几种常用的染色方法

几种常用的染色方法

一、美兰染色法

在已染色、固定好的抹片上，滴加适量的（足够覆盖涂抹点即可）美兰染色掖，经1—2分钟，水洗，干燥（可用吸水纸吸干，或自然干燥，但不能烤干），镜检。

二、革兰氏染色法

1、在已干燥、固定好的抹片上，滴加草酸铵结晶紫染色掖，经1—2分钟，水洗。

2、加革兰氏碘溶液于抹片上媒染，作用1—3分钟，水洗。

3、加95%酒精于抹片上脱色，约30秒至1分钟，水洗。

4、加稀释石炭酸复红（或沙黄水溶液）复染10—30秒，水洗。

5、吸干或自然干燥，镜检。

革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色。

三、抗酸染色法

1、萋—尼氏抗酸染色法：首先在已干燥、固定好的抹片上，滴加较多量的石炭酸复红染色液，在玻片下以酒精灯火焰微微加热至发生蒸气为度（不要煮沸），维持微微发生蒸气，经3—5分钟，水洗。

然后用3%盐酸酒精脱色，至标本无色脱出为止，充分水洗。

再用碱性美兰染色液复染约1分钟，水洗。

最后吸干，镜检。抗酸性细菌呈红色，非抗酸性细菌呈蓝色。

2、又法之一：滴加石炭酸复红液于抹片（在已干燥固定过的）上染1分钟，水洗；再用1%美蓝酒精溶液复染20秒，水洗，干燥，镜检。抗酸菌红色。镜检前对光检查染色片，

标本片务必全呈蓝色，如标本片呈现红色或棕色，表示复染不足，应在作复染5—10秒，再观察，如仍未全呈蓝色时，仍可反复复染，至符合要求为止。

四、瑞特氏染色法

1、抹片自然干燥后，滴加瑞特氏染色液于其上，为了避免很快变干，染色液可多加些，或者看情况补充滴加；经1—3分钟，再加约与染液等量的中性蒸馏水或缓冲液，轻轻晃动玻片，使与染液混匀，经5分钟左右，直接用水冲洗（不可先将染液倾去），吸干或烘干，镜检。细菌染成蓝色，组织、细胞等物呈其他颜色。

2、另一染色法：抹片自然干燥后，按涂抹点大小，盖上一块略大的清洁滤纸片，在其上轻轻滴加染色液，至略浸过滤纸，并看情况补滴，维持不使变干；染色3—5分钟，直接以水冲洗，吸干或烘干，镜检。此法的染色液经滤纸滤过，可大大避免沉渣粘附抹片上而影响镜检观察。

五、姬母萨氏染色法

1、于5毫升新煮过的中性蒸馏水中滴加5—10滴姬母萨氏染色液原液，即稀释成为常用的姬母萨氏染色液。

2、抹片经甲醇固定并干燥后，在其上滴加足量染色液或将抹片浸入盛有染色液的染色缸中，染色30分钟，或者染色数小时至24小时，取出水洗，吸干或烘干，镜检。细菌呈蓝青色，组织、细胞等呈其他颜色，视野常呈红色。

注：在进行各种染色时都应注意，当抹片滴上染色液后，不可直接将剩余染液倾去，应用水连染液一起冲洗去，然后进行下一步骤，以免发生沉渣粘附，影响染色效果。