土壤指标的测定方法

一、土壤全氮的测定—凯氏定氮法

一、目的

1、掌握土壤中全氮含量测定的方法。

2、了解测定土壤全氮的原理

二、原理

土壤中的氮大部分以有机态（蛋白质、氨基酸、腐殖质、酰胺等）存在，无机态（NH+、NO3 -、NO2 -）含量极少，全氮量的多少决定于土壤腐殖质的含量。

土壤中含氮有机化合物在还原性催化剂的作用下，用浓硫酸消化分解，使其中所含的氮转化为氨，并与硫酸结合为硫酸铵。

给消化液加入过量的氢氧化钠溶液，使铵盐分解蒸馏出氨，吸收在硼酸溶液中，最后以甲基红-溴甲酚绿为指示剂，用标准盐酸滴定至粉红色为终点，根据标准盐酸的用量，求出分析样品中的含氮全量。

三、试剂：

1、混合催化剂：称取硫酸钾100g、五水硫酸铜10g、硒粉1g。均匀混合后研细。贮于瓶中。

2、比重1.84浓硫酸。

3、40%R氧化钠：称400g氢氧化钠于烧杯中，加蒸馏水600ml，搅拌使之全部溶解。

4、2%硼酸溶液：称20g硼酸溶于1000ml水中，再加入2.5ml混合指示剂。（按体积比100:0.25 加入混合指示剂）

5、混合指示剂：称取溴甲酚绿0.5g和甲基红0.1克，溶解在100ml95%勺乙醇中，用稀氢氧化钠或盐酸调节使之呈淡紫色，此溶液pH应为4.5。

6、0.01的盐酸标准溶液：取比重1.19的浓盐酸0.84ml，用蒸馏水稀释至1000ml，用基准物质标定之。

四、操作步骤

1、消煮：在分析天平上准确称取通过60号筛的风干土0.5000g左右，移入干燥的凯氏瓶中，加入1.5g的还原性混合催化剂。用注射器加入4ml浓硫酸，放到通风柜内的消煮器上消煮 1.5h 左右。直至内容物呈清彻的淡蓝色为止。

2、蒸馏：消煮完毕后冷却。

将三角瓶置于冷凝管的承接管下，管口淹没在硼酸溶液中（三角瓶用2%勺硼酸20ml作吸收剂），然后打开冷凝器中的水流，进行蒸馏。在整个蒸馏过程中注意冷凝管中水不要中断，当接受液变蓝后蒸馏5min, 将冷凝管下端离开硼酸液面，再用蒸馏水冲净管外。

3、滴定：用0.01 当量的盐酸标准溶液滴定至红色为止。记录所消耗的盐酸标准溶液的体积。

4、空白：除不加试样外其余步骤完全相同。

五、计算：

土壤含氮量（%）=（V-V0）*N*0.014*100/W

V-滴定试样时消耗的盐酸标准溶液体积，ml。V o -滴定空白时消耗的盐酸标准溶液体积，

ml。N-盐酸标准溶液的当量浓度。W土壤样品重，g。0.014-氮的毫克当量。

二土壤全磷的测定

一、目的

1. 掌握土壤全磷的测定方法。

2. 了解氢氧化钠碱熔-钼锑抗比色法测土壤全磷的原理。

二、原理样品经强碱高温熔融分解后，使不溶态磷转变成可溶态。然后用稀硫酸溶解熔块，最后用钼锑抗比色法测定。

在一定酸度和三价锑离子存在下，磷酸与钼酸铵形成锑磷钼混合杂多酸，由于锑磷钼杂多酸在常温下（20-60 °C ）易为抗坏血酸还原为磷钼蓝，使显色速度加快。磷含量高颜色则深，因而可用比色法测定磷的含量。

