两种紫苏烟和普通烟草芦丁含量的测定和比较_陈安飞
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参考文献
［１］ 卫生部药典委员会．中国药典．北京：化学工 业 出 版 社， 人 民 卫 生 出 版 社 ，１９８５：３０１．
［２］ 顾文娟，朱 陈 珏，张 建 梅．黑 龙 江 畜 牧 兽 医 ２００６，（８）： ２６－２８．
［３］ 魏 治 中 ．药 烟 栽 培 技 术 ．北 京 ：金 盾 出 版 社 ，２００２：９． ［４］ 王 丽 ．教 育 科 学 ，２０１０，（１０）：１９４－１９５．
２．４ 精 密 度 试 验 分别精密吸取０．０８ｍｇ·ｍＬ－１芦丁对照品溶 液
各１０μＬ，重 复 进 样 ６ 次，结 果 芦 丁 峰 面 积 的 平 均 值 为３９３６９．４，ＲＳＤ 为１．５９ ％，精密度较好。 ２．５ 稳 定 性 试 验
精密吸取 紫 苏 烟 Ｑ 提 取 液，分 别 于 ０，４，８，１２， １６，２４ｈ时进样１０μＬ，结 果 芦 丁 峰 面 积 的 平 均 值 为 ５１７４６．５，ＲＳＤ 为 １．８４％，表 明 Ｑ 烟 及 其 他 供 试 品 溶 液 在 ２４ｈ 内 稳 定 性 良 好 。 ２．６ 重 复 性 试 验
准 确 称 取 各 材 料 粉 末 １．０ｇ，分 别 用 滤 纸 包 裹 ，置 于 索 氏 提 取 器 中 ，加 入 １００ ｍＬ 二 氯 甲 烷［６］，５０℃ 回 流 至无色，取出材料，挥发溶剂至恒重，而后将滤纸包置 于索氏 提 取 器 中，加 入 １００ｍＬ ５０％ 乙 醇，设 定 温 度 ９０℃，提取至 提 取 液 无 色，时 间 约 ６ｈ。 将 提 取 液 离 心 ，置 于 １００ ｍＬ 容 量 瓶 中 ，稀 释 至 刻 度 。
关键词 紫苏烟 Ｑ 紫苏烟 Ｑ－００００１ 普通烟草 芦丁 ＨＰＬＣ
紫 苏 ［ｐｅｒｉｌｌａ ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ（Ｌ．）Ｂｒｉｔｔ．］是 唇 形 科 紫 苏 属 一 年 生 草 本 植 物［１］，是 国 家 卫 生 部 首 批 颁 布 的 药食两用 的 ６０ 种 中 药 之 一。 紫 苏 具 有 镇 咳 化 痰、 解热、抗菌、止呕、抗氧化、降血脂等功效 。 ［２］ 林 烟 草 ［Ｌｉｎ ｔｏｂａｃｃｏ］，为茄科烟草属植物，为野生品种。 紫 苏烟［ｚｉｓｕ ｔｏｂａｃｃｏ］是山西农业大学于 １９８４ 年利 用 紫 苏 （作 为 父 本 ♂ ）和 林 烟 草 （作 为 母 本 ♀ ）科 间 远 缘 杂交，经１０余年的 选 择 与 培 育 而 成 的 药 烟 新 品 种， 旨在使紫苏的医药 成 分 转 移 至 紫 苏 烟 中，以 此 来 增 加烟气 中 有 益 成 分，减 少 有 害 成 分 。 ［３］ 芦 丁 （Ｒｕ－ ｔｉｎ），又称芸 香 苷，是 一 种 多 羟 基 黄 酮 类 化 合 物，在 临床上主要用于 治 疗 高 血 压、心 血 管 疾 病、胃 病、皮 肤 病 、糖 尿 病 等 多 种 疾 病 ，又 具 有 抗 菌 、抗 炎 、抗 氧 化 等 多 种 药 理 活 性 ，广 泛 用 于 医 药 、保 健 食 品 和 化 妆 品 等行业。芦丁主要 存 在 于 槐 米、苦 荞 麦 及 烟 草 等 植 物中。