梭菌属

消除皱纹
在治疗过程中，医生们发现它在消除皱 纹方面有着异乎寻常的功能，其效果远远 超过其他任何一种化妆品或整容术。 因此，利用肉毒杆菌毒素消除皱纹的整 容手术应运而生，并因疗效显著而在很短 的时间内就风靡整个美国。
Botox
目前这种“毒素去皱”剂已经上市，由 爱尔兰一家制药公司制造，取名为“Botox” 和“Myobloc”。价格也很便宜：每剂300至 500美元。
手术简单
将少量稀释过的肉毒杆菌毒素注入人体， 毒素将在24至48小时内发挥作用，使面部肌 肉暂时麻痹和停止收缩，从而达到拉紧面 部皮肤，消除面部皱纹的目的。但要想一 直保持面部光滑无皱纹，只打一针是不够 的，因为毒素将慢慢失去效用。人们需要 每4个月左右到医院去打上一支“毒针”才 能常葆青春。
危险性
临床上最常见的无芽胞厌氧菌分离株
生化武器
军队常常将这种毒素用于生化武器。人 们食入和吸收这种毒素后，神经系统将遭 到破坏，出现头晕、呼吸困难和肌肉乏力 等症状。
治疗面部痉挛
科学家和美容学家正是看中了肉毒杆菌 毒素能使肌肉暂时麻痹这一功效。 医学界原先将该毒素用于治疗面部痉挛 和其他肌肉运动紊乱症，用它来麻痹肌肉 神经，以此达到停止肌肉痉挛的目的。


致病因子


对氧敏感的破伤风溶血毒素(tetanolysin) 质粒编码的破伤风痉挛毒素(tetanospasmin)
属神经毒(neurotoxin)， 毒性极强(对人致死量<1µg) 蛋白质，不耐热

破伤风痉挛毒素

结构
菌体：一条多肽 释出菌体：轻链（A链）-S-S-重链（B链） B链：神经节苷脂结合的单位 A链：毒性作用

破伤风痉挛毒素（tetanospasmin)：
由大质粒编码，毒素对脊髓前角细胞和 脑干细胞有高度的亲和力，毒性极强 （<1ug)，不耐热，可被蛋白酶破坏。 组成有：
B链（重链）：结合神经细胞、运转毒素分子。
与运动神经元外胞质膜上受体结合；毒素— 细胞小泡—运动神经元—传入神经末梢—中枢神 经系统；重链N端—膜转位—轻链—胞质。
微生物学检查法

直接涂片镜检
深部创口取材涂片 革兰阳性大杆菌 白细胞少且不典型 伴有其他杂菌 早期诊断可避免病人最终截肢或死亡


分离培养及动物实验
接种血平板或庖肉培养基，镜检及生化反应鉴定 动物实验 如怀疑食物中毒，在发病后一日内，检出大于105 病菌/克食品或106病菌/克粪便可确立诊断
厌氧菌

根据是否形成芽孢，分为 芽孢厌氧菌:厌氧芽胞梭菌属 无芽胞厌氧菌
厌氧菌感染的普遍性和重要性

普遍性 口腔,阴道和泌尿生殖道 20-28% 创伤感染 88% 败血症 20%
重要性 过去忽略厌氧菌的检验 目前发现厌氧菌是感染的重要致病菌之一

感染的原因
1 组织氧张力或氧化还原电势降低. 2 需氧菌或兼性厌氧菌混合感染 消耗O2 提供营养物质 3 机体免疫功能下降
毒力测定：取已判定含有肉毒毒素的检样离心上 清液，用明胶磷酸盐缓冲液做成50倍、 500 倍 及 5000 倍的稀释液， 分别注射小白鼠2 只， 每 只0.5 mL，观察4 d。根据动物死亡情况，计算检 样所含肉毒毒素的大体毒力（MLD/mL 或 MLD/g） 。例如：5 倍、50 倍及 500 倍稀释致 动物全部死亡，而注射 5000 倍稀释液的动物全部 存活，则可大体判定检样上清液所含毒素的毒力 为 1000～10000MLD/mL。

肉毒梭菌是致死性最高的病原体之一。感 染剂量极低，每个人都易感。摄食18-36小 时后发病为典型病症，但不典型的可在4小 时至8天不等。症状为虚弱、眩晕、伴随视 觉成双、渐进性说话障碍、呼吸和吞咽困 难。也许会出现腹胀和便秘。毒素最终引 起麻痹，呈渐进对称性、自上到下肉毒梭 菌在自然界的分布上具有某种区域性差异， 显示出生态上的差别倾向。

