高脂饲料诱导动脉粥样硬化性ED动物模型建立
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＊ 广 西 南 宁 市 广 西 中 医 学 院 附 属 瑞 康 医 院 男 性 科 （５３００１１） ＊＊广西玉林市中医院男性科 ＊＊＊广西中医学院基础医学院 ＊＊＊＊广西壮族自治区人民医院 论 文 为 广 西 壮 族 自 治 区 教 育 厅 课 题 （桂 教 科 研 ２００４．２０ 号 ）资 助 ２０１２ 年 ５ 月 ２２ 日 收 稿
Biblioteka Baidu
２．２ 血管造影结果：两 组 造 模 ８ 周 后 的 腹 主 动 脉 插 管 造 影 结 果见表２，造模组的双侧髂内动 脉 管 腔 直 径 明 显 较 正 常 对 照 组
缩 小 （Ｐ＜０．０５）（图 １、２）。 表 １ 各 组 血 脂 造 模 ８ 周 后 的 测 定 结 果 （ｘ珔±ｓ，ｍｍｏｌ／Ｌ）
对新西兰纯种 大 白 兔 喂 以 高 脂 饲 料 建 立 动 脉 粥 样 硬 化 性 ＥＤ 的动物模型，观察用此方法建立 动 脉 粥 样 硬 化 性 ＥＤ 模 型 的 可 行性，探索一种更为有效、简便的方法建立动脉粥样 硬 化 性 ＥＤ 模型，从而用于动脉粥样硬化性 ＥＤ 的进一步研究。 １ 料 与 方 法 １．１ 实验动物：６～８ 月 龄 的 纯 种 新 西 兰 大 白 兔 ，体 重 ２．９～ ３．５ｋｇ；性成熟雌性纯种新西兰 大 白 兔 ５ 只。 雄 兔 均 有 正 常 勃 起功能 （由与发情雌鼠交配证实）。 １．２ 实验方法：①实验动物喂养：所有纯种 新 西 兰 大 白 兔 室 内 １５～２５℃环境分笼饲养，每天喂以家兔 专 用 颗 粒 饲 料，早、晚 各 喂食１次，自由饮水。②实验动物分组：所 有 ３２ 只 纯 种 新 西 兰 大白兔随机分为二组：正常对照组１０只，常规颗粒饲料喂 养； 造模组２２只高脂 饲 料（１０％ 猪 大 油、９．５％ 蛋 黄、０．５％ 胆 固 醇） 喂养。所有动物第８周检测：血脂及腹 主 动 脉 插 管 造 影。 ③ 血 标本采集：耳缘 静 脉 抽 取 静 脉 血，血 液 经 低 速 离 心，分 离 出 血 清，－２０℃保存，测 定 甘 油 三 酯 （ＴＧ）、胆 固 醇 （ＴＣ）及 高、低 密 度脂蛋白（ＨＤＬ、ＬＤＬ）［３］。 ④ 血 脂 测 定：（１）胆 固 醇 （ＴＣ）测 定 采用酶法（终点 法／ＦＨＯ－ＰＡＰ ＭＥＴＨＯＤ）；（２）甘 油 三 酯 （ＴＧ） 测定采用 酶 法 （终 点 法／ＧＰＯ－ＰＡＰ Ｍｅｔｈｏｄ）；（３）高、低 密 度 脂 蛋白测定 （ＨＤＬ、ＬＤＬ）：由 ＢＭ／ＨＩＴＡＣＨＩ脂 蛋 白 自 动 测 定 仪 完成。高密度脂蛋白结果 超 过 ０．０８～３．９０ｍｍｏｌ／Ｌ 时，用 生 理 盐水将样品稀释，重新测定所得结果乘以 稀 释 倍 数。 低 密 度 脂 蛋白由 仪 器 计 算 系 统 根 据 高 密 度 脂 蛋 白 测 试 结 果 ，再 根 据 Ｆｒｉｅｄｗａｌｄｌ［４］方 程 式 计 算 后 自 动 输 出［３］。 ⑤ 腹 主 动 脉 插 管 造 影 ：实 验 兔 子８ 周 后 下 腹 正 中 部 位 脱 毛 ，腹 腔 注 射３％ 戊 巴 比 妥 钠（５０ｍｇ／ｋｇ）麻醉，无菌条件下 作 一 下 腹 正 中 切 口，逐 层 切 开， 打开下腹腔，将腹腔内脏器组织推开，再打 开 后 腹 膜，游 离 出 一 段腹主动脉约２ｃｍ，置 入 接 ２０ｍｌ生 理 盐 水 的 留 置 针 后 以 １ 号 丝线打结固定，轻推生理盐水５ｍｌ无溢出以证实置 管 成 功 后 接 ５０％ 的 泛 影 葡 胺 快 速 推 入 ２０ｍｌ后 进 行 数 字 减 影 造 影 摄 片 。 １．３ 统计学分析：数据采用 ＳＰＳＳ１５．０统计软件进行统计学处 理，计量资料所有数据均采用ｘ珚±ｓ表 示，符 合 正 态 分 布 的 数 据 组间两两比较采用方 差 分 析，计 数 资 料 采 用 χ２ 检 验 及 四 格 表 确切概率，Ｐ＜０．０５或 Ｐ＜０．０１为显著性检验界线。 ２ 结 果 ２．１ 高脂动物模型：全 部 实 验 白 兔 共 有 ２ 只 在 实 验 过 程 中 死 亡，均为造模组，于喂 养 １ 周 后 死 于 腹 泻。 所 有 死 亡 的 动 物 资 料不列入统计。各组动物血脂测定结果表 明：高 脂 饲 料 的 动 物 血 清 中 血 脂 含 量 明 显 高 于 同 期 对 照 组 ，见 表 １。
