材自来水冲洗（1h或更长）70％酒精表面消毒（20～60s）无菌水冲洗消毒剂处理无菌水充分洗净（3～4次）切割接种

6、快速繁殖的特点

答：（1）繁殖系数高、繁殖速度快（2）用材少（3）占用空间小（4）周年生产（5）便于种质保存和交换（6）有利于无病毒苗的培育（7）有利于其他的相关科学研究