目前国内提 取 芦 丁 的 主 要 原 料 为 槐 米，但 槐 米资源紧缺，不能满足市场需求［４］，而紫苏有可 能 使 烟草中的芦丁含量大幅提高。为缓解芦丁原料供应 紧张现状，我们采用 高 效 液 相 色 谱 法 对 紫 苏 烟 的 两 个优良品种 Ｑ 和 Ｑ－００００１ 及 普 通 烟 草 进 行 芦 丁 含 量 测 定 ，通 过 实 验 结 果 和 查 阅 相 关 文 献 ，希 望 找 到 一 种 提 取 芦 丁 的 优 质 原 料 ，增 加 芦 丁 的 来 源 ，缓 解 市 场 压力。 １ 仪 器 与 材 料
高效液相色 谱 仪 （ＬＣ－１００ 高 压 恒 流 泵，紫 外 检测 器 ）；Ａｐｏｌｌｏ Ｃ１８ 色 谱 柱 （１５０ｍｍ×４．６ｍｍ， ５μｍ），色 谱 工 作 站 为 上 海 伍 丰 工 作 站 。
在山西农业大学植物园药烟种植基地采紫苏烟 Ｑ 和紫苏烟 Ｑ－００００１ 及 普 通 烟 草 开 花 前 全 株 无 病 叶片，阴干，粉碎，过筛；芦 丁 对 照 品 （批 号：１０００８０－ ２００７０７）购 自 中 国 药 品 生 物 制 品 检 定 所 ；甲 醇 为 色 谱 醇；磷酸为分析纯；水 为 超 纯 水；其 他 试 剂 均 为 分 析 纯。
粉末０．５ｇ，再分别 精 确 加 入 相 应 量 的 对 照 品 溶 液， 按照２．２．２节方案制备６份供试品溶液 。 ［７］ 分 别 精 密吸取１０μＬ，在上述色谱 条 件 下 测 定，结 果 见 表 １。 试验结果表明，按本 实 验 方 法 测 定 样 品 中 芦 丁 的 含
量 ，加 样 回 收 率 均 符 合 要 求 。
作者简介：陈安飞，男，１９８３年 ８月出生，硕士研究生，主要从事中草药有效成分研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｆａｉａｎｃｈｅｎ＠１２６．ｃｏｍ。 通 讯 作 者 ：张 金 桐 ，山 西 农 业 大 学 教 授 ，主 要 从 事 昆 虫 性 信 息 素 和 中 药 有 效 成 分 的 研 究 。
２０１１年第５期 分 析 仪 器
草的供试品 溶 液 各 １０μＬ 分 别 注 入 色 谱 仪，每 样 平 行测定５份［８］，结果紫苏 烟 Ｑ、紫 苏 烟 Ｑ－００００１、普 通烟 草 的 芦 丁 含 量 分 别 为 １．０５０％，１．２６７％， ０．５０５％ 。
表 ２ 样品中芦丁的含量（ｎ＝５）
样品名称
紫苏烟 Ｑ 紫苏烟 Ｑ－００００１
序号
１ ２ ３ ４ ５ ６
样品取样量 （ｇ）
０．５１２ ０．５０７ ０．４９８ ０．５１１ ０．５０５ ０．５１０
表 １ 加样回收率实验结果（ｎ＝６）
样品含量 （ｍｇ）
实测值 （ｍｇ）
回收率 （％ ）
０．５３８ ０．５３２ ０．５２３ ０．５３７ ０．５３０ ０．５３６
２２
分 析 仪 器 ２０１１年第５期
两种紫苏烟和普通烟草芦丁含量的测定和比较
陈安飞 张金桐 魏治中
（山 西 农 业 大 学 ，太 谷 ，０３０８０１）
摘 要 本文采用紫苏烟 Ｑ 和紫苏烟 Ｑ－００００１及普通烟 草 为 材 料，通 过 ＨＰＬＣ 法 测 定 并 比 较 其 中 芦 丁 的 含 量，目的是找到提取芦丁的新原料，以便于大面积种植推广。ＨＰＬＣ 所 采 用 的 色 谱 柱 为 Ａｐｏｌｌｏ Ｃ１８ 柱 （１５０ ｍｍ× ４．６ｍｍ，５μｍ），流动相为甲醇︰１．０％磷酸（６０︰４０，Ｖ︰Ｖ ）；柱 温 ２５℃；流 速 ０．８ｍＬ／ｍｉｎ，检 测 波 长 为 ３９２ｎｍ。 普 通 烟草中芦丁含量为０．５０５％，紫苏烟 Ｑ 和紫苏烟 Ｑ－００００１中芦丁含量分别 为 １．０５０ ％ 和 １．２６７ ％，后 两 者 芦 丁 含 量为前者的２倍多，其中紫苏烟 Ｑ－００００１中芦丁含量最高，是一种值得推广种植的用于提取芦丁的新原料。
