水产品中药物残留快速检测的理论与实践

硝基呋喃类
呋喃西林Nitrofurazone SEM
5-硝基-2-亚糠基半卡巴腙
氨基脲
呋喃唑酮furazolidone
AOZ
3-(5-硝基糠醛缩氨基)-2-恶唑烷酮
３-氨基-２-恶唑烷酮
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硝基呋喃类
呋喃它酮Furaltadone AMOZ
土霉素/金霉素/四环素 鱼/虾 磺胺类 所有食品动物
日我国农业部第253号公告、NY5070号公告、 注：数据来源于2002年12月24日我国农业部第 数据来源于 年 月 日我国农业部第 号公告 2002 无公害食品水产品中渔药残留限量。 无公害食品水产品中渔药残留限量。
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食品安全法确立了由 卫生、农业、质检、 卫生、农业、质检、工 食品药品监管等五 商、食品药品监管等五 个部门进行分段监管的 食品安全监督管理体制。 食品安全监督管理体制。
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政策法规
我国农业部第193号公告 号公告 我国农业部第 我国农业部第253号公告（2002年12月24日） 号公告（ 我国农业部第 号公告 年 月 日 NY5070-2002 无公害食品水产品中渔药残留限量 欧盟指令NO.508/99/EEC 欧盟指令 欧盟指令NO.2002/657/EC 欧盟指令
硝基呋喃类药物的用途
合成的广谱抗菌药 杀菌能力强、抗菌谱广、不易产生耐药性、 价格低廉和疗效好
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硝基呋喃代谢和毒性
动物体内代谢分解迅速 代谢分解迅速：原药稳定性只有数小时 代谢分解迅速 大部分代谢产物与动物组织中的蛋白质迅速结合， 在动物体内可以稳定存在数星期 人食用后，在胃酸的作用下代谢物与蛋白质发生解 离，对人体具有致癌性和诱导基因突变 致癌性和诱导基因突变作用 致癌性和诱导基因突变
抑制骨髓造血机能 胃肠道反应和二重感染 过敏反应 循环衰竭（灰婴综合征）
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中毒剂量 中毒剂量
在食品中的残留浓度高达1mg/kg（ppm）以 （ ） 上时对食用者有严重威胁
成为第一个被世界各国禁用 禁用于食品动物的抗生素 禁用
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对位氨基苯磺酰胺 （简称磺胺）
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磺胺类药物的作用
磺胺类药对许多革兰氏阳性菌和一些革 兰氏阴性菌、诺卡氏菌属、衣原体属和某 些原虫（如疟原虫和阿米巴原虫）均有抑 制作用
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国家标准 行业标准 国家标准 行业标准 国家标准 行业标准
× × × × × × × × × × ×
× × × × × × × × × × ×
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注：“√”表示已形成相应国标、行标；“×”表示未形成相应国标、行标。
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磺胺类的毒性
①过敏反应 ②肾脏损害：由于乙酰化磺胺溶解度低，尤其在尿液偏
酸时,易在肾小管中析出结晶,引起血尿、尿痛、尿闭等症
③造血系统的影响：磺胺药能抑制骨髓白细胞形成，
引起白细胞减少症
④中枢神经系统和胃肠道反应：多由于磺胺达到
足量所致
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氟喹诺酮类的不良反应
中枢神经系统毒性 中枢神经系统毒性 关节病变 皮肤及光毒性 神经系统 消化道不良反应 肝肾毒性 血液系统毒性
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磺胺类药物
(Sulfonamides, SAs) 磺胺二甲嘧啶(SM2)、 (SIZ) 磺胺二甲嘧啶(SM2)、磺胺异噁唑(SIZ) 磺胺嘧啶(SD)、磺胺甲基异噁唑(SMZ) 磺胺甲氧嘧啶(SMD)、磺胺二甲氧嘧啶 (SDM) 磺胺噻唑(ST)、磺胺间甲氧嘧啶(SMM) 磺胺甲氧哒嗪(SMP)、磺胺甲氧吡嗪(SMPZ) 磺胺喹噁啉(SQ)、磺胺脒(SG)
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氯霉素的药理作用
由委内瑞拉链丝菌产生的抗生素 对革兰阳性、阴性细菌均有抑制作用，且对 后者的作用较强
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氯霉素的毒性 氯霉素的毒性
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最大残留限量值 MRL
药物名称 动物种类 靶组织
所有可食组织 所有可食组织 所有可食组织 所有可食组织 所有可食组织 所有可食组织 所有可食组织 所有可食组织
MRLs
不得检出 不得检出 不得检出 不得检出 不得检出 不得检出 不得检出 不得检出
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何为“孔雀石绿” 何为“孔雀石绿”？
孔雀石绿（Malachitegreen，MG） （ ， ）
四甲基代二氨基三苯甲烷 带有金属光泽绿色的结晶体
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日 本 厚 生 省
水 产 品 出 口 量 下 降 50% 品 2002 9 2002 1 禁 氯 霉 素 超 标 中 国 水 产 超 口 进 止 氯 霉 素
检 出 检 硝 基 呋 喃 鳗 烤 出
2007 7
2009 5
