药物分析第(8)章

H2N
COO(C2H5)2 + NaOH
H2N
COONa + CH3CH2OH
CH3CH2OH+ 4I2 + 6NaOH
22
CHI3 + 5NaI + HCOONa + 5H2O
四、 制备衍生物测熔点 1. 三硝基苯酚衍生物的制备： 利多卡因和布比卡因
NHCOCH2N(C2H5)2 O N 2 CH3
28
注射用盐酸丁卡因

(2)
取含量测定项下的溶液，照紫外-可见分光 A)测定，在227nm与310nm
光度法(附录Ⅳ
的波长处有最大吸收。
29
盐酸普鲁卡因胺注射液
【鉴别】
(1)
取本品适量，加水制成每1ml
中含盐酸普鲁卡因胺5μg的溶液，照紫外-可见 分光光度法(附录Ⅳ 长处有最大吸收。 A)测定，在280nm的波
41
盐酸氯普鲁卡因
二甲苯 取二甲苯1滴(约20mg)，精密称定， 置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，精密 量取5ml置10ml量瓶中，用水稀释至刻度作为 对照品溶液；另取本品0.25g，精密称定，置 10ml带塞试管中，精密加入水5ml使溶解，作 为供试品溶液。照气相色谱法(中国药典2000年 版二部附录Ⅴ E)检查，以10%聚乙二醇 (PEG)20M和3.5%二甘油(DG)混合为固定相， 氢火焰离子化检测器(FID)。柱温95±5℃。分 别精密吸收上述对照品溶液和供试品溶液各2～ 3μl注入色谱仪，用外标法计算，供试品中二甲 苯的残留量不得超过0.1%。
ON NC4H9 + NaCl + H 2O COOCH2CH2N(CH3)2
COOCH2CH2N(CH3)2
盐酸丁卡因
12
乳白色
苯佐卡因
(3)
本品显芳香第一胺类的鉴别反应(附录Ⅲ)。
盐酸普鲁卡因
(4)
本品显芳香第一胺类的鉴别反应(附录Ⅲ)。
13
二、与重金属离子反应
1. 与铜及钴离子反应 芳酰胺
27
盐酸氯普鲁卡因
【鉴别】 (1)取本品，加磷酸盐缓冲液(取磷酸 二氢钾13.61克，加水750ml使溶解，用氢氧 化钾溶液(1→180)调至pH4.5±0.1，加水稀 释至1000ml，即得)制成每1ml中约含10μg 的溶液，照分光光度法(中国药典2000年版二部 附录ⅣA)测定，在229nm与290nm的波长处 有最大吸收。 (4)本品的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一 致。
FeCl3
NH2
H2O2 CONHCH2CH2N(C2H5)2
NH2
Fe
CON(OH)CH2CH2N(C2H5)2 紫红，暗棕色，棕黑色 3
CON(OH)CH2CH2N(C2H5)2
18
盐酸普鲁卡因胺

【鉴别】
(1)
取本品0.1g．加水5ml，加三
氯化铁试液与浓过氧化氢溶液各1滴。缓缓加热至 沸，溶液显紫红色，随即变为暗棕色至棕黑色。
26
盐酸布比卡因
【鉴别】 (1) 取本品，精密称定，按干燥 品计算，加0.01mol/L盐酸溶液溶解并定量稀 释制成每1ml中约含0.40mg的溶液，照紫外可见分光光度法(附录Ⅳ A)测定，在263nm 与271nm的波长处有最大吸收；其吸光度分别 为0.53～0.58与0.43～0.48。
(2) 本品的红外光吸收图谱应与对照品的图谱 (光谱集324图)一致。
33
盐酸利多卡因注射液

【鉴别】
(2)
在含量测定项下记录的色
谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品 溶液主峰的保留时间一致。
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盐酸布比卡因注射液