精密称 取 芦 丁 对 照 品 ０．０５０ｇ，置 于 ５０ ｍＬ 容 量瓶 中，用 甲 醇 定 容 至 刻 度，摇 匀，作 为 储 备 液。 精 密吸取储备液２．０ｍＬ，置于２５ ｍＬ 容量瓶 中，用 甲 醇稀释至刻度，摇匀，得芦丁对照品溶液 ０．０８ ｍｇ· ｍＬ－１。 ２．２．２ 供 试 品 溶 液 的 制 备
２ 方 法 与 结 果
２．１ 色 谱 条 件 色 谱 柱 Ａｐｏｌｌｏ Ｃ１８ 柱 （１５０ｍｍ × ４．６ｍｍ，
５μｍ），流动相：甲醇︰１．０％磷酸（６０︰４０，Ｖ︰Ｖ ），检 测波长３９２ｎｍ［５］，柱 温 ２５℃，流 速 ０．８ｍＬ·ｍｉｎ－１。 对照品和样品的色谱图见图１ 。 ２．２ 溶 液 的 配 制 ２．２．１ 对 照 品 溶 液 的 制 备
Leabharlann Baidu
值 ｙ 进 行 线 性 回 归，得 方 程：ｙ＝４８３７４ｘ＋１９３．７８ （Ｒ２＝０．９９９４）。结果表明，对照品 进 样 量 在 ０．２０～ １．６０μｇ 范 围 内 ，芦 丁 峰 面 积 与 进 样 量 呈 现 良 好 的 线 性 关 系 ，见 图 ２。
图 ２ 芦丁标准曲线图
２４
分 析 仪 器 ２０１１年第５期
２３
ａ
ｂ
ｃ
ｄ
图 １ 对照品及样品色谱图
ａ．芦丁对照品 ｂ．紫苏烟 Ｑ ｃ．紫苏烟 Ｑ－００００１ ｄ．普通烟草
２．３ 标 准 曲 线 绘 制 用微量进样器分别精密吸取芦丁对照品溶液
２．５，５．０，７．５，１０，１５，２０μＬ，在 上 述 色 谱 条 件 下，进 行 高 效 液 相 色 谱 仪 测 定 ，重 复 ３ 次 ，分 别 计 算 峰 面 积 平均值。以芦丁的进样量ｘ分别对相应峰面积积分
分别称取紫苏烟 Ｑ 粉末１．０ｇ ６份，按供试品溶 液制 备 方 法 配 制 ６ 份 供 试 品 溶 液 ，分 别 进 样１０μＬ，测 得峰面积平均值为５０５９２．４，结果 ＲＳＤ 为１．６３％。
２．７ 加 样 回 收 率 试 验 分别称 取 ６ 份 已 知 含 量 （１．０５０％）的 紫 苏 烟 Ｑ
由实验得知，紫苏烟 Ｑ－００００１中芦丁含量高于 紫苏烟 Ｑ，二者均是普通烟草的２倍左右，可能是中 药紫苏使烟草中的药用成分含量大幅提高。紫苏烟
２０１１年第５期 分 析 仪 器
２５
虽没有槐米中芦丁含量 （约 １０．０％）［９］高，但 产 量 远 高于槐米，与 苦 荞 中 芦 丁 含 量 （约 １．０％）略 高 或 相 当 。 ［１０，１１］ 紫苏烟 经 多 年 的 选 择 培 育，性 状 稳 定，品 质良好，芦丁含 量 较 高。 鉴 于 芦 丁 具 有 多 种 药 用 价 值，紫苏 烟 Ｑ－００００１ 作 为 提 取 芦 丁 的 新 原 料，值 得 进行大面积种植推广。
作者对紫苏烟中芦丁的提取溶剂和浓度进行了 选 择 ，结 果 表 明 ，５０％ 乙 醇 提 取 时 间 最 短 ，效 率 较 高 。
