山羊卵母细胞冷冻保存技术研究

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ｆｅｉｇｍｅｈｄ，ｎＧＶｏｙｅｓｔｅｍａｕａｉａｅｗａ．％，９．ｒｅｚｎｔｏｉｏｃｔ，ｈｔｒｔｏｎｒｔｓ２０５２９％ｒｓｅｔｅｌ，ｈｅｒｌａｉｎｒｔｅｐｃｉｙｔｅｆｔｉｔａｅｖｉｚｏ
ｗａ．％，．％ｒｓｅｔｅｙｉｏ￣ｅｆ，ｈｔｒｔｎｒｔｓ２．％，２０ｒｓｅｔｅｙＴｅｓ６３９１ｅｐｃｉｌ；ｎｏｃｓｏｈｔｅｍａｕａｉｅｗａ０５３．％，ｅｐｃｉｌ．ｈｖ９ｏａｖ
ｆ｝ｉａｉａｅｗａｓ５．％，１７％，ｅｐｃｉｅｙｎｌｅｒｌｔｔｉｏｎｒｔｚ１０＿ｒｓｅｔｌ；ＩＶＭｃｔｓ，ｈｅｉｚｔａｅｗａｓ２１４％，０．ｖｏｏｙｅｔｅｆｒｌａｉｒｔｔｉｏｎ．３３％，
中图分类号：￥２．５８７３文献标志码：Ａ文章编号：１０ — ３９２１）９００ — ６０５９６（０２０ — ０００
ＳｔｄｎｃｙｐｅｅｖｔｎｔｃｎｏｙｏｏｔｏｃｔｓｘａｎｇＨＡＧｕｙｏｒｏｒｓｒａｉｅｈｏｌｇｆｇａｏｙｅ／ｕＤｎｉ，ＵＮｏｎ
收稿日期：２１－２２０１１－０
基金项目：农业部公益性行业（奶山羊）科研专项（０１３３）２１００８作者简介：许丹宁（９８）１７一，女，副教授，博士，研究方向为动物营养及生殖生理。Ｅｍｉｘａｎｎ＠１６ｃｒ — ａｌｄｎｉｇ２．ｏ：ｎ通讯作者：田允波，教授，博士生导师，研究方向为动物生殖生理及繁殖生物技术。Ｅｍｉｔｎｏ２．ｏ — ａ：ｕｂ＠１６ｃｒ］ｙｎ
第４卷第９３期
２１年９０２月
东
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４（）１２１６３９：０－０
Ｓｐ２１ｅ．０２
ＪｕｎｌｆＮｏｔｅｓｒｕｔｒｌＵｎｖｒｉｏｒａｒｈａｔＡｇｉｌａｉｅｓｔｏｃｕｙ
山羊卵母细胞冷冻保存技术研究
许丹宁，黄运茂，田允波，樊敏欢，唐军
ｈｈｒｎＰＯＨｇｏｐ（５６ｔａｈｔｎＤＯ（８％）ｎｌｅｏ（４１ｇｏｐＰＯ０）ＢｉｅＲｒｕ２．％）ｈｎｔａｉＭＳ１．ｇｉ７ａｄｇｃｒｌ１．ｙ％）ｒｕｓ（＜．．ｙ５
ｍａｓｏｏｖｎｉａｆｅｉｒｃｄｒｓ（ｌｏｌｇｒｐｈｗｉ，ＬｎＳｖｒｃｔｎｅｎｆｃｎｅｔｎｌｒｚｇｐｏｅｕｅｓｗｃｏｎ，ａｉｔａｎＳ）ａｄＯＰｉｉａｉｏｅｎｏｉｄｇｔｉｆｏ
