药物分析第(8)章

H2N
COO(C2H5)2 + NaOH
H2N
COONa + CH3CH2OH
CH3CH2OH+ 4I2 + 6NaOH
22
CHI3 + 5NaI + HCOONa + 5H2O
四、 制备衍生物测熔点 1. 三硝基苯酚衍生物的制备： 利多卡因和布比卡因
NHCOCH2N(C2H5)2 O N 2 CH3
醋氨苯砜
CH3 NHCO CH3 C4H9 N
.
HCl
盐酸布比卡因
5
三、主要理化性质
1. 芳伯氨基特性: 显重氮化-偶合反应; 与芳醛缩合 成Schiff碱的反应；易氧化变色 。(盐酸丁卡因， 无) 2. 水解性：因分子结构中有酯键。 3. 弱碱性：能与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应；在 非水溶剂中能滴定。
28
注射用盐酸丁卡因

(2)
取含量测定项下的溶液，照紫外-可见分光 A)测定，在227nm与310nm
光度法(附录Ⅳ
的波长处有最大吸收。
29
盐酸普鲁卡因胺注射液
【鉴别】
(1)
取本品适量，加水制成每1ml
中含盐酸普鲁卡因胺5μg的溶液，照紫外-可见 分光光度法(附录Ⅳ 长处有最大吸收。 A)测定，在280nm的波
【鉴别】 (1) 取本品0.2g，加水20ml
溶解后，取溶液2ml，加硫酸铜试液0.2ml与碳 酸钠试液1ml，即显蓝紫色；加三氯甲烷2ml， 振摇后放置，三氯甲烷层显黄色。
15
盐酸利多卡因在酸性溶液中与氯化钴试液作用， 生成亮绿色钴盐沉淀。
CH3 NHCOCH2N(C2H5)2 + CoCl2 CH3
CH3 NCOCH2N(C2H5)2 CH3 Co 16 H3C (C2H5)2NCH2CON H3C
2. 与汞离子反应
盐酸利多卡因的水溶液加硝酸酸化后，加硝酸
汞试液煮沸，显黄色。 对氨基苯甲酸酯类药物显红色或橙黄色。 用于区别
17
3. 羟肟酸铁盐反应
基于普鲁卡因胺分子中的 芳酰胺结构。
NH2
OH
NO2 NO2
H3C
.
熔点为228℃～232℃
23
2. 硫氰酸盐衍生物的制备 盐酸丁卡因
NHC4H9 NH4SCN COOCH2CH2N(C2H5)2.HCl COOCH2CH2N(C2H5)2 . HSCN 熔点为131℃ NHC4H9
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盐酸丁卡因
【鉴别】 (1) 取本品约0.1g，加5％醋酸
芳伯氨基或潜在的芳伯氨基 生成重氮盐可与碱性β-萘酚偶合生成有
色ห้องสมุดไป่ตู้偶氮染料。
盐酸丁卡因无此反应，可鉴别。
9
盐酸普鲁卡因
NH2 + NaNO2 + HCl COOCH2CH2N(C2H5)2 HO NaOH OH N=N + NaCl + H2O N2Cl + NaCl + H 2O COOCH2CH2N(C2H5)2
41
盐酸氯普鲁卡因
二甲苯 取二甲苯1滴(约20mg)，精密称定， 置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，精密 量取5ml置10ml量瓶中，用水稀释至刻度作为 对照品溶液；另取本品0.25g，精密称定，置 10ml带塞试管中，精密加入水5ml使溶解，作 为供试品溶液。照气相色谱法(中国药典2000年 版二部附录Ⅴ E)检查，以10%聚乙二醇 (PEG)20M和3.5%二甘油(DG)混合为固定相， 氢火焰离子化检测器(FID)。柱温95±5℃。分 别精密吸收上述对照品溶液和供试品溶液各2～ 3μl注入色谱仪，用外标法计算，供试品中二甲 苯的残留量不得超过0.1%。
【鉴别】(2)取本品与盐酸氯普鲁卡因对照品适量， 分别用水制成每1ml中含8mg的溶液；照薄层色谱 法(中国药典2000年版二部附录Ⅴ B)试验，吸取 上述两种溶液各3μl，分别点于同一硅胶GF254薄 层板上，氨熏15分钟，以氯仿-甲醇(70:4)为展开 剂，展开后，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。 供试品溶液所显主斑点的颜色和位置应与对照品溶 液的主斑点相同。
42
三、盐酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯胺及其他杂质的 检查 生产和贮藏过程水解产生2,6-二
甲基苯胺
检查方法：HPLC
43
盐酸利多卡因
2，6-二甲苯胺 取本品适量，加流动相溶解并制成每 1ml中含5mg的溶液，作为供试品溶液(临用新制)；另 取2,6-二甲苯胺盐酸盐适量，精密称定，加流动相溶解 并定量稀释制成每1ml中含2，6-二甲苯胺0.5μg的溶 液，作为对照溶液；取2，6二甲苯胺盐酸盐和盐酸利多 卡因各适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中均约含 50μg的溶液，作为系统适用性试验溶液。照含量测定项 下的色谱条件试验，唯检测波长改为230nm，取系统适 用性试验溶液20μl注入液相色谱仪，证录色谱图，2， 6-二甲苯胺峰与利多卡因峰的分离度应符合规定。供试 品溶液色谱图中如显2，6-二甲苯胺峰，其峰面积不得大 于对照溶液中2，6-二甲苯胺峰的面积(0.01％)。
COOCH2CH2N(C2H5)2 10
鉴别试验
苯佐卡因
NH2 + NaNO2 + 2HCl COOC2H5
COOC2H5 N2+Cl-
+ NaCl + 2H2O
OH
N2+Cl+ COOC2H5
11
N
OH + NaOH
N + NaCl + H2O
COOC2H5
芳仲胺基：可以发生亚硝酸钠反应
NHC4H9 + NaNO2 HCl
26
盐酸布比卡因
【鉴别】 (1) 取本品，精密称定，按干燥 品计算，加0.01mol/L盐酸溶液溶解并定量稀 释制成每1ml中约含0.40mg的溶液，照紫外可见分光光度法(附录Ⅳ A)测定，在263nm 与271nm的波长处有最大吸收；其吸光度分别 为0.53～0.58与0.43～0.48。
(2) 本品的红外光吸收图谱应与对照品的图谱 (光谱集324图)一致。
33
盐酸利多卡因注射液