【鉴别】
(1)
在含量测定项下记录的色谱
图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶 液主峰的保留时间一致。
35
第三节 特殊杂质与检查
36
一、盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查
醋氨苯砜
CH3 NHCO CH3 C4H9 N
.
HCl
盐酸布比卡因
5
三、主要理化性质
1. 芳伯氨基特性: 显重氮化-偶合反应; 与芳醛缩合 成Schiff碱的反应；易氧化变色 。(盐酸丁卡因， 无) 2. 水解性：因分子结构中有酯键。 3. 弱碱性：能与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应；在 非水溶剂中能滴定。
1. 盐酸普鲁卡因的鉴别方法
鉴别试验
NaOH
H2N
COONa + HOCH2CH2N(C2H5)2
H2N
COONa HCl
H 2N
21
COOH HCl
HCl H2N
COOH
鉴别试验
2. 苯佐卡因的鉴别方法 取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5ml，煮 沸，即有乙醇生成，加碘试液，加热，即生成黄 色沉淀，并发生碘仿的臭气。
芳伯氨基或潜在的芳伯氨基 生成重氮盐可与碱性β-萘酚偶合生成有
色的偶氮染料。
盐酸丁卡因无此反应，可鉴别。
9
盐酸普鲁卡因
NH2 + NaNO2 + HCl COOCH2CH2N(C2H5)2 HO NaOH OH N=N + NaCl + H2O N2Cl + NaCl + H 2O COOCH2CH2N(C2H5)2
CH3 NCOCH2N(C2H5)2 CH3 Co 16 H3C (C2H5)2NCH2CON H3C
2. 与汞离子反应
盐酸利多卡因的水溶液加硝酸酸化后，加硝酸
汞试液煮沸，显黄色。 对氨基苯甲酸酯类药物显红色或橙黄色。 用于区别
17
3. 羟肟酸铁盐反应
基于普鲁卡因胺分子中的 芳酰胺结构。
NH2
【鉴别】(2)取本品与盐酸氯普鲁卡因对照品适量， 分别用水制成每1ml中含8mg的溶液；照薄层色谱 法(中国药典2000年版二部附录Ⅴ B)试验，吸取 上述两种溶液各3μl，分别点于同一硅胶GF254薄 层板上，氨熏15分钟，以氯仿-甲醇(70:4)为展开 剂，展开后，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。 供试品溶液所显主斑点的颜色和位置应与对照品溶 液的主斑点相同。
42
三、盐酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯胺及其他杂质的 检查 生产和贮藏过程水解产生2,6-二
甲基苯胺
检查方法：HPLC
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盐酸利多卡因
2，6-二甲苯胺 取本品适量，加流动相溶解并制成每 1ml中含5mg的溶液，作为供试品溶液(临用新制)；另 取2,6-二甲苯胺盐酸盐适量，精密称定，加流动相溶解 并定量稀释制成每1ml中含2，6-二甲苯胺0.5μg的溶 液，作为对照溶液；取2，6二甲苯胺盐酸盐和盐酸利多 卡因各适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中均约含 50μg的溶液，作为系统适用性试验溶液。照含量测定项 下的色谱条件试验，唯检测波长改为230nm，取系统适 用性试验溶液20μl注入液相色谱仪，证录色谱图，2， 6-二甲苯胺峰与利多卡因峰的分离度应符合规定。供试 品溶液色谱图中如显2，6-二甲苯胺峰，其峰面积不得大 于对照溶液中2，6-二甲苯胺峰的面积(0.01％)。
OH
NO2 NO2
H3C
.
熔点为228℃～232℃
23
2. 硫氰酸盐衍生物的制备 盐酸丁卡因
NHC4H9 NH4SCN COOCH2CH2N(C2H5)2.HCl COOCH2CH2N(C2H5)2 . HSCN 熔点为131℃ NHC4H9
24
盐酸丁卡因
【鉴别】 (1) 取本品约0.1g，加5％醋酸
6
三、主要理化性质
4. 溶解性：游离碱难溶于水，可溶于有机溶剂；盐 酸盐易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。 5. 与重金属离子（铜离子或钴离子）发生沉淀反应： 生成有色的配位化合物沉淀。 6. 吸收光谱特性：苯环及相应的取代基与脂烃胺侧 链，具紫外与红外光谱行为。
7
第二节 鉴别试验
8
一、重氮化-偶合反应
38
盐酸普鲁卡因注射液
【检查】 对氨基苯甲酸 精密量取本品适量， 用水定量稀释制成每1ml中含盐酸普鲁卡因 0.2mg的溶液，作为供试品溶液；取对氨基苯甲 酸对照品，精密称定，加水溶解并定量制成每 1ml中含2.4μg的溶液，作为对照品溶液。照盐 酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸项下的方法测定，供 试品溶液色谱图中如有与对氨基苯甲酸保留时间 一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，不得过 标示量的1.2％。
盐酸丁卡因
H2N
CONHCH2CH2N(C2H5)2 . HCl
盐酸普鲁卡因胺
3
二、酰苯胺类药物的基本结构与典型药物
酰胺类：
R1 R3 NH R4 COR2
NHCOCH2N(C2H5)2 CH3 CH3
.
HCl
盐酸利多卡因
4
二、酰苯胺类药物的基本结构与典型药物
O CH3COHN S O NHCOCH3
COOCH2CH2N(C2H5)2 10
鉴别试验Байду номын сангаас
苯佐卡因
NH2 + NaNO2 + 2HCl COOC2H5
COOC2H5 N2+Cl-
+ NaCl + 2H2O