作者 在 做 芦 丁 标 准 曲 线 过 程 中，发 现 随 着 注 入 芦丁量的加大，芦丁标准品色谱图（图１ 中 Ａ 图）中 的前两个小峰面 积 不 变，应 为 滞 留 峰。 芦 丁 峰 后 的 峰面积随芦丁量加 大 而 成 比 例 增 大，均 约 是 芦 丁 峰 面 积 的 １／９，而 芦 丁 对 照 品 含 量 为 ９０．５％ ，所 以 应 为 杂 质 峰 。 另 外 ，由 于 从 进 样 到 计 时 开 始 时 间 间 隔 、柱 温等稍有不同，导致 对 照 品 和 样 品 的 保 留 时 间 略 有 差异。
普通烟草
峰面积
５１００１．３ ６２５００．４ ２４６０２．８
芦丁含量 （％）
１．０５０ １．２６７ ０．５０５
ＲＳＤ （％）
１．２６ １．６９ ０．９４
３ 讨 论
由实验可知，提 取 液 为 紫 红 色，颜 色 越 深，芦 丁 含量越高。本实验采用索氏提取器连续回流的方法 提 取 ，至 浸 泡 材 料 的 溶 剂 为 无 色 时 停 止 加 热 ，证 明 芦 丁提取率较高。
参 照 参 考 文 献 ［６］中 方 法 ，因 为 叶 绿 素 等 脂 溶 性
色素在氯仿中的溶 解 度 较 高，而 芦 丁 在 其 中 的 溶 解 度却很低 ，首先利用氯仿为溶剂以除去材料中的叶 绿素等脂溶性色 素。 但 氯 仿 毒 性 较 大，考 虑 到 二 氯 甲 烷 与 氯 仿 化 学 性 质 相 似 ，且 毒 性 较 小 ，故 本 实 验 采 用了二氯甲烷作为溶剂。
１．０３０ １．０４２ １．０１６ １．０３２ １．０３３ １．０２５
９８．４ １０２．０ ９８．６ ９９．０ １００．６ ９７．８
平均回收率 （％ ）
ＲＳＤ （％ ）
９９．４
１．５８
注 ：对 照 品 加 入 量 均 为 ０．５００ｍｇ。
２．８ 样 品 含 量 测 定 准确吸 取 紫 苏 烟 Ｑ、紫 苏 烟 Ｑ－００００１、普 通 烟
［１］ 卫生部药典委员会．中国药典．北京：化学工 业 出 版 社， 人 民 卫 生 出 版 社 ，１９８５：３０１．
［２］ 顾文娟，朱 陈 珏，张 建 梅．黑 龙 江 畜 牧 兽 医 ２００６，（８）： ２６－２８．
［３］ 魏 治 中 ．药 烟 栽 培 技 术 ．北 京 ：金 盾 出 版 社 ，２００２：９． ［４］ 王 丽 ．教 育 科 学 ，２０１０，（１０）：１９４－１９５．
２．４ 精 密 度 试 验 分别精密吸取０．０８ｍｇ·ｍＬ－１芦丁对照品溶 液
各１０μＬ，重 复 进 样 ６ 次，结 果 芦 丁 峰 面 积 的 平 均 值 为３９３６９．４，ＲＳＤ 为１．５９ ％，精密度较好。 ２．５ 稳 定 性 试 验
精密吸取 紫 苏 烟 Ｑ 提 取 液，分 别 于 ０，４，８，１２， １６，２４ｈ时进样１０μＬ，结 果 芦 丁 峰 面 积 的 平 均 值 为 ５１７４６．５，ＲＳＤ 为 １．８４％，表 明 Ｑ 烟 及 其 他 供 试 品 溶 液 在 ２４ｈ 内 稳 定 性 良 好 。 ２．６ 重 复 性 试 验
准 确 称 取 各 材 料 粉 末 １．０ｇ，分 别 用 滤 纸 包 裹 ，置 于 索 氏 提 取 器 中 ，加 入 １００ ｍＬ 二 氯 甲 烷［６］，５０℃ 回 流 至无色，取出材料，挥发溶剂至恒重，而后将滤纸包置 于索氏 提 取 器 中，加 入 １００ｍＬ ５０％ 乙 醇，设 定 温 度 ９０℃，提取至 提 取 液 无 色，时 间 约 ６ｈ。 将 提 取 液 离 心 ，置 于 １００ ｍＬ 容 量 瓶 中 ，稀 释 至 刻 度 。
关键词 紫苏烟 Ｑ 紫苏烟 Ｑ－００００１ 普通烟草 芦丁 ＨＰＬＣ