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AOZ
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水产品中药物残留快速检测的 理论与实践
杭州南开日新生物技术有限公司 2011年3月
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常用药物种类
氯霉素 孔雀石绿 硝基呋喃类 己烯雌酚 甲基睾酮 五氯酚钠 喹乙醇 硝基咪唑类 氟喹诺酮类 四环素类 磺胺类
方法比较
检测方法 检出限 样品处理时间 测定所需时间 特殊仪器要求 技术水平要求 结果计算或判断 单样本检测 储存条件 安全性 检测成本 色谱法 +++ 约3小时 约10~30分钟 色谱仪 很高 酶联免疫法 ++ 约30~60分钟 约90分钟 酶标仪 较高 胶体金免疫层析法 + 约30分钟 约3~5分钟 无 很低
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氯霉素及其盐、酯 所有食品动物 孔雀石绿 所有食品动物 呋喃唑酮、呋喃它酮 所有食品动物 甲基睾酮 五氯酚钠 己烯雌酚及其盐、酯 甲硝唑、地美硝唑、 洛硝哒唑 喹乙醇 所有食品动物 所有食品动物 所有食品动物 所有食品动物 水产品
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孔雀石绿的用途
绿色工业染料 杀菌剂、 杀菌剂、驱虫剂 生物染色剂
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孔雀石绿的毒性
致癌、致畸、 致癌、致畸、致突变 高残留：残留时间达 高残留：
到100天以上
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氟喹诺酮类的药物作用
对G-杆菌敏感 对G+球菌有一定抗菌作用 对MRSA有效 对衣原体、支原体、厌氧菌亦有一定作用
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5-吗啉甲基-3-氨基-2-恶唑烷基酮
呋喃妥因Nitrofurantoin
AHD
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1-氨基-2-内酰脲
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氟喹诺酮类
（Fluoroquinolones，FQNS） ， ）
诺氟沙星Norfloxacin 依诺沙星Enoxacin 氧氟沙星Ofloxacin 环丙沙星Ciprofloxacin 麻保沙星Marbofloxacin 双氟沙星Difloxacin 恩诺沙星Enrofloxacin 培氟沙星Pefloxacin 单诺沙星Danofloxacin 斯帕沙星Sparfloxacin ······
需制作标准曲线 需制作标准曲线 肉眼直接判断
√
常温 低 很高
×
2~8℃ 低 高
√
4~30℃ 高 低
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贸易技术壁垒
发达国家的贸易保护主义 出口食品屡屡遭遇绿色壁 垒
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欧 沙 盟 Hale Waihona Puke Baidu 员 会 伯 阿 拉 特
美 日 亚 拉 生 巴 马 宁 州 波 冻 出 福 建 鳗 、 江 西 、 标 安 徽 出 孔 雀 石 绿 元 2005 10 2006 4 2007 5 2005 片 标 鱼 超 鲶 检 、 鱼 鱼 鲨 口 氟 喹 诺 酮 类 失 54 万 美 超 标 损 ， 鳗 烤 硝 基 呋 喃 类 代 谢 物 鲶 鱼 售 销 止 停 氟 喹 诺 酮 类 超 标 冷 冻 虾 口 进 止 禁 面 全 署 卫 日 国 湾 台
食品中药物残留检测 法律依据
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食品安全法
2009年6月1日，新的《中华人民共和国 食品安全法》正式实施 食品安全法
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药物名称
氟 喹 诺 酮 类
动物种类
靶组织 MRLs
总量100ppb 100 ppb 300 ppb 30 ppb 300 ppb 500 ppb
单个或复合物100ppb 总量100ppb
恩诺沙星+环丙 牛/羊、猪、家 肌肉 沙星 禽外其他动物 单诺沙星 双氟沙星 沙拉沙星 噁喹酸 氟甲喹 其他动物 其他动物 鱼 鱼 鱼 肌肉 肌肉 肌肉+皮 + 肌肉+皮 肌肉+皮 肉 肌肉
水产品中药物残留检测 技术及相应产品
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主要检测方法
确证法 筛选法
仪器法(HPLC,LC仪器法 MS, GC-MS等) 等
ELISA法 法
胶体金免疫 层析法
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何为“氯霉素” 何为“氯霉素”？
氯霉素（Chloramphenicol，CAP） （ ， ）
D-苏式-(-)-N-[(-(羟基甲基)-(-羟基-对硝基苯乙基]-2,2-二氯乙酰胺 白色针状或微带黄绿色的针状、长片状结晶或结晶性粉末
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方法标准
药物名称 氯霉素 孔雀石绿 硝基呋喃类 四环素类 氟喹诺酮类 磺胺类 己烯雌酚 甲基睾酮 五氯酚钠 硝基咪唑类 喹乙醇 色谱仪器法 √ √ √ √ √ √ × × × √ × √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ ELISA法 × × × × × × × × × × × √ × √ √ √ √ × × × × √ 胶体金免疫层析法