细菌分布 PPT课件

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方法
在超净工作台中或酒精灯旁,用无菌棉签或经酒精灯 火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物,以划线方式 将菌液均匀涂布到平皿中的固体培养基表面。
然后用无菌镊子将纸片放于固体培养基表面并轻压, 使纸片与培养基表面完全接触。为了能准确观察结果, 要求药敏纸片均匀分布于培养基上,位置安排适中, 防止出现抑制圈重叠。一般各纸片中心相距应大于 24mm,可在平皿中央贴一片,外周等距离贴5-6片。 记住每种药敏纸片的名称。
培养箱
接种枯 草杆菌
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(三)消毒剂对细菌的影响
化学消毒剂杀菌的原理:使微生物蛋白质凝固与变 性,致使细菌代谢发生障碍而死亡;干扰微生物 酶系统和影响其代谢;损伤细胞膜:醇类、酚类、 表面活性剂等损伤细菌细胞膜,引起细胞膜的渗 透性改变,导致细菌死亡。
消毒剂:2%碘酒棉球,75%酒精棉球。 方法:以碘酒(酒精棉球)消毒手指前后,分别
生理盐水 器材:接种环、酒精灯、镊子等
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实验内容与方法
一、细菌分布 (一)细菌在自然界的分布 (二)细菌在正常人体的分布
二、外界因素对细菌的不利影响 (一)湿热对细菌的杀灭作用 (二)紫外线对细菌的杀灭作用 (三)消毒剂对细菌的杀灭作用 (四)抗生素对细菌的杀灭作用
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一、细菌的分布
1、空气中的细菌检查(1块平板) 2、水(自来水)中细菌的检查(1块平板) 3、周围环境中细菌检查(1块平板)
自由发挥(如笔、硬币) 4、皮肤(手)上细菌的检查(结合化学消毒
剂试验)(1块平板) 5、咽喉中细菌的检查(1块平板)
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二、外界因素对细菌的影响
(一)湿热对细菌的杀灭作用 (二)紫外线对细菌的杀灭作用 (三)消毒剂对细菌的杀灭作用 (四)抗生素对细菌的杀灭作用
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葡 萄 球 菌
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大 肠 杆 菌
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常用药物抑菌圈直径大小来判断结果的标准,如下
抗菌药物
中介
AMK9阿米卡星 30ug ≤14 15-16 CLI 克林霉素 2ug ≤14 15-20
GEN庆大霉素 10ug ≤12 OXA苯唑西林 1ug ≤10 PEN青霉素 10U ≤28 AMS舒巴坦 10/10ug ≤11 AMP氨卞西林 10ug ≤13
2、灭菌:用物理或化学方法清除或杀灭物体 上所有微生物(包括病原微生物、非病原微生 物、繁殖体和细菌的芽胞)的方法。
3、无菌操作:防止微生物进入机体或物体的 操作方法,称无菌操作或无菌技术。如外科手 术,细菌接种等。
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实验材料
菌种:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌; 培养基:普通平板、液体培养管 试剂:2%碘酒棉球、75%酒精棉球、药敏纸片、无菌












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100℃ 5min
菌 膜
100℃ 5min
37℃ 24h
澄 清
浑 浊
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枯 草 杆 菌








大 肠 杆 菌
普通条件培养下细菌生长状况
煮沸杀菌后细菌生长状况
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(二)紫外线对细菌的影响
原理:紫外线可以诱发细菌DNA形成胸腺嘧啶二聚 体,使细菌死亡。
13-14 11-12
12-14 14-16
PIP哌拉西林 100ug ≤17 FZN头孢唑碄 30ug ≤14 CAZ头孢它定 30ug ≤14 CIP环丙沙星 5 ug ≤15 ATM氨曲南 30ug ≤15
15-17 15-17 16-20 16-21
FRX头孢呋辛 30ug ≤14 IMP亚氨配南 10ug ≤13 VAN万古霉素 30ug ≥15
取有芽胞细菌(枯草杆菌)、无芽胞细菌,设置对 照后,以紫外线照射30min, 37℃培养24h,观察 结果。
枯草杆菌
紫外线30min
+
枯草杆菌 -
金黄色葡菌球 金黄色葡菌球 菌或大肠杆菌 菌或大肠杆菌
+

37℃培养24h 后
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紫外线杀菌的结果
接种大 肠杆菌
班级、姓名/学号、 大肠 枯草
uv30’
15-17 14-15
SXT复方新诺明1.25/23.75ug≤10 11-15
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(一)温度对细菌的影响
热力杀菌的原理:是通过加热脱水干燥和大分子 变性。可使菌体蛋白质变性或凝固,酶失去活性, 新陈代谢发生障碍,细菌因而死亡。
目的要求: 认识高温(煮沸法)对细菌繁殖体和芽胞的作用
材料: 1、菌种:枯草杆菌(有芽胞) 大肠杆菌 (无芽胞) 2、肉汤培养基、水浴锅
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贴完纸片的平皿15分钟后再置于37℃温箱中培养16-
24小时,观察记录结果。以药敏纸片周围没有肉眼可
见生长物区域为抑菌圈,根据抑菌圈直径大小判断细
菌对抗菌药的敏感性。
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药敏纸片
庆大霉素、菌必治、青霉素、丙氟哌酸
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药敏试验结果判断
抑菌圈
药敏试验结果判定标准 抑菌圈直径(毫米)敏感性 >20mm极敏感 15-20mm高敏感 10-14mm中敏感 <10mm低敏感 0不敏感
实验四
细菌的分布与外界因素对细菌的影响
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目的要求
1.了解细菌在自然界和正常人体的分布; 2.掌握物理因素、化学因素、生物因素对
细菌的不利影响; 3.理解消毒、灭菌及无菌操作的重要意义;
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基本概念
1、消毒:用物理或化学方法杀死物体上病原 微生物的方法。如注射前用2%的碘酒在局部皮 肤涂擦;用75%的酒精棉球擦拭体温表等。用 于消毒的化学药物称为消毒剂。
实验方法
检测对象:大肠杆菌(或金黄色葡萄球菌)、枯 草杆菌;
步骤:分别取上述两种细菌,设置对照组后,分 别沸水浴5-10min, 37℃培养24h,观察结果。
枯草杆菌 枯草杆菌
100 ℃ 10m
+

37℃培养 24h后
金黄色葡 菌球菌或 大肠杆菌
+
金黄色葡 菌球菌或 大肠杆菌

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涂抹平板培养基, 37℃培养24h后,观察结果。
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(四)抗生素对细菌的影响(药敏试验 )
原理 影响细胞壁的合成:β-内酰胺类抗生素,如青 霉素、头孢曲松。 影响细胞膜的功能:多黏菌素、两性霉素B; 影响蛋白质的合成:氨基糖苷类、四环素类、大 环内酯类。如庆大霉素为氨基糖苷类。 影响核酸代谢:喹诺酮类、利福霉素类、磺胺类。 如丙氟哌酸为第二代喹诺酮类抗菌药;
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