阪崎肠杆菌的研究进展

生物学特性
菌落培养特性 菌 落 特 征
在胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)、脑心浸液琼脂 (BHI)及血平板
上经25～36℃培养24 h后，形成1.5～2.5mm的黄色菌落
在结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂 (VRBGA) 平板上划线分离， 生长24h后菌落形态有2种：一种为典型的光滑型菌落，极易
被接种环移动;另一种为干燥或粘液样，周边呈放射状，不
谢谢！
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分布及受污染食品

阪崎肠杆菌在自然界分布广泛，早在1974年从水，土
壤、植物根茎、下水道、动物和人类排泄物中分离到
阪崎肠杆菌。

婴儿配方奶粉是新生儿阪崎肠杆菌感染的主要感染源 阪崎肠杆菌的污染调查：分别从饼干巧克力类、方便 面类、谷物类、儿童食品类、干果类和其他类食品中 检出阪崎肠杆菌。
阪崎肠杆菌不仅存在于奶粉中，而且在 其它食品也存在

阪崎肠杆菌的毒力因子可能是一类肠毒素样 化合物。在组织培养过程中一些菌株产生细 胞毒效应，且菌株间的毒力作用有差异。 细菌内毒素（脂多糖），是构成革兰氏阴性 细菌细胞外壁的主要成分。具有热稳定性， 能增加小肠上皮细胞通透性，促使细菌侵入 肠壁中而致病。

预防与控制
预防 坚持母乳喂养 选择检查合格的奶粉 开水冲调婴幼儿配方食品，再次食用前应重新加热。 控制 制定婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌微生物标准 制定加工、使用和操作婴幼儿配方食品的导则 制定有效的环境监测计划 建立实验室监测网络，对阪崎肠杆菌的来源、传播途径 等进行调查研究
阪崎肠杆菌的致病性
阪崎肠杆菌是存在自然环境中的一种
“条件致病菌”，由其引发的危害人群 主要是婴儿以及早产儿。偶尔还可引起 成人炎、
菌血症和坏死性小肠结肠炎，并可能遗 留严重的神经系统后遗症，死亡率20 ％～50％。
阪崎杆菌的致病性
致病机制研究不多，尚不清楚。 目前所知阪崎肠杆菌致病性可能与肠毒素和内毒 素有关
实时荧光定量PCR技术
基本原理是在PCR反应体系中加入一种探针



探针可以与目的DNA片段特异地互补结合 探针的一端标记荧光基团，另一端标记淬灭基 团 在探针未被DNA聚合酶破坏时，后者可以吸收前 者的荧光；探针被破坏，淬灭基团不能吸收荧 光基团所发荧光 利用检测器检测荧光强度 通过标准曲线进行定量分析
易被接种环移动，似橡胶状有弹性。
生物学特性
生理生化特性

阪崎肠杆菌与阴沟肠杆菌有31％～49％的DNA序列 同源性，G+C含量为57％ 阪崎肠杆菌α-葡萄糖苷酶表现为阳性, 并缺少磷 酰胺酶活性（区别于其它肠杆菌）



具有产生吐温-80酯酶的能力(鉴定依据)
阪崎肠杆菌还具有氧化酶阴性、过氧化酶阳性、 D-山梨醇阴性和细胞外DNAse阳性等多种特征。
生物学特性
形态特征
阪崎肠杆菌属肠杆菌科肠杆菌
属，具备肠杆菌基本形态特征： 革兰阴性粗短杆菌，细胞大小 为(0.6～1.1)×(1.2～3.0)um， 有周身菌毛，无芽胞
生物学特性
菌落培养特性
营 养 要 求 培 养 温 度
不高，能在普通营养琼脂、血平板、麦康凯 (MAC)琼脂、伊红美兰(EMB)琼脂、脱氧胆酸 琼脂等多种培养基上生长繁殖。 在外界环境中比其他肠道杆菌生存率强， 培养最佳温度25—36℃，在6～45℃下都 能生长
阪崎肠杆菌研究进展
龙道崎、邹妍、关郁芳、 雷丹丹、边伟、胡鹏
目录
概述
生物学特性
检测方法 致病性 预防和控制
阪崎肠杆菌概述
阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)属肠杆菌科， 是人和动物肠道内寄生的一种周生鞭毛、能运动、 无芽孢的革兰氏阴性菌，一直以来被称为黄色阴沟 肠杆菌 (Enterobacter cloacae)，于1980年以日 本细菌学家 Riichi Sakazakii的名字命名。 阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠 炎和败血症，近年来受到了研究者的广泛关注
生物学特性
抗性

耐干燥、渗透压 原因：阪崎肠杆菌细胞内含有大量的海藻糖 酶，累积有大量的海藻糖，使得阪崎肠杆菌 比其他肠杆菌更耐受渗透压和干燥。 耐酸性 实验表明阪崎肠杆菌能在pH 0.9～2下存活 原因：可能与阪崎肠杆菌周身菌毛结构有关， 菌毛结构易使细菌形成共生集合体，粘附在 物体表面形成一层生物保护膜

检测方法
经典方法：MPN计数法 细菌学分离培养方法 改良法：XαGLC选择性显色培养基法 改良法：荧光选择性鉴别培养基法
PCR方法
分子生物学方法
实时荧光定量PCR方法
XαGLC选择性显色培养基法
利用阪崎肠杆菌α-葡萄糖苷酶活性的检测方法

原 理
在胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）培养基中加入 了5-溴-4-氯-吲哚-α-D-吡喃葡萄苷 (XαGLC)作为发色基团，组成显色培养基 （称为DFI琼脂）。 α-葡萄糖苷酶水解XαGLC，释放糖苷配基 5-溴-4-氯-吲哚，该糖苷配基在氧存在时 形成色素溴-氯-吲哚，使菌落呈现特异性 蓝绿色。