葡萄糖的旋光性及变旋现象
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三、仪器和试剂
仪器:WZZ- 自动旋光仪、 仪器:WZZ-3自动旋光仪、 容量瓶(20ml) 容量瓶(20ml) 试剂: 试剂:葡萄糖
WZZ-3自动旋光仪 自动旋光仪
四、仪器使用
1、先打开电源开关(power),至少等 、 打开电源开关( ),至少等 ), 待5分钟后,后将光源开关向(light)上拨 分钟后, 将光源开关向( ) 分钟后 至直流位置,此时可使钠灯启动。 至直流位置 此时可使钠灯启动。关闭时则 此时可使钠灯启动 是先关闭( 是先关闭(light)再关闭(power )。 )再关闭(
手性化合物旋光度与溶液浓度、溶剂、 手性化合物旋光度与溶液浓度、溶剂、测 定温度、光源波长、测定管长度有关。 定温度、光源波长、测定管长度有关。因此 旋光仪测定的旋光度α并非特征物理常数 并非特征物理常数, 旋光仪测定的旋光度 并非特征物理常数, 同一化合物测得的旋光度就有不同的值。 同一化合物测得的旋光度就有不同的值。因 此为了比较不同物质的旋光性能,通常用比 此为了比较不同物质的旋光性能,通常用比 旋光度来表示物质的旋光性 来表示物质的旋光性, 旋光度来表示物质的旋光性,比旋光度是物 t α D 表示。 表示。 质特有的物理常数 。用
实验 十二 葡萄糖的旋光性及变ห้องสมุดไป่ตู้现象
一、实验目的
了解糖的旋光性及变旋现象; 1、了解糖的旋光性及变旋现象; 学习旋光度的测定方法。 2、学习旋光度的测定方法。
二、实验原理
1.定义: 定义: 定义
手性化合物使平面偏振光偏振面旋转的性质称为 旋光性。具有旋光性的物质称为旋光物质,或称为 旋光性。具有旋光性的物质称为旋光物质, 光学活性物质。 光学活性物质。 若手性化合物能使偏振面右旋(顺时针 称为右旋体 若手性化合物能使偏振面右旋 顺时针)称为右旋体, 顺时针 称为右旋体, 表示; 逆时针)相 用(+)表示;而其对映体必使偏振面左旋 逆时针 相 表示 而其对映体必使偏振面左旋(逆时针 等角度,称为左旋体, 表示。 等角度,称为左旋体,用(-)表示。 表示 偏振面被旋转的角度称为旋光度, 表示。 偏振面被旋转的角度称为旋光度,用α表示。 旋光度 表示
(二)旋光度的测定: 旋光度的测定: 1、准确称取2.0g葡萄糖样品,放在20ml容量 瓶中配成溶液,倒入样品管,放入已调零的旋 光仪内,待读数稳定读出读数。 2、每隔20min测定1次葡萄糖溶液的旋光值, 至少测定4次,根据公式计算葡萄糖溶液的比 旋光值。
六、注意事项
1、试样溶液必须澄清,不应浑浊或含有混悬 的小颗粒,否则,应预先过滤。试样溶液 不能含有其它的光学活性杂质,如有机酸、 蛋白质、核酸、生物碱。 2、每次测定之前应以溶剂做空白实验,校正 零位。
2.测定方法: 测定方法: 测定方法
手性化合物的旋光度可用旋光仪来测定。 手性化合物的旋光度可用旋光仪来测定。实 验室常用目测或自动旋光仪。 验室常用目测或自动旋光仪。
自动旋光仪基本构造
仪器采用20瓦钠光灯作光源,由小孔光栏和物镜 组成一个简单的点光源平行光管,平行光经偏振镜 (一)变为平面偏振光,当偏振光经过有法拉弟效 应的磁旋线圈时,其振动平面产生50赫兹的β角往 复摆动,该偏振光通过检偏镜投射到光电倍增管上, 产生交变的光电讯号,当检偏镜的透光面与偏振光 的振动面正交时,即为仪器的光学零点,此时出现 平衡指示。而当偏振光通过一定旋光度的测试样品 时,偏振光的振动面转过一个角度α ,此时光电讯 号就能驱动工作频率为50HZ的伺服电机,并通过涡 轮杆带动检偏镜转动α角而使仪器回到光学零点, 此时读数盘上的示值即为所测物质的旋光度。
2、按enter键,显示出厂默认值: 、 键 显示出厂默认值: mode1; L:2.0; C: 0; n:1。 。 Mode1: 表示测旋光度 L:2.0:表示试管的长度 : C: : n: 表示样品的浓度 表示自动复测的次数
3、如不需修改,按 enter 键,显示“0.000” 、如不需修改, 显示“ 作一般旋光仪使用。 作一般旋光仪使用。 4、如需修改,注意光标的位置,可做修改, 、如需修改,注意光标的位置,可做修改, 光标的位置 输入数字后, enter键 输入数字后,按enter键。 5、在测量的过程中,要改变模式,可按→键。 、在测量的过程中,要改变模式,可按→ 校零” 6、每次在放入样品前,按“校零”键。 每次在放入样品前,
五、实验步骤
(一)旋光仪零点的校正: 旋光仪零点的校正: 1、将放样管洗好,左手拿住管子把它竖立, 装上蒸馏水,使液面凸出管口。 2、将玻璃盖沿管口边缘轻轻平推盖好,不能 带入气泡,旋上螺丝帽盖,不要过紧。 3、将蒸馏水管擦干,放入旋光仪内盖上盖子, 开启钠光灯,按清零键,读数盘显示0.000 即可。