防治原则

预防
及时处理伤口，破坏和消除厌氧微环境 预防性的使用抗生素


治疗
局部感染的处理 抗生素 α抗毒素 高压氧舱法

三、肉毒梭菌（C．botulinum）



芽胞椭圆形，粗于菌体，位于次极端，呈 汤匙状或网球拍状 神经毒素分A~G 8个型，各型毒素只能被同 型抗毒素中和 肉毒毒素不耐热，煮沸1分钟即可被破坏

致病物质

α 毒素
以A型产生量最大 引起血管通透性增加伴大量溶血、组织坏死、 肝脏、心功能受损 血小板凝聚，血栓形成，局部组织缺血，在气 性坏疽的形成中起主要作用


β 、ຫໍສະໝຸດ Baidu 、ι 毒素

引起坏死损伤和血管通透性增加
肠毒素
所致疾病

气性坏疽
•食物中毒
气性坏疽(Gas gangreneGas gangrene)
意大利研究人员通过动物实验发现，肉 毒杆菌分泌的Ａ型毒素，也就是美容除皱 注射剂Ｂｏｔｏｘ的主要成分，被注射入 皮肤后可能还会进入中枢神经系统，甚至 抵达脑干。这一发现使肉毒杆菌毒素除皱 的安全性问题再次引起人们关注。
四、 艰难梭菌（C．difficile）

新生儿肠道中正常菌群 因长期使用抗生素引起
第十九章 梭菌属
严格厌氧菌，革兰阳性 芽胞比菌体粗，菌体膨大呈梭状， 抵抗力强 周鞭毛，无荚膜（除产气荚膜梭菌外） 致病菌产生外毒素致病，病情严重 防治：类毒素与抗毒素

一、破伤风梭菌（C．tetani）
破伤风（tetanus）的病原菌 形态与染色 革兰阳性杆菌，菌体细长，芽胞正圆，位于菌 体顶端，使细菌呈鼓槌状 培养特性和生化反应 血平板上，有β 溶血
二、 产气荚膜梭菌
(C．perfringens )



两端平切粗大杆菌 芽胞位于次极端，呈椭圆形，不大于菌体 无鞭毛 体内有明显的荚膜

生长迅速，代谢活跃，45℃生长最好 血琼脂平板：双层溶血环 内环完全溶血-θ 毒素 外环不完全溶血- α 毒素 蛋黄琼脂平板：Nagler反应 牛奶培养基：“汹涌发酵” （stormy fermentation）

致病性

产生A、B两种毒素，即肠毒素和细胞毒素 因长期使用抗生素导致菌群失调后可引起 内源性感染或院内交叉感染
临床表现：假膜性肠炎


第二十章 无芽胞厌氧菌

正常菌群，包括革兰阳性和革兰阴性 的球菌和杆菌 在某些特定状态下，作为条件致病菌 导致内源性感染

常见的致病菌

G-杆菌：脆弱类杆菌(B．fragilis)

所致疾病

食物中毒

进食污染食物（多为罐头、肉制品、豆制品）发生食 物中毒---食入毒素 临床表现：少见胃肠道症状，主要为神经末梢麻痹 （松驰型）


婴儿肉毒病


以6个月以内的小婴儿居多 症状与肉毒食物中毒类似，便闭、吸乳、啼哭无力
肉毒毒素流行病学



肉毒中毒是由于误食含有肉毒毒素的食品而引起的纯粹的 细菌毒素食物中毒。人的肉毒中毒发生并不多，但是发病 急、病程发展快、病死率高。肉毒中毒是毒素中毒，潜伏 期较短，一般为6至36小时，最长60小时。主要症状有：视 力减弱、全身无力、伸舌和张口困难、抬头费力、瞳孔散 大、呼吸麻痹等。 重症患者，如果不及时治疗和抗毒素特异治疗，多在2 至4天死亡。肉毒梭菌生长和产毒的最适温度是25至30℃， 而在人的体温条件下细菌表现为丝状，几乎不能产毒、芽 胞也不会发芽。 肉毒中毒一年四季均可发生，发病主要与饮食习惯有 着密切关系。欧美国家主要的中毒是由于肉类食品、罐头 食品引起；日本等沿海国家主要的中毒是由于进食水产品 引起；我国内地的中毒主要是由于进食发酵食品（如：臭 豆腐、豆瓣酱、豆豉等）引起的。
与美容界的一片喝彩声正相反，美国食品和药 品管理局一直对这种“用毒药来美容”的做法表 示震惊和强烈反感。它指出，将“Botox”这种有 毒物质注射人体是十分危险的。可随着人们对 “Botox”去皱手术的日益热衷，美国食品和药品 管理局也在考虑改变初衷，允许“Botox”用于美 容。据预测，如果“Botox”获准进入美容界，其 火爆程度将不亚于伟哥。