【鉴别】
(2)
在含量测定项下记录的色
谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品 溶液主峰的保留时间一致。
34
盐酸布比卡因注射液

【鉴别】
(1)
在含量测定项下记录的色谱
图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶 液主峰的保留时间一致。
35
第三节 特殊杂质与检查
36
一、盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查
39
二、盐酸氯普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物的检查
注射液在一定灭菌温度、时间和溶液pH 下，发生水解反应，生成4-氨基-2-氯苯甲
酸降解产物。
40
盐酸氯普鲁卡因
4-氨基-2-氯苯甲酸 取本品适量，精密称定， 加水制成每1ml中含1mg的溶液作为供试品溶液 另精密称取4-氨基-2-氯苯甲酸对照品适量，加 水使成每1ml中含10μg的溶液作为对照品溶液。 照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录 Ⅴ D)试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂， 0.05mol/L柠檬酸-乙腈-水(68:12:20)为流 动相，波长为254nm。4-氨基-2-氯苯甲酸峰 与主成分峰的分离度应大于5.0，理论板数按盐 酸氯普鲁卡因计算应不低于2000。按外标法计 算，含4-氨基-2-氯苯甲酸不得大于1.0%。
27
盐酸氯普鲁卡因
【鉴别】 (1)取本品，加磷酸盐缓冲液(取磷酸 二氢钾13.61克，加水750ml使溶解，用氢氧 化钾溶液(1→180)调至pH4.5±0.1，加水稀 释至1000ml，即得)制成每1ml中约含10μg 的溶液，照分光光度法(中国药典2000年版二部 附录ⅣA)测定，在229nm与290nm的波长处 有最大吸收。 (4)本品的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一 致。
钠溶液10ml溶解后，加25％硫氰酸铵溶液1ml，
即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80℃
干燥，依法测定(附录Ⅵ
C)，熔点约为131℃。
25
五、吸收光谱特征
（一）UV
盐酸布比卡因在0.01mol/L HCl%中 0.40mg/ml
λmax=263nm、 A263=0.53-0.58 (二)IR λmax=271nm； A271=0.43-0.48
第八章 对氨基苯甲酸酯和酰苯胺 类局麻药物的分析
1
第一节
对氨基苯甲酸酯类和酰苯胺类 药物的结构与性质
2
一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与典型药物
R1NH
NH2
NH2
C O
OR2
HCl COOCH2CH2N(C2H5)2
NHC4H9 HCl
COOC2H5
COOCH2CH2N(CH3)2
苯佐卡因
盐酸普鲁卡因
盐酸利多卡因在碳酸钠试液中，与硫酸铜反应生成蓝紫色 配位化合物，转溶于氯仿中呈黄色。
与盐酸普鲁卡因、盐酸丁卡因和苯佐卡因相区别
CH3
CH3 NHCOCH2N(C2H5)2 + Cu2+ CH3
NCOCH2N(C2H5)2 CH3 Cu H3C (C2H5)2NCH2CON
14
H3C
盐酸利多卡因
30
盐酸罗哌卡因注射液
【鉴别】(1)取本品适量，用0.01mol／L盐酸
溶液稀释制成每1ml中约含盐酸罗哌卡因
0.3mg的溶液，照紫外-可见分光光度法(附录
ⅣA)测定，在262nm的波长处有最大吸收，在
270nm的波长处有一肩峰。
31
六、色谱
(一) TLC
(二) HPLC
32
盐酸氯普鲁卡因
19
三、水解产物反应——酯键
1. 盐酸普鲁卡因的鉴别方法
鉴别试验
取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10％
氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，
变为油状物；继续加热，发生的蒸气能使湿润的
红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放 冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。
20
三、水解产物反应——酯键
38
盐酸普鲁卡因注射液
【检查】 对氨基苯甲酸 精密量取本品适量， 用水定量稀释制成每1ml中含盐酸普鲁卡因 0.2mg的溶液，作为供试品溶液；取对氨基苯甲 酸对照品，精密称定，加水溶解并定量制成每 1ml中含2.4μg的溶液，作为对照品溶液。照盐 酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸项下的方法测定，供 试品溶液色谱图中如有与对氨基苯甲酸保留时间 一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，不得过 标示量的1.2％。
FeCl3
NH2
H2O2 CONHCH2CH2N(C2H5)2
NH2
Fe
CON(OH)CH2CH2N(C2H5)2 紫红，暗棕色，棕黑色 3
CON(OH)CH2CH2N(C2H5)2
18
盐酸普鲁卡因胺