ｍｅｈｄｎｔｅｄｖｌｐｎａｃｐｃｔｆｈｗｅｏｔｏ￣ｅ．ｅｄｖｌｐｎｉａｉｎｆＧｏｔｔｏｓｏｈｅｅｏｍｅｔｌａａｉｏａｄｇａｃｓＴｈｅｅｏｍｅｔｓｕｔｓｏａｙｔｏｔｏ
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Ａｂｔａｔｈｉｏｈｓｓｕｙｗａｏｉｖｓｉａｅｅｅｔｏｉｅｅｔｃｙｐｏｅｔｎｓａｄｆｚｎｓｒｃ：Ｔｅａｍｆｔｉｔｄｓｔｎｅｔｔｆｃｆｄｆｒｎｒｏｒｔｃａｔｎｒｅｇｏ
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Ｋｙｗｏｒｓｇａ；ｏｙｅｃｙｐｏｅｔｎ；Ｐｖｔｉｃｔｎｅｄ：ｏｔｏｃｔ；ｒｏｒｔｃａｔＯＳ；ｉｆａｉｒｉｏ
山羊卵母细胞的冷冻保存对提高良种山羊繁育率、保护优良遗传资源、建立良种山羊基因库等均
ＧＶａｄ９ｈｏｃｔｓｈｄｎｉｉａｔｉｅｅｃＬａｄＯＰｒｕｓ（＞．５，ｉｅｆｒｌａｉｎｏｙｅａｏｓｎｃｎｆｒｎｅｉＳｎＳｇｏｐＰ００）ｗｈｅｔｔｉｔｎｇｆｉｄｎｌｈｅｉｏｚｒｅｏｎｏｙｅａｉｅｈｎｔａｆＩＭｏｃｔｓ（＜．５ＴｅｐｅｅｔｓｕｙａｆＧＶａｄ９ｈｏｃｔｓｗｓｈｈｒｔａｈｔｏＶｏｙｔｇｅＰＯ０）．ｈｒｓｎｔｄ
率分别为４８．％和１．％；不论是常规程序冷冻还是ＯＳ璃化冷冻，Ｇ０５Ｐ玻Ｖ期和培养９ｈ卵母细胞的成熟率和受精率
差异不显著（＞．）尸Ｏ０，但受精率均低于ＩＭ卵母细胞（＜．）５ＶＰＯ０。结果显示，ＰＯ５ＲＨ作为山羊卵母细胞的冷冻保护剂，其保护作用明显优于ＤＯ及甘油；ＯＳＭＳＰ玻璃化冷冻效果要明显优于常规程序法。关键词：山羊；卵母细胞；冷冻保护剂；ＯＳＰ；玻璃化
００）以ＰＯ．５。ＲＨ作为冷冻保护荆，其ＧＶ期卵母细胞成熟率（７％）２．均显著高于ＤＯ１．和甘油（０１（＜２ＭＳ（８９％）１．％）Ｐ０５；ＩＭ卵母细胞受精率（５６也显著高于ＤＯ（８７和甘油（４１（＜．）．）Ｖ０２．％）ＭＳ１．％）１．％）Ｐ００。常规程序冷冻和ＯＳ５Ｐ璃化冷冻法，ＧＶ期卵母细胞的成熟率分别为２．％和２．１３９％，受精率分别为６％和９１９．３．％；培养９ｈ卵母细胞的成熟率分别为２．％和３．％，受精率分别为５１０５２０．％和１．％；ＩＭ卵母细胞的受精率分别为２．０７Ｖ１％和３．４０３％，２细胞一