２０１２ 年 第 １５ 期
１１７
实验研究
高脂饲料诱导动脉粥样硬化性 ＥＤ 动物模型的建立
杨文涛＊ 李锡主＊＊ 李群生＊ 乔 飞＊ 张 煜＊＊＊ 李大文＊＊＊＊ 王英俊＊
摘 要：目的：探索采用高含量猪油高脂饲料建立动脉粥样硬化性阴茎勃起功能障碍（ＥＤ）的动物 模 型。 方 法：３２ 只 雄 性 纯 种 新 西 兰 大 白 兔 ，随 机 分 为 ２ 组 ：正 常 对 照 组 １０ 只 ，喂 以 普 通 饲 料 ；造 模 组 ２２ 只 ，喂 以 高 脂 饲 料 喂 养 ８ 周 后 检 测 血 脂 及 腹 主 动 脉 造 影 。 结 果：造模组均出现高脂血症及腹主动脉狭窄，与对照组相比有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论：高脂饲料喂饲新西兰 纯 种 大 白 兔 可 建 立动脉粥样硬性 ＥＤ 的动物模型，进一步建立 ＥＤ 的动物模型，为研究 ＥＤ 的中医药治疗奠定实验基础。 关 键 词 ：勃 起 功 能 障 碍 ；动 脉 粥 样 硬 化 性 ；兔
中 图 分 类 号 ：Ｒ－３３２；Ｒ６９８．２ 文 献 标 识 码 ：Ｂ 文 章 编 号 ：１００６－０９７９（２０１２）１５－０１１７－０２
众所周知，高脂血 症 可 引 起 动 脉 粥 样 硬 化，而 勃 起 功 能 障 碍 （ｅｒｅｃｔｉｌｅ ｄｉｓｆｕｎｃｔｉｏｎ，ＥＤ）与 高 脂 血 症 及 动 脉 粥 样 硬 化 有 密 切 关 系 。 ［１，２］ 动 脉 硬 化 性 ＥＤ 越 来 越 引 起 人 们 的 重 视 和 进 一 步 深 入的研究，而建立动物模型是研究的前提 与 关 键。 本 研 究 通 过
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２．２ 血管造影结果：两 组 造 模 ８ 周 后 的 腹 主 动 脉 插 管 造 影 结 果见表２，造模组的双侧髂内动 脉 管 腔 直 径 明 显 较 正 常 对 照 组
缩 小 （Ｐ＜０．０５）（图 １、２）。 表 １ 各 组 血 脂 造 模 ８ 周 后 的 测 定 结 果 （ｘ珔±ｓ，ｍｍｏｌ／Ｌ）
对新西兰纯种 大 白 兔 喂 以 高 脂 饲 料 建 立 动 脉 粥 样 硬 化 性 ＥＤ 的动物模型，观察用此方法建立 动 脉 粥 样 硬 化 性 ＥＤ 模 型 的 可 行性，探索一种更为有效、简便的方法建立动脉粥样 硬 化 性 ＥＤ 模型，从而用于动脉粥样硬化性 ＥＤ 的进一步研究。 １ 料 与 方 法 １．１ 实验动物：６～８ 月 龄 的 纯 种 新 西 兰 大 白 兔 ，体 重 ２．９～ ３．５ｋｇ；性成熟雌性纯种新西兰 大 白 兔 ５ 只。 雄 兔 均 有 正 常 勃 起功能 （由与发情雌鼠交配证实）。 １．２ 实验方法：①实验动物喂养：所有纯种 新 西 兰 大 白 兔 室 内 １５～２５℃环境分笼饲养，每天喂以家兔 专 用 颗 粒 饲 料，早、晚 各 喂食１次，自由饮水。②实验动物分组：所 有 ３２ 只 纯 种 新 西 兰 大白兔随机分为二组：正常对照组１０只，常规颗粒饲料喂 养； 造模组２２只高脂 饲 料（１０％ 猪 大 油、９．５％ 蛋 黄、０．５％ 胆 固 醇） 喂养。所有动物第８周检测：血脂及腹 主 动 脉 插 管 造 影。 ③ 血 标本采集：耳缘 静 脉 抽 取 静 脉 血，血 液 经 低 速 离 心，分 离 出 血 清，－２０℃保存，测 定 甘 油 三 酯 （ＴＧ）、胆 固 醇 （ＴＣ）及 高、低 密 度脂蛋白（ＨＤＬ、ＬＤＬ）［３］。 ④ 血 脂 测 定：（１）胆 固 醇 （ＴＣ）测 定 采用酶法（终点 法／ＦＨＯ－ＰＡＰ ＭＥＴＨＯＤ）；（２）甘 油 三 酯 （ＴＧ） 测定采用 酶 法 （终 点 法／ＧＰＯ－ＰＡＰ Ｍｅｔｈｏｄ）；（３）高、低 密 度 脂 蛋白测定 （ＨＤＬ、ＬＤＬ）：由 ＢＭ／ＨＩＴＡＣＨＩ脂 蛋 白 自 动 测 定 仪 完成。高密度脂蛋白结果 超 过 ０．０８～３．９０ｍｍｏｌ／Ｌ 时，用 生 理 盐水将样品稀释，重新测定所得结果乘以 稀 释 倍 数。 低 密 度 脂 蛋白由 仪 器 计 算 系 统 根 据 高 密 度 脂 蛋 白 测 试 结 果 ，再 根 据 Ｆｒｉｅｄｗａｌｄｌ［４］方 程 式 计 算 后 自 动 输 出［３］。 ⑤ 腹 主 动 脉 插 管 造 影 ：实 验 兔 子８ 周 后 下 腹 正 中 部 位 脱 毛 ，腹 腔 注 射３％ 戊 巴 比 妥 钠（５０ｍｇ／ｋｇ）麻醉，无菌条件下 作 一 下 腹 正 中 切 口，逐 层 切 开， 打开下腹腔，将腹腔内脏器组织推开，再打 开 后 腹 膜，游 离 出 一 段腹主动脉约２ｃｍ，置 入 接 ２０ｍｌ生 理 盐 水 的 留 置 针 后 以 １ 号 丝线打结固定，轻推生理盐水５ｍｌ无溢出以证实置 管 成 功 后 接 ５０％ 的 泛 影 葡 胺 快 速 推 入 ２０ｍｌ后 进 行 数 字 减 影 造 影 摄 片 。 １．３ 统计学分析：数据采用 ＳＰＳＳ１５．０统计软件进行统计学处 理，计量资料所有数据均采用ｘ珚±ｓ表 示，符 合 正 态 分 布 的 数 据 组间两两比较采用方 差 分 析，计 数 资 料 采 用 χ２ 检 验 及 四 格 表 确切概率，Ｐ＜０．０５或 Ｐ＜０．０１为显著性检验界线。 ２ 结 果 ２．１ 高脂动物模型：全 部 实 验 白 兔 共 有 ２ 只 在 实 验 过 程 中 死 亡，均为造模组，于喂 养 １ 周 后 死 于 腹 泻。 所 有 死 亡 的 动 物 资 料不列入统计。各组动物血脂测定结果表 明：高 脂 饲 料 的 动 物 血 清 中 血 脂 含 量 明 显 高 于 同 期 对 照 组 ，见 表 １。
２０１２ 年 第 １５ 期
１１７
实验研究
高脂饲料诱导动脉粥样硬化性 ＥＤ 动物模型的建立
杨文涛＊ 李锡主＊＊ 李群生＊ 乔 飞＊ 张 煜＊＊＊ 李大文＊＊＊＊ 王英俊＊
摘 要：目的：探索采用高含量猪油高脂饲料建立动脉粥样硬化性阴茎勃起功能障碍（ＥＤ）的动物 模 型。 方 法：３２ 只 雄 性 纯 种 新 西 兰 大 白 兔 ，随 机 分 为 ２ 组 ：正 常 对 照 组 １０ 只 ，喂 以 普 通 饲 料 ；造 模 组 ２２ 只 ，喂 以 高 脂 饲 料 喂 养 ８ 周 后 检 测 血 脂 及 腹 主 动 脉 造 影 。 结 果：造模组均出现高脂血症及腹主动脉狭窄，与对照组相比有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论：高脂饲料喂饲新西兰 纯 种 大 白 兔 可 建 立动脉粥样硬性 ＥＤ 的动物模型，进一步建立 ＥＤ 的动物模型，为研究 ＥＤ 的中医药治疗奠定实验基础。 关 键 词 ：勃 起 功 能 障 碍 ；动 脉 粥 样 硬 化 性 ；兔
中 图 分 类 号 ：Ｒ－３３２；Ｒ６９８．２ 文 献 标 识 码 ：Ｂ 文 章 编 号 ：１００６－０９７９（２０１２）１５－０１１７－０２
众所周知，高脂血 症 可 引 起 动 脉 粥 样 硬 化，而 勃 起 功 能 障 碍 （ｅｒｅｃｔｉｌｅ ｄｉｓｆｕｎｃｔｉｏｎ，ＥＤ）与 高 脂 血 症 及 动 脉 粥 样 硬 化 有 密 切 关 系 。 ［１，２］ 动 脉 硬 化 性 ＥＤ 越 来 越 引 起 人 们 的 重 视 和 进 一 步 深 入的研究，而建立动物模型是研究的前提 与 关 键。 本 研 究 通 过