严格厌氧，营养要求不高，可在普通平板 上生长，形成直径为3-5mm、不规则、灰白 色半透明的菌落； 在血平板有β溶血； 能消化肉渣，使之变黑，有腐败恶臭
致病性

致病物质
肉毒毒素
剧毒（对人致死量为0.1µg)
作用机制

作用于外周神经肌肉接头处，抑制外周神 经介质乙酰胆碱的释放，导致弛缓性麻痹 前体分子存在，可稳定存在于外环境和胃 肠道。复合物进入小肠后，在碱性情况下 解离，被吸收进入血循环
微生物学检查法

标本
食物中毒患者：食物 婴儿肉毒病患者：粪便 粪便、食物等标本可先80°C加热10分钟，再 厌氧培养 毒素检查

肉毒毒素检测以小白鼠腹腔注射法为标准方法。
检出试验：取上述离心上清液及其胰酶激活处理液分 别注射小白鼠 2只，每只0.5 mL，观察4 d。注射液中若有 肉毒毒素存在，小白鼠一般多在注射后 24 h 内发病、死 亡。主要证状为竖毛，四肢瘫软，呼吸困难，呼吸呈风箱 式，腰部凹陷，宛若蜂腰，最终死于呼吸麻痹。 如遇小鼠猝死以至症状不明显时，则可将注射液做适 当稀释，重做试验。 确证试验：不论上清液或其胰酶激活处理液，凡能致 小鼠发病、死亡者，取样分成3 份进行试验，1份加等量多 型混合肉毒抗毒诊断血清，混匀，37℃作用30 min，1份加 等量明胶磷酸盐缓冲液，混匀，煮沸10 min；1份加等量明 胶磷酸盐缓冲液，混匀即可，不做其他处理。3 份混合液 分别注射小白鼠各 2只， 每只 0.5ml,观察4d,若注射加诊断 血清与煮沸加热的2 份混合液的 2份混合液的小白鼠均获 保护存活， 而唯有注射未经其他处理的混合液的小白鼠 以特有症状死亡，则可判定检样中有肉毒毒素存在，必要 时要进行毒力测定及定型试验。
可能是厌氧菌感染的症状或体征
1.Foul-smelling discharge腐臭味排除物 2.Gas in the tissue有气体在组织中 3.Necrotic tissue坏死组织
实验室检查
1.留取适当的标本:blood,pleural fluid (痰,粪便不适合) 2.迅速在厌氧条件下培养 厌氧培养盒

典型症状
苦笑面容 角弓反张 其他

免疫性
破伤风免疫属外毒素免疫， 主要是抗毒素发挥中和作用 抗毒素人工免疫

微生物学检查法

一般不进行涂片镜检和分离培养 典型的症状和病史即可作出诊断

防治原则




防止创口厌氧微环境的形成 特异性预防：注射破伤风类毒素 紧 急 预 防 ： 注 射 破 伤 风 抗 毒 素 （ tetanus antitoxin，TAT） 特异性治疗：早期足量抗毒素及抗生素
防治原则

加强食品卫生管理和监督，提高防范意识 （低温保存食物，高温破坏毒素） 尽早根据症状作出诊断，迅速注射A、B、E 三型多价抗毒素，同时加强护理和对症治 疗


肉毒梭菌广泛存在于自然界，引起中毒的 食品有腊肠、火腿、鱼及鱼制品和罐头食 品等。在美国以罐头发生中毒较多，日本 以鱼制品较多，在我国主要以发酵食品有 关，如臭豆腐、豆瓣酱、面酱、豆豉等。 其它也引起中毒的食品还有：熏制未去内 脏的鱼、填馅茄子、油浸大蒜、烤土豆、 炒洋葱、蜂蜜制品等。
A链（轻链）：毒性部分，为锌内肽酶。 裂解储存有抑制性神经介质（r-氨基丁酸、甘 氨酸）小泡上膜蛋白特异性肽键，阻止抑制性神 经介质的释放，使运动神经元持续兴奋，导致骨 骼肌强烈痉挛。肌肉活动的兴奋与抑制失调，屈 肌、伸肌同时收缩，出现破伤风症状。
所致疾病：
破伤风表现为肌肉麻痹性痉挛，咀嚼肌 痉挛（苦笑面容、牙关紧闭），颈及背肌 持续痉挛（角弓反张、四肢痉挛），呼吸 肌痉挛（窒息死亡，死亡率20%）。


专性厌氧培养，菌落呈菌膜状爬行生长物， 有β溶血；液体培养基中混浊变黑。

抵抗力
芽胞抵抗力很强 75~80℃ 10min仍保持活力 在干燥的土壤和尘埃中可存活数年

致病条件

伤口需形成厌氧微环境
伤口窄而深（如刺伤），有泥土或异物污染 大面积创伤、烧伤，坏死组织多，局部组织缺血 有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染的伤口 无侵袭力，仅在局部繁殖，外毒素致病