紫 苏 ［ｐｅｒｉｌｌａ ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ（Ｌ．）Ｂｒｉｔｔ．］是 唇 形 科 紫 苏 属 一 年 生 草 本 植 物［１］，是 国 家 卫 生 部 首 批 颁 布 的 药食两用 的 ６０ 种 中 药 之 一。 紫 苏 具 有 镇 咳 化 痰、 解热、抗菌、止呕、抗氧化、降血脂等功效 。 ［２］ 林 烟 草 ［Ｌｉｎ ｔｏｂａｃｃｏ］，为茄科烟草属植物，为野生品种。 紫 苏烟［ｚｉｓｕ ｔｏｂａｃｃｏ］是山西农业大学于 １９８４ 年利 用 紫 苏 （作 为 父 本 ♂ ）和 林 烟 草 （作 为 母 本 ♀ ）科 间 远 缘 杂交，经１０余年的 选 择 与 培 育 而 成 的 药 烟 新 品 种， 旨在使紫苏的医药 成 分 转 移 至 紫 苏 烟 中，以 此 来 增 加烟气 中 有 益 成 分，减 少 有 害 成 分 。 ［３］ 芦 丁 （Ｒｕ－ ｔｉｎ），又称芸 香 苷，是 一 种 多 羟 基 黄 酮 类 化 合 物，在 临床上主要用于 治 疗 高 血 压、心 血 管 疾 病、胃 病、皮 肤 病 、糖 尿 病 等 多 种 疾 病 ，又 具 有 抗 菌 、抗 炎 、抗 氧 化 等 多 种 药 理 活 性 ，广 泛 用 于 医 药 、保 健 食 品 和 化 妆 品 等行业。芦丁主要 存 在 于 槐 米、苦 荞 麦 及 烟 草 等 植 物中。目前国内提 取 芦 丁 的 主 要 原 料 为 槐 米，但 槐 米资源紧缺，不能满足市场需求［４］，而紫苏有可 能 使 烟草中的芦丁含量大幅提高。为缓解芦丁原料供应 紧张现状，我们采用 高 效 液 相 色 谱 法 对 紫 苏 烟 的 两 个优良品种 Ｑ 和 Ｑ－００００１ 及 普 通 烟 草 进 行 芦 丁 含 量 测 定 ，通 过 实 验 结 果 和 查 阅 相 关 文 献 ，希 望 找 到 一 种 提 取 芦 丁 的 优 质 原 料 ，增 加 芦 丁 的 来 源 ，缓 解 市 场 压力。 １ 仪 器 与 材 料
高效液相色 谱 仪 （ＬＣ－１００ 高 压 恒 流 泵，紫 外 检测 器 ）；Ａｐｏｌｌｏ Ｃ１８ 色 谱 柱 （１５０ｍｍ×４．６ｍｍ， ５μｍ），色 谱 工 作 站 为 上 海 伍 丰 工 作 站 。
在山西农业大学植物园药烟种植基地采紫苏烟 Ｑ 和紫苏烟 Ｑ－００００１ 及 普 通 烟 草 开 花 前 全 株 无 病 叶片，阴干，粉碎，过筛；芦 丁 对 照 品 （批 号：１０００８０－ ２００７０７）购 自 中 国 药 品 生 物 制 品 检 定 所 ；甲 醇 为 色 谱 醇；磷酸为分析纯；水 为 超 纯 水；其 他 试 剂 均 为 分 析 纯。
粉末０．５ｇ，再分别 精 确 加 入 相 应 量 的 对 照 品 溶 液， 按照２．２．２节方案制备６份供试品溶液 。 ［７］ 分 别 精 密吸取１０μＬ，在上述色谱 条 件 下 测 定，结 果 见 表 １。 试验结果表明，按本 实 验 方 法 测 定 样 品 中 芦 丁 的 含
量 ，加 样 回 收 率 均 符 合 要 求 。
作者简介：陈安飞，男，１９８３年 ８月出生，硕士研究生，主要从事中草药有效成分研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｆａｉａｎｃｈｅｎ＠１２６．ｃｏｍ。 通 讯 作 者 ：张 金 桐 ，山 西 农 业 大 学 教 授 ，主 要 从 事 昆 虫 性 信 息 素 和 中 药 有 效 成 分 的 研 究 。
