实验十一、作物种子发芽率测定

实验十一、作物种子发芽率测定

[实验原理]

红墨水染色法：凡有生活力种子胚细胞的原生质膜具有半透性，有选择吸收外界物质的能力，一般染料不能进入细胞内，胚部不能被染色。而丧失生活力的种子，其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收能力，染料可自由进入细胞内使胚部染色。故可根据种子胚部是否被染色来判断种子的生活力。

TTC法：凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生活力的种子的胚则无此反应。TTC可以渗入种子的活细胞中，并作为受氢体而被脱氢辅酶（NADH或NADPH）还原，由无色的氧化型变成红色的三苯甲腙，活种子胚部被染成红色；反之，死种子不能染色，部分丧失生活力的种子染色较浅。因此可根据染色部位和染色程度来判断种子的生活力。

[器材与试剂]

材料：大豆种子。

器材：小烧杯，刀片，镊子，培养皿

试剂：0.5％TTC溶液（随用随配），红墨水溶液（红墨水：水=1：60）。

[实验步骤]

1. 种子处理

先将玉米、大豆种子用40℃左右温水浸泡2～3 h，待充分吸胀后，取出一部分在沸水中煮3～5min杀死种胚，作为对照观察。选择吸胀的新种子、陈种子和死种子各100粒，如为大豆，用镊子小心剥去种皮，如为玉米则用刀片沿胚部中线纵切成两半，取其中胚的各部分比较完整的一半用于实验。

2. 红墨水染色法：

（1）取吸胀的新种子、陈种子和死种子各100粒，置于3个培养皿中，加入红墨水溶液，以覆盖

种子为度。然后置于恒温箱中保温0.5～1h（温度高时间可缩短）。

（2）染色结束后倒出红墨水溶液，用清水将种子冲洗1～2次，观察种胚被染色的情况，凡生活

力强的种子，胚完全不着色，或在子叶和胚根上面有不大的着色很淡的斑点；如果整个胚根全部

着色或在胚根和子叶上有着色很浓的斑点，就是完全丧失或大部分丧失生活力的种子。

（3）计算有生活力种子的百分率。

3. TTC(氯化三苯基四氮唑)法

（1）取吸胀的新种子、陈种子和死种子各100粒，置于3个培养皿中，加入0.5%TTC溶液浸没种子，于恒温箱中保温0.5～4h。

（2）染色结束后倒出TTC溶液，用清水冲洗1～2次，立即观察种胚被染色的情况，判断种子的生活力。凡种胚全部染红的为生活力旺盛的活种子，死种子胚完全不染色，或染成极淡的颜色。在以上两种类型中间有许多过渡类型，判断的要点在于看胚根、胚芽盾片中部等关键部位是否有生活力，凡这几部分健全而有生活力的被染成红色，就是可以发芽的种子；反之，如这几部分不能染色，其他部位（如胚芽鞘、胚根鞘、盾片两端）虽然染色也不能发芽。

（3）计算有生活力种子的百分率。

4. 发芽实验

经生活力检测后，获得种子的理论发芽率，为进一步检测，取同一批种子播种于沙土中，观察真正发芽率，比较快速生活力检测与发芽实验的结果。