ｄｍｏｔａｅｈｔｈｏｅｃｉｅｅｅｔｏｅｎｓｒｔｄｔａｅｐｒｔｔｆｃｆＰＲＯＨ，ｓａｃｙｒｔｃａｔｆｒｇｔｏｃｔｓｗａｉｉｃｔｔｖａｒｏｐｏｅｔｎｏｏａｏｙｅ，ｓｓｇｎｆａｎｌｉｙｂｔｈｎＤＭＳＯｄｇｌｃｒ．ＯＰＳｉｉｃｔｒｅｉｇｐｒｅｕｒａｅｅｒｅｅｔｔｎｃｎｅｎｉａｅｔｔａｅｒａｎｙｅｏ１ｖｔｆａｉｆｅｚｎｏｃｄｅｈｄｂｔｆｃｈａｏｖｔｒｉｏｎｏｎｌｆｅｅｉｇｐｏｄｒｒｚｎｒｃｅｕｅ．
ＤＭＳ（ＯＧＶ：８．％：Ｉ２２ＶＭ：８．％）ｏｈｏｍａｒｈｌｇｒｔｃｉｅａｉｙｏｉｅｅｔｐａｅｆ５２ｎｔｅｎｒｌｍｏｐｏｏｙｐｏｅｔｂｌｆｄｆｒｎｈｓｓｏｖｉｔ
ｏｃｅ，ｈｅｂｔｏｅｅｅｓｎｃｎｌｈｈｒＰ００）ｈｎｇｃｒｌＧ：０４：Ｖ７．％）ｏ￣ｓｗｉｏｈｆｈｍｗｒｉｉａｔｉｅ（＜．５ｔａｌｅｏ（Ｖ７．ｌｔｇｆｉｙｇｙ％ＩＭ：５５．ＴｅｍｔｒｔｎｒｔｏＶｏｃｅａｉｎｃｎｌｈｈｒｎＰＯＨｇｏｐ（７％）ｈｎｔａＭＯｈａｕａｉａｅｆｏ￣ｓｗｓｓｉａｔｉｅＲｒｕ２．ｏＧｇｆｉｙｇｉ２ｔａｔｎＤＳｈｉ（８％）ａｄｇｙｅｏ（０１）ｒｕｓ（＜．）ＴｅｆｒｉｔｎｒｔｏＭｏｃｔｓｗｓｓｎｃｎｌ１．９ｎｌｒｌ１．ｃ％ｇｏｐＰＯｏ．ｈｔｚｉａｅｆＶｏｙａｉｉａｔ５ｅｉａｏｌＩｅｇｆｉｙ
ｆｅｉｒｃｄｒｎＰｉｉａｉｅｚｇｐｏｅｕｅｗｒｄｔｒｎｄｒｓｅｔｅ．ｈｓｌｒｚｇｐｏｅｕｅａｄＯＳｖｒｃｔｎｆｅｉｒｃｄｒ）ｅｅｅｅｍｉ，ｅｐｃｖｌＴｅｒｕｓｅｎｔｆｏｒｎｉｅｉｙｅｔｓｏｅａｅｅｗｓｎｉｉａｔｉｒｎｅ（＞。５ｂｔｅｎＰＯＨ（Ｖ：５３Ｖ８．％）ｎｈｗｄｔｔｈｒａｏｓｎｃｎｄｅｅｃＰ０）ｅｗｅＲｈｔｇｆｆｉ０Ｇ８．％ＩＭ：５４ａｄ
（仲恺农业工程学院生命科学学院，广州５０２１２５）
摘
要：检测不同冷冻保护剂（ＲＨ、ＤＯＰＯＭＳ、甘油）及不同冷冻方法（序冷冻法、ＯＳＺ程Ｐ￣璃化冷冻法）对
山羊卵母细胞发育情况。结果表明，ＰＯＧＲＨ（Ｖ：８．５３％；ＩＭ：８．和ＤＯＧＶ５４％）ＭＳ（Ｖ：８．％；ＩＭ：８．％）２２Ｖ５２对各期卵母细胞的正常形态保护能力无显著性差异（＞．５，但均显著高于甘油（ｖ：７．Ｐ０）０Ｇ０％；ＩＭ：７．％）Ｐ４Ｖ５５（＜
第９期
许丹宁等：山羊卵母细胞冷冻保存技术研究
ｒｐｃｉｅｌＴｈ－ｅｌａｅｗａ８％，１．，ｒｓｅｔｅｙｅｓｅｔｙ．ｅ２ｃｌｒｔｓ４．ｖ５％ｅｐｃｉｌ．ＴｈｔｒｔａｅａｎｅｒｌａｉａｅｉＯｖｅｍａｕａｉｒｔｄｆｔｉｔｏｎｉｚｏｎｒｔｎ