２０１１年第５期 分 析 仪 器
草的供试品 溶 液 各 １０μＬ 分 别 注 入 色 谱 仪，每 样 平 行测定５份［８］，结果紫苏 烟 Ｑ、紫 苏 烟 Ｑ－００００１、普 通烟 草 的 芦 丁 含 量 分 别 为 １．０５０％，１．２６７％， ０．５０５％ 。
表 ２ 样品中芦丁的含量（ｎ＝５）
样品名称
紫苏烟 Ｑ 紫苏烟 Ｑ－００００１
序号
１ ２ ３ ４ ５ ６
样品取样量 （ｇ）
０．５１２ ０．５０７ ０．４９８ ０．５１１ ０．５０５ ０．５１０
表 １ 加样回收率实验结果（ｎ＝６）
样品含量 （ｍｇ）
实测值 （ｍｇ）
回收率 （％ ）
０．５３８ ０．５３２ ０．５２３ ０．５３７ ０．５３０ ０．５３６
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分 析 仪 器 ２０１１年第５期
两种紫苏烟和普通烟草芦丁含量的测定和比较
陈安飞 张金桐 魏治中
（山 西 农 业 大 学 ，太 谷 ，０３０８０１）
摘 要 本文采用紫苏烟 Ｑ 和紫苏烟 Ｑ－００００１及普通烟 草 为 材 料，通 过 ＨＰＬＣ 法 测 定 并 比 较 其 中 芦 丁 的 含 量，目的是找到提取芦丁的新原料，以便于大面积种植推广。ＨＰＬＣ 所 采 用 的 色 谱 柱 为 Ａｐｏｌｌｏ Ｃ１８ 柱 （１５０ ｍｍ× ４．６ｍｍ，５μｍ），流动相为甲醇︰１．０％磷酸（６０︰４０，Ｖ︰Ｖ ）；柱 温 ２５℃；流 速 ０．８ｍＬ／ｍｉｎ，检 测 波 长 为 ３９２ｎｍ。 普 通 烟草中芦丁含量为０．５０５％，紫苏烟 Ｑ 和紫苏烟 Ｑ－００００１中芦丁含量分别 为 １．０５０ ％ 和 １．２６７ ％，后 两 者 芦 丁 含 量为前者的２倍多，其中紫苏烟 Ｑ－００００１中芦丁含量最高，是一种值得推广种植的用于提取芦丁的新原料。
精密称 取 芦 丁 对 照 品 ０．０５０ｇ，置 于 ５０ ｍＬ 容 量瓶 中，用 甲 醇 定 容 至 刻 度，摇 匀，作 为 储 备 液。 精 密吸取储备液２．０ｍＬ，置于２５ ｍＬ 容量瓶 中，用 甲 醇稀释至刻度，摇匀，得芦丁对照品溶液 ０．０８ ｍｇ· ｍＬ－１。 ２．２．２ 供 试 品 溶 液 的 制 备
２ 方 法 与 结 果
２．１ 色 谱 条 件 色 谱 柱 Ａｐｏｌｌｏ Ｃ１８ 柱 （１５０ｍｍ × ４．６ｍｍ，
５μｍ），流动相：甲醇︰１．０％磷酸（６０︰４０，Ｖ︰Ｖ ），检 测波长３９２ｎｍ［５］，柱 温 ２５℃，流 速 ０．８ｍＬ·ｍｉｎ－１。 对照品和样品的色谱图见图１ 。 ２．２ 溶 液 的 配 制 ２．２．１ 对 照 品 溶 液 的 制 备
Leabharlann Baidu
值 ｙ 进 行 线 性 回 归，得 方 程：ｙ＝４８３７４ｘ＋１９３．７８ （Ｒ２＝０．９９９４）。结果表明，对照品 进 样 量 在 ０．２０～ １．６０μｇ 范 围 内 ，芦 丁 峰 面 积 与 进 样 量 呈 现 良 好 的 线 性 关 系 ，见 图 ２。
图 ２ 芦丁标准曲线图
２４
分 析 仪 器 ２０１１年第５期
２３
ａ
ｂ
ｃ
ｄ
图 １ 对照品及样品色谱图
ａ．芦丁对照品 ｂ．紫苏烟 Ｑ ｃ．紫苏烟 Ｑ－００００１ ｄ．普通烟草
