真菌性感染小培养技术及应用
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山西医药杂志 ２ ０ １ ３年 ３月 第 ４ ２卷 第 ３期 上 半 月 Ｓ ｈ ａ ｎ ｘ ｉ Ｍｅ ｄ Ｊ ， Ｍａ ｒ ｃ ｈ ２ ０ １ ３ ， Ｖｏ １ ．４ ２ ， Ｎｏ ． ３ ｔ ｈ ｅ Ｆ ｉ ｒ ｓ ｔ
・
３ ３７ ・
・
医 学检 验 ・
真菌 性 感 染 小培 养 技 术 及应 用
常在 ５ 以上 。近 年 来 ， 随着高效广谱 抗生素 、 免疫抑 制剂 、
抗 恶性 肿 瘤 药 物 的广 泛 应 用 ， 器官移植 、 导 管 技 术 以及 外 科 其 他介 入性 治疗 的深 入 开 展 ， 特别 是 获 得 性 免 疫 缺 陷 综 合 征 （ Ａ Ｉ Ｄ Ｓ ） 的出现 ， 条 件致 病 性 真 菌 引 起 的 系统 性 真 菌 病 日益 增 多， 新 的致 病 菌 不 断 出 现 ， 病 情 也 日趋 严 重 。因 此 ， 真 菌 性 感
１ ． １ 成分 ： 琼脂 １ ５ ｇ 、 葡 萄糖 或 麦 芽糖 ４ ０ ｇ 、 蛋 白胨 １ Ｏ ｇ 、 抗 生素 ０ ． ２ ５ ｇ及 １ 氯 化 三苯 基 四氮 唑 溶 液 ２ ． ５ ｍＬ 。 １ ． ２ 制作 ： 将琼脂 １ ５ ｇ和 蛋 白胨 １ ０ ｇ加 入 水 中 ， 溶 化 后 加 人 葡 萄 糖或 麦 芽 糖 ４ ０ ｇ和 抗 生 素 ０ ． ２ ５ ｇ ， 调整 ｐ Ｈ在 ７ ． ２ ～ ７ ． ４ ， 加蒸馏水至 １ ０ ０ ０ ｍＬ ， 纱 布 过 滤 。压 力 蒸 汽 灭 菌 １ ５ ｍｉ ｎ 后， 在 余 热 的 培 养 基 中加 入 １ ％氯 化 三 苯 基 四 氮 唑 溶 液 ２ ． ５ ｍ Ｌ后 ， 混匀 ， 无 菌 操 作 分装 于直 径 约 ２ ｃ ｍ、 高约 ３ ． ５ ｃ ｍ 的小
ｌ 材 料 与 方 法
‘
（ 包 括 白带 ） 标本 中， 其他致病 菌 （ 在 血 琼 脂 平 板 培 养 基 上 生
长一 种 致 病 菌 菌 落 １ Ｏ个 以 上 ） 有 ４ ７ ５份 ， 阳 性 检 出 率 为
１ ６ ． ７ ． ０ ４， 占 白假丝 酵母 菌 阳性 总 数 的 ３ ９ ． ８ ， 其 中 自假 丝 酵
母菌双重感染者有 ８ ７例 ， 占阳性 病 例 总 数 的 ７ ． ９ 。
３ 讨 论
实践 证 明 ： 真菌小 培养技术 ， 具有 微型化 、 小 巧、 经 济 和
Leabharlann Baidu
他真菌菌落为隆起 、 红 色、 一 般 有 经 验 者 可 凭 此 特 征 就 能 判
断， 有怀疑时 ， 可 挑 取 菌 落 于玻 片 上 ， 加 盖 片 在 显 微 镜 下 进 一 步 区分 其 他 真菌 和 细 菌 ， 可 见 典 型 真菌 菌 丝 或 真 菌孢 子 。
２ 结 果
５年及 近期 使 用 小 培 养技 术 检 查 了 ３ ０ ７ １份 及 ２ ０ ３ 份 临 床标本 ， 仅 以 白假 丝酵 母 菌 总 检 出率 为 ２ ７ ． ６ ％及 ３ ４ ． ５ 。其 中阴 道 分 泌 物 （ 包 括 白带 ） 标本 ２ ８ ４ ０份 及 ５ ２份 ， 检 出 率 ２ ５ ． ３ 及 ２ １ ． ２ ； 口腔 （ 仅指 痰和咽拭子） 及脓汁等其 他 ２ ３ １ 份及 １ ５ １ 份， 检 出率 ５ ５ ． ４ ％及 ３ ９ ． １ 。 阴道 分 泌 物 （ 包括 白 带） 标本 ， 除接种小培养 外 ， 同时接种血 琼脂平板 培养基 ， 作 为其 他 致 病 菌 的检 出 。５年 结 果 表 明 ２ ８ ４ ０份 的 阴 道 分 泌 物
２ ４ ￣４ ８ ｈ ， 即可 观 察 结 果 。 ④在 检 查 真 菌性 感 染 ， 接 种 小 培 养