三、试剂

1. 钼锑贮存液：180.6ml分析纯浓硫酸，边搅拌边缓缓加入到400ml蒸馏水中，冷却。另称取分析纯钼酸铵20克溶于约60C的300ml蒸馏水中,冷却。然后，将硫酸溶液缓缓到入钼酸铵溶液中，不断搅拌，再加100ml0.5%酒石酸锑钾溶液，冷却后，用蒸馏水稀释至1000ml,摇匀，贮于棕色试剂瓶中。（6.5N硫酸的钼锑贮存液）

2. 钼锑抗显色剂：于100ml钼锑贮存液中加入1.5g （左旋）抗坏血酸，此试剂有效期24小时，宜配前使用。

3. 9N的硫酸溶液：用量筒量取250ml浓硫酸，缓缓加入到750ml蒸馏水中，不断搅拌，冷却，稀释到1000ml.

4. 0.2%的2, 6-二硝基酚指示剂：称取0.2克指示剂溶于100ml蒸馏水中。

5. 4%的NaO H溶液

6. 2%H2SO4 溶液

7. 磷标准贮存液：称取经105C烘2h的分析纯磷酸二氢钾0.4390克（105C烘2h），溶于200ml 蒸馏水中，加入5ml浓H2SO4，转入1000ml容量瓶中，定容，摇匀。此溶液为含磷

100mg/L 的溶液。

8. 磷标准溶液：吸取50ml磷标准贮存溶液（100mg/L）于1000ml容量瓶中，稀释至刻度，即为含磷5mg/L的磷标准溶液。（此溶液有效期只有半年）

三、操作步骤

1. 待测液的制备:

（1）称样：称取通过孔径为0.149mm筛的风干或烘干样品0.2-0.3g精确到0.0001g）于镍坩埚底部（切勿粘在壁上），用95%乙醇稍湿润样品，力卩1.5g固体NaOH于坩埚底部铺平。坩埚盖⑵熔样：将坩埚置于高温电炉内，使电炉逐渐升温至300-400 °C之间，使电炉断电，加热

15 分钟。再继续升温至720C。加热15分钟。使电炉断电，取出冷却，加入5-10ml蒸馏水，放入70-80C中加热约30分钟。取出置于加热使熔块溶解，取下冷却。

⑶转移：用7ml 9NH2SO4及少量的蒸馏水将坩埚内熔物移入50ml容量瓶中加入5滴1:1HCI 用蒸馏水稀释至刻度。摇匀后静置澄清备用。此即为全磷的待测液。

2. 比色：

⑴吸取清液5ml于50ml容量瓶中，加2, 6—二硝基酚指示剂2滴，用4%NaOH调节溶液至黄色，再用2% H2SO4溶液调节至近无色。加入5ml钼锑抗显色剂。以蒸馏水稀释至刻度，于25—40C放置30分钟。在分光光度计上于波长660nm处进行比色。

（2）磷标准曲线的绘制：吸取磷标准溶液（5mg/L）0，1，2，3，4，5，6ml分别置于7个50ml 容量瓶中，加入5ml钼锑抗显色剂，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。放置30分钟，与试样一同比色。标液的浓度分别为0, 0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6 pg/ml。在坐标纸上以P（血/ml）为横坐标，吸光度为纵坐标。绘制工作曲线。

四、结果计算

P%=[ppm*Vp*（V总/V"*100%]/W/10 6式中：ppm —从工作曲线上查得ppm 数，pg/ml。V p —比色时定容体积，ml。

V总一待测原液体积，ml。

V1 —吸取待测原液体积，ml。

W—风干样重，g。

106—将微克换算成克。

五、注意事项

1. 用氢氧化钠熔融样品时一般要从低温开始，待逐渐脱水后才能高温加热。

2. 氢氧化钠熔块不能用沸水提取，否则会造成激烈的沸腾，使溶液溅失，只有在80 C左右使其溶解后再煮沸几分钟，这样提取更加完全。

3. 比色时要注意将比色皿的透光面搽拭干净。