２．３ 标 准 曲 线 绘 制 用微量进样器分别精密吸取芦丁对照品溶液
２．５，５．０，７．５，１０，１５，２０μＬ，在 上 述 色 谱 条 件 下，进 行 高 效 液 相 色 谱 仪 测 定 ，重 复 ３ 次 ，分 别 计 算 峰 面 积 平均值。以芦丁的进样量ｘ分别对相应峰面积积分
分别称取紫苏烟 Ｑ 粉末１．０ｇ ６份，按供试品溶 液制 备 方 法 配 制 ６ 份 供 试 品 溶 液 ，分 别 进 样１０μＬ，测 得峰面积平均值为５０５９２．４，结果 ＲＳＤ 为１．６３％。
２．７ 加 样 回 收 率 试 验 分别称 取 ６ 份 已 知 含 量 （１．０５０％）的 紫 苏 烟 Ｑ
由实验得知，紫苏烟 Ｑ－００００１中芦丁含量高于 紫苏烟 Ｑ，二者均是普通烟草的２倍左右，可能是中 药紫苏使烟草中的药用成分含量大幅提高。紫苏烟
２０１１年第５期 分 析 仪 器
２５
虽没有槐米中芦丁含量 （约 １０．０％）［９］高，但 产 量 远 高于槐米，与 苦 荞 中 芦 丁 含 量 （约 １．０％）略 高 或 相 当 。 ［１０，１１］ 紫苏烟 经 多 年 的 选 择 培 育，性 状 稳 定，品 质良好，芦丁含 量 较 高。 鉴 于 芦 丁 具 有 多 种 药 用 价 值，紫苏 烟 Ｑ－００００１ 作 为 提 取 芦 丁 的 新 原 料，值 得 进行大面积种植推广。
作者对紫苏烟中芦丁的提取溶剂和浓度进行了 选 择 ，结 果 表 明 ，５０％ 乙 醇 提 取 时 间 最 短 ，效 率 较 高 。
作者 在 做 芦 丁 标 准 曲 线 过 程 中，发 现 随 着 注 入 芦丁量的加大，芦丁标准品色谱图（图１ 中 Ａ 图）中 的前两个小峰面 积 不 变，应 为 滞 留 峰。 芦 丁 峰 后 的 峰面积随芦丁量加 大 而 成 比 例 增 大，均 约 是 芦 丁 峰 面 积 的 １／９，而 芦 丁 对 照 品 含 量 为 ９０．５％ ，所 以 应 为 杂 质 峰 。 另 外 ，由 于 从 进 样 到 计 时 开 始 时 间 间 隔 、柱 温等稍有不同，导致 对 照 品 和 样 品 的 保 留 时 间 略 有 差异。
普通烟草
峰面积
５１００１．３ ６２５００．４ ２４６０２．８
芦丁含量 （％）
１．０５０ １．２６７ ０．５０５
ＲＳＤ （％）
１．２６ １．６９ ０．９４
３ 讨 论
由实验可知，提 取 液 为 紫 红 色，颜 色 越 深，芦 丁 含量越高。本实验采用索氏提取器连续回流的方法 提 取 ，至 浸 泡 材 料 的 溶 剂 为 无 色 时 停 止 加 热 ，证 明 芦 丁提取率较高。
参 照 参 考 文 献 ［６］中 方 法 ，因 为 叶 绿 素 等 脂 溶 性
色素在氯仿中的溶 解 度 较 高，而 芦 丁 在 其 中 的 溶 解 度却很低 ，首先利用氯仿为溶剂以除去材料中的叶 绿素等脂溶性色 素。 但 氯 仿 毒 性 较 大，考 虑 到 二 氯 甲 烷 与 氯 仿 化 学 性 质 相 似 ，且 毒 性 较 小 ，故 本 实 验 采 用了二氯甲烷作为溶剂。
１．０３０ １．０４２ １．０１６ １．０３２ １．０３３ １．０２５
９８．４ １０２．０ ９８．６ ９９．０ １００．６ ９７．８
平均回收率 （％ ）
ＲＳＤ （％ ）
９９．４
１．５８
注 ：对 照 品 加 入 量 均 为 ０．５００ｍｇ。
２．８ 样 品 含 量 测 定 准确吸 取 紫 苏 烟 Ｑ、紫 苏 烟 Ｑ－００００１、普 通 烟