的同时， 还接种血琼 脂平板培 养基 ， 一 方 面 作 为 小 培 养 的 检 出率 对 照 ， 另一方 面作为其他 致病菌 的检出 ， 以 防 止 其 他 细 菌感 染 的漏 诊 。 不 同 的真 菌 有 其各 自的特 征 ， 白假 丝 酵母 菌 有 自己 的 特 征， 在培养 ２ ０ ￣４ ８ ｈ后 ， 菌落为直径 约 ２ ｍ ｍ， 隆起 、 白色 ， 其
染 的诊 断 亟 需 一个 简 便 、 易行 、 准确和可靠的实验诊断方法 。
通 常真 菌 感 染 的诊 断 方 法 ， 以培 养 方 法 为最 可 靠 。真 菌 性 感 染 小 培 养 检 验 技术 使 用 以 来 ， 与常规倾 碟培养 法 （ 梅 里 埃 公 司生 产 ） 相 比， 总符合率为 ７ １ ． ９ ； 但 其 具 有 微 型 化 和 良好 选 择性 （ 即 只生 长 真 菌 ） 的 特点 ， 而且制作简单 ， 费用低廉 ， 操 作 方便 ； 可 以 在未 设 立 或 不 完 善 的微 生 物 实 验 室 的 医 院 和 诊 所 使用 ， 尤 其 是 能 满 足农 村 乡 镇 医 院 的需 要 。
山 西 省 中 医药 研 究 院 （ ０ ３ ０ ０ １ ２ ）
任 建 平 高 颖 杨 少 芳 王 晓 玲
郝 宇龙
黄 元 桐
真 菌感 染 性 疾 病 ， 根 据 真 菌 侵 犯 人 体 的 部 位 分 为 ４类 ：
浅 表 真 菌病 、 皮 肤真 菌 病 、 皮 下 组 织 真 菌 病 和 系统 性 真 菌 病 ； 前 二 者 合称 为浅 部 真 菌病 ， 后 二 者 又 称 为 深 部 真 菌病 。系 统 性真菌病 ， 除 侵犯 皮 肤 和 皮 下 组 织 外 ， 还 累及 组 织 和 器 官 ， 甚 至 引起 播散 性 感 染 ， 主要包 括念 珠菌 病 、 曲霉 病 、 隐 球 菌 病 等， 以真 菌 性 阴道 炎 多 见 ， 是妇女的常见病和多发病 ， 发 病 率
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医 学检 验 ・
真菌 性 感 染 小培 养 技 术 及应 用
常在 ５ 以上 。近 年 来 ， 随着高效广谱 抗生素 、 免疫抑 制剂 、
抗 恶性 肿 瘤 药 物 的广 泛 应 用 ， 器官移植 、 导 管 技 术 以及 外 科 其 他介 入性 治疗 的深 入 开 展 ， 特别 是 获 得 性 免 疫 缺 陷 综 合 征 （ Ａ Ｉ Ｄ Ｓ ） 的出现 ， 条 件致 病 性 真 菌 引 起 的 系统 性 真 菌 病 日益 增 多， 新 的致 病 菌 不 断 出 现 ， 病 情 也 日趋 严 重 。因 此 ， 真 菌 性 感
１ ． １ 成分 ： 琼脂 １ ５ ｇ 、 葡 萄糖 或 麦 芽糖 ４ ０ ｇ 、 蛋 白胨 １ Ｏ ｇ 、 抗 生素 ０ ． ２ ５ ｇ及 １ 氯 化 三苯 基 四氮 唑 溶 液 ２ ． ５ ｍＬ 。 １ ． ２ 制作 ： 将琼脂 １ ５ ｇ和 蛋 白胨 １ ０ ｇ加 入 水 中 ， 溶 化 后 加 人 葡 萄 糖或 麦 芽 糖 ４ ０ ｇ和 抗 生 素 ０ ． ２ ５ ｇ ， 调整 ｐ Ｈ在 ７ ． ２ ～ ７ ． ４ ， 加蒸馏水至 １ ０ ０ ０ ｍＬ ， 纱 布 过 滤 。压 力 蒸 汽 灭 菌 １ ５ ｍｉ ｎ 后， 在 余 热 的 培 养 基 中加 入 １ ％氯 化 三 苯 基 四 氮 唑 溶 液 ２ ． ５ ｍ Ｌ后 ， 混匀 ， 无 菌 操 作 分装 于直 径 约 ２ ｃ ｍ、 高约 ３ ． ５ ｃ ｍ 的小
ｌ 材 料 与 方 法
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（ 包 括 白带 ） 标本 中， 其他致病 菌 （ 在 血 琼 脂 平 板 培 养 基 上 生