【鉴别】
(1)
取本品0.1g．加水5ml，加三
氯化铁试液与浓过氧化氢溶液各1滴。缓缓加热至 沸，溶液显紫红色，随即变为暗棕色至棕黑色。
来源：水解反应（制备时） 可进一步脱羧为苯胺，又可被氧化为有色物，使注射液 变黄、疗效下降、毒性增加。
H2N COOH CO2 H2N [O] O O
限度：0.5%（原料药）1.2%（注射液） 检查方法：HPLC
37
盐酸普鲁卡因
对氨基苯甲酸 取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释 制成每1ml中含0.2mg的溶液，作为供试品溶液；另取 对氨基苯甲酸对照品，精密称定，加水溶解并定量制成每 1ml中含1μg的溶液，作为对照品溶液；取供试品溶液 1ml与对照品溶液9ml混合均匀，作为系统适用性试验 溶液。照高效液相色谱法(附录Ⅴ D)试验，用十八烷基 硅烷键合硅胶为填充剂；以含0.1％庚烷磺酸钠的 0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH值至3.0)甲醇(68:32)为流动相；检测波长为279nm。取系统 适用性试验溶液10μl，注入液相色谱仪，理论板数按对 氨基苯甲酸峰计算不低于2000，盐酸普鲁卡因峰和对氨 基苯甲酸峰的分离度应大于2.0。供试品溶液色谱图中如 有与对氨基苯甲酸峰保留时间一致的色谱峰，按外标法以 峰面积计算，不得过0.5％。
1. 盐酸普鲁卡因的鉴别方法
鉴别试验
NaOH
H2N
COONa + HOCH2CH2N(C2H5)2
H2N
COONa HCl
H 2N
21
COOH HCl
HCl H2N
COOH
鉴别试验
2. 苯佐卡因的鉴别方法 取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5ml，煮 沸，即有乙醇生成，加碘试液，加热，即生成黄 色沉淀，并发生碘仿的臭气。
ON NC4H9 + NaCl + H 2O COOCH2CH2N(CH3)2
COOCH2CH2N(CH3)2
盐酸丁卡因
12
乳白色
苯佐卡因
(3)
本品显芳香第一胺类的鉴别反应(附录Ⅲ)。
盐酸普鲁卡因
(4)
本品显芳香第一胺类的鉴别反应(附录Ⅲ)。
13
二、与重金属离子反应
1. 与铜及钴离子反应 芳酰胺
盐酸丁卡因
H2N
CONHCH2CH2N(C2H5)2 . HCl
盐酸普鲁卡因胺
3
二、酰苯胺类药物的基本结构与典型药物
酰胺类：
R1 R3 NH R4 COR2
NHCOCH2N(C2H5)2 CH3 CH3
.
HCl
盐酸利多卡因
4
二、酰苯胺类药物的基本结构与典型药物
O CH3COHN S O NHCOCH3
6
三、主要理化性质
4. 溶解性：游离碱难溶于水，可溶于有机溶剂；盐 酸盐易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。 5. 与重金属离子（铜离子或钴离子）发生沉淀反应： 生成有色的配位化合物沉淀。 6. 吸收光谱特性：苯环及相应的取代基与脂烃胺侧 链，具紫外与红外光谱行为。
7
第二节 鉴别试验
8
一、重氮化-偶合反应