OH
N2+Cl+ COOC2H5
11
N
OH + NaOH
N + NaCl + H2O
COOC2H5
芳仲胺基：可以发生亚硝酸钠反应
NHC4H9 + NaNO2 HCl
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盐酸罗哌卡因注射液
【鉴别】(1)取本品适量，用0.01mol／L盐酸
溶液稀释制成每1ml中约含盐酸罗哌卡因
0.3mg的溶液，照紫外-可见分光光度法(附录
ⅣA)测定，在262nm的波长处有最大吸收，在
270nm的波长处有一肩峰。
31
六、色谱
(一) TLC
(二) HPLC
32
盐酸氯普鲁卡因
【鉴别】 (1) 取本品0.2g，加水20ml
溶解后，取溶液2ml，加硫酸铜试液0.2ml与碳 酸钠试液1ml，即显蓝紫色；加三氯甲烷2ml， 振摇后放置，三氯甲烷层显黄色。
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盐酸利多卡因在酸性溶液中与氯化钴试液作用， 生成亮绿色钴盐沉淀。
CH3 NHCOCH2N(C2H5)2 + CoCl2 CH3
来源：水解反应（制备时） 可进一步脱羧为苯胺，又可被氧化为有色物，使注射液 变黄、疗效下降、毒性增加。
H2N COOH CO2 H2N [O] O O
限度：0.5%（原料药）1.2%（注射液） 检查方法：HPLC
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盐酸普鲁卡因
对氨基苯甲酸 取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释 制成每1ml中含0.2mg的溶液，作为供试品溶液；另取 对氨基苯甲酸对照品，精密称定，加水溶解并定量制成每 1ml中含1μg的溶液，作为对照品溶液；取供试品溶液 1ml与对照品溶液9ml混合均匀，作为系统适用性试验 溶液。照高效液相色谱法(附录Ⅴ D)试验，用十八烷基 硅烷键合硅胶为填充剂；以含0.1％庚烷磺酸钠的 0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH值至3.0)甲醇(68:32)为流动相；检测波长为279nm。取系统 适用性试验溶液10μl，注入液相色谱仪，理论板数按对 氨基苯甲酸峰计算不低于2000，盐酸普鲁卡因峰和对氨 基苯甲酸峰的分离度应大于2.0。供试品溶液色谱图中如 有与对氨基苯甲酸峰保留时间一致的色谱峰，按外标法以 峰面积计算，不得过0.5％。
第八章 对氨基苯甲酸酯和酰苯胺 类局麻药物的分析
1
第一节
对氨基苯甲酸酯类和酰苯胺类 药物的结构与性质
2
一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与典型药物
R1NH
NH2
NH2
C O
OR2
HCl COOCH2CH2N(C2H5)2
NHC4H9 HCl
COOC2H5
COOCH2CH2N(CH3)2
苯佐卡因
盐酸普鲁卡因
盐酸利多卡因在碳酸钠试液中，与硫酸铜反应生成蓝紫色 配位化合物，转溶于氯仿中呈黄色。
与盐酸普鲁卡因、盐酸丁卡因和苯佐卡因相区别
CH3
CH3 NHCOCH2N(C2H5)2 + Cu2+ CH3
NCOCH2N(C2H5)2 CH3 Cu H3C (C2H5)2NCH2CON
14
H3C
盐酸利多卡因
39
二、盐酸氯普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物的检查
注射液在一定灭菌温度、时间和溶液pH 下，发生水解反应，生成4-氨基-2-氯苯甲
酸降解产物。
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盐酸氯普鲁卡因
4-氨基-2-氯苯甲酸 取本品适量，精密称定， 加水制成每1ml中含1mg的溶液作为供试品溶液 另精密称取4-氨基-2-氯苯甲酸对照品适量，加 水使成每1ml中含10μg的溶液作为对照品溶液。 照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录 Ⅴ D)试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂， 0.05mol/L柠檬酸-乙腈-水(68:12:20)为流 动相，波长为254nm。4-氨基-2-氯苯甲酸峰 与主成分峰的分离度应大于5.0，理论板数按盐 酸氯普鲁卡因计算应不低于2000。按外标法计 算，含4-氨基-2-氯苯甲酸不得大于1.0%。
钠溶液10ml溶解后，加25％硫氰酸铵溶液1ml，
即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80℃
干燥，依法测定(附录Ⅵ
C)，熔点约为131℃。
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五、吸收光谱特征
（一）UV
盐酸布比卡因在0.01mol/L HCl%中 0.40mg/ml
λmax=263nm、 A263=0.53-0.58 (二)IR λmax=271nm； A271=0.43-0.48
19
三、水解产物反应——酯键
1. 盐酸普鲁卡因的鉴别方法
鉴别试验
取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10％
氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，
变为油状物；继续加热，发生的蒸气能使湿润的
红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放 冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。
20
三、水解产物反应——酯键