长一 种 致 病 菌 菌 落 １ Ｏ个 以 上 ） 有 ４ ７ ５份 ， 阳 性 检 出 率 为
１ ６ ． ７ ． ０ ４， 占 白假丝 酵母 菌 阳性 总 数 的 ３ ９ ． ８ ， 其 中 自假 丝 酵
母菌双重感染者有 ８ ７例 ， 占阳性 病 例 总 数 的 ７ ． ９ 。
３ 讨 论
实践 证 明 ： 真菌小 培养技术 ， 具有 微型化 、 小 巧、 经 济 和
Leabharlann Baidu
他真菌菌落为隆起 、 红 色、 一 般 有 经 验 者 可 凭 此 特 征 就 能 判
断， 有怀疑时 ， 可 挑 取 菌 落 于玻 片 上 ， 加 盖 片 在 显 微 镜 下 进 一 步 区分 其 他 真菌 和 细 菌 ， 可 见 典 型 真菌 菌 丝 或 真 菌孢 子 。
２ 结 果
５年及 近期 使 用 小 培 养技 术 检 查 了 ３ ０ ７ １份 及 ２ ０ ３ 份 临 床标本 ， 仅 以 白假 丝酵 母 菌 总 检 出率 为 ２ ７ ． ６ ％及 ３ ４ ． ５ 。其 中阴 道 分 泌 物 （ 包 括 白带 ） 标本 ２ ８ ４ ０份 及 ５ ２份 ， 检 出 率 ２ ５ ． ３ 及 ２ １ ． ２ ； 口腔 （ 仅指 痰和咽拭子） 及脓汁等其 他 ２ ３ １ 份及 １ ５ １ 份， 检 出率 ５ ５ ． ４ ％及 ３ ９ ． １ 。 阴道 分 泌 物 （ 包括 白 带） 标本 ， 除接种小培养 外 ， 同时接种血 琼脂平板 培养基 ， 作 为其 他 致 病 菌 的检 出 。５年 结 果 表 明 ２ ８ ４ ０份 的 阴 道 分 泌 物
２ ４ ￣４ ８ ｈ ， 即可 观 察 结 果 。 ④在 检 查 真 菌性 感 染 ， 接 种 小 培 养
的同时， 还接种血琼 脂平板培 养基 ， 一 方 面 作 为 小 培 养 的 检 出率 对 照 ， 另一方 面作为其他 致病菌 的检出 ， 以 防 止 其 他 细 菌感 染 的漏 诊 。 不 同 的真 菌 有 其各 自的特 征 ， 白假 丝 酵母 菌 有 自己 的 特 征， 在培养 ２ ０ ￣４ ８ ｈ后 ， 菌落为直径 约 ２ ｍ ｍ， 隆起 、 白色 ， 其
染 的诊 断 亟 需 一个 简 便 、 易行 、 准确和可靠的实验诊断方法 。
通 常真 菌 感 染 的诊 断 方 法 ， 以培 养 方 法 为最 可 靠 。真 菌 性 感 染 小 培 养 检 验 技术 使 用 以 来 ， 与常规倾 碟培养 法 （ 梅 里 埃 公 司生 产 ） 相 比， 总符合率为 ７ １ ． ９ ； 但 其 具 有 微 型 化 和 良好 选 择性 （ 即 只生 长 真 菌 ） 的 特点 ， 而且制作简单 ， 费用低廉 ， 操 作 方便 ； 可 以 在未 设 立 或 不 完 善 的微 生 物 实 验 室 的 医 院 和 诊 所 使用 ， 尤 其 是 能 满 足农 村 乡 镇 医 院 的需 要 。
山 西 省 中 医药 研 究 院 （ ０ ３ ０ ０ １ ２ ）
任 建 平 高 颖 杨 少 芳 王 晓 玲
郝 宇龙
黄 元 桐
真 菌感 染 性 疾 病 ， 根 据 真 菌 侵 犯 人 体 的 部 位 分 为 ４类 ：
浅 表 真 菌病 、 皮 肤真 菌 病 、 皮 下 组 织 真 菌 病 和 系统 性 真 菌 病 ； 前 二 者 合称 为浅 部 真 菌病 ， 后 二 者 又 称 为 深 部 真 菌病 。系 统 性真菌病 ， 除 侵犯 皮 肤 和 皮 下 组 织 外 ， 还 累及 组 织 和 器 官 ， 甚 至 引起 播散 性 感 染 ， 主要包 括念 珠菌 病 、 曲霉 病 、 隐 球 菌 病 等， 以真 菌 性 阴道 炎 多 见 ， 是妇女的常见病和多发病 ， 发 病 率