交叉配血试验标准操作规程(微柱凝胶)

交叉配血试验标准操作规程

（微柱凝胶抗人球蛋白法）

1.目的

为规范微柱凝胶抗人球蛋白法在交叉配血试验中的应用，保证检测结果准确及临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》的要求制定本规程。

2.适用范围

适用于医疗机构输血科作交叉配血试验。

3.职责

医疗机构输血科技术人员负责对交叉配血的试验。

4.原理

红细胞血型抗原与不完全抗体（IgG），在抗人球蛋白的桥梁作用下，经一定的离心力，产生特异性免疫凝集复合物或红细胞血型抗原与完全抗体（IgM）直接产生的特异性免疫凝集复合物，被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或凝胶颗粒间隙之中，判为阳性结果，表示待检血标本中含有相应红细胞血型抗原抗体；红细胞全部沉积于凝胶孔腔底部，即判断为阴性反应，表示待检血标本中无相应的红细胞血型抗原抗体。

5.所需设备和试剂

普通离心机、微注凝胶卡专用离心机、微柱凝胶卡专用孵育器、微量移液器、抗人球蛋白微柱凝胶卡

6.检测环境条件

室湿应控制在18~27℃，湿度应保持30%~70%。

7.操作步骤

7.1先将供（受）血标本制备0.5%红细胞低离子介质（LIM）悬液。

7.2撕开卡的封膜，于反应胶中主（次）侧管加供（受）者0.5% 红细胞LIM悬液100μl，加入受（供）血者血浆或血清25μl（或50μl）。

7.3将检测卡37℃孵育15min取出，置离心机1800r/min离心1min,2500r/min离心1min。

结果，表示受（供）血者血浆或血清中含供（受）血者红细胞血

型抗原相应的抗体（不完全抗体IgG或完全抗体IgM），供

受血者血液不相容。

阴性结果，表示供受血者血液相容。

8.质量控制

8.1微柱凝胶试剂卡在有效期内使用，每批试剂卡在使用前用已知阴、阳性对照确认其有效性。

8.1试剂质量控制方法

8.1.1即作阴、阳性对照试验：撕开检测卡的封膜，于2个反应腔中分别加入已致敏IgG抗D的1%O型RhD(+)红细胞LIM悬液50μl、健康者1%O型RhD(+)红细胞LIM悬液50μl。

8.1.2将检测卡于离心机1800r/min离心1min,2500r/min离心1min。

8.1.3取出，结果判定同7.3

9.注意事项

9.1检测卡若在冰箱储存，使用前须放置实验室平衡至室温。

9.2检测卡试验前，应3000r/min离心1min，正立放置待用。

9.3如因运输过程产生的气泡，可将检测卡放置在漩涡震荡器上震荡，使气泡漂移至胶面为止，3000r/min离心2min。

9.4细菌污染、纤维蛋白析出、抗凝不佳的血，可产生假阳性。

9.5离心速度过快，时间过长，试剂失效等因素均可导致假阴性。

10.相关文件

中山市生科试剂仪器有限公司《抗人球蛋白检测卡说明书》