乙脑病毒IgM检测-

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乙脑IgM抗体检测IgM捕获ELISA法
乙脑IgM抗体检测——IgM捕获ELISA法
A
原理
B
检测步骤
C
结果判定
D
注意事项
（以上海贝西试剂盒为例）
检测原理
利用包被在聚苯乙烯板上抗人IgM
u 链抗体，捕捉感染者标本中IgM抗体，
感染者体内抗乙脑IgM抗体与乙脑抗原 可以特异性结合，再通过标记有过氧化
测OD值前将微孔板底部的水吸干，避免OD值出现 负值或损坏滤光片。
02
03
3
乙脑IgM检测标本要求
源自文库
标本采集要求：
由医护人员采集血液和脑脊液标本，疾控监测人员流调 后，取回标本，由实验室人员于无菌条件下分离出血清。
01
02
血液标本要求尽快采集急性期血标本，第一份检测结果为阴 性时，于发病后3-4周采集恢复期血标本，每份采集4-5ml。
03
脑脊液标本也要求尽快采集，每份采集1-2ml 。
标本运送要求：
需采用冷藏装置尽快送至市级实验室，若当天不能送 至市级实验室，则需-20℃ 保存，最迟3天内送达。
标本检测要求：
由市级实验室开展血清及脑脊液变笨乙脑IgM抗体检测，检测 01 前需对标本进行分装保存2份于-70℃，一份用于开展检测，另 一份上送省级实验室进行复核检测及病原学检测。
5、洗板；
6、每孔加乙脑病毒抗原-酶联 合物混合物50ul。空白孔不加； 7、封板，置37℃温育1h； 8、洗板。最后一次洗板完毕后, 将孔内残余液滴在吸水纸上拍干；
9、每孔加入显色液A、B各一滴，混匀 后37℃避光反应10min； 10、每孔加入终止液一滴，在450nm处 测定各孔OD值。
结果判定
01
使用酶标比色计(检测波长450nm)， 空白孔较零，读取各孔OD值。
02
样品OD值/阴性对照OD值≥2.1为阳性，反之为阴性。
03
注：阴性对照OD值低于0.05作0.05计算， 高于0.05按实际OD值计算。
注意事项
01
加样时，按规定的量加到微孔板孔的下1/3处，应避免溅 出和产生气泡；加每份标本应更换吸嘴，避免交叉污染。 温育时，最好使用水浴法或湿盒法，避免产生边缘效 应；微孔板不可叠加放置。
02
样本分装及检测过程中严格按照生物安全要求操作。
THANKS
物酶的抗乙脑抗原抗体与底物结合并显
色而达到检测目的。 该方法的特点是特异、敏感、快速，
适用于早期快速诊断。
检测步骤
1、试剂盒平衡至室温； 2、脑脊液标本用生理盐水作1:10稀释； 血清标本用生理盐水作1:100稀释； 3、设空白、阴性、阳性对照各一孔； 相应孔中加入50ul稀释好的血清或脑脊 液标本及阴性阳性质控品； 4、封板，置37℃温育1h；
病例数 23
7.20-8.17
8.18 8.21 合计
81
26 11 141
80
18 11 132
79
26 11 124
159
44 22 256
二、省级实验室检测情况（截止8.21日）
表2 日期 1.1-7.19 7.20-8.17 8.18 8.21 合计 省级乙脑实验室检测情况
检测情况 收到 检测病 阳性病 阳性 病例数 例数 例数 率 血清 阳性 阳性 脑脊 阳性 阳性 份数 率 液 份数 率 23 81 26 11 141 23 81 26 -130 0 48 7 -55 0 46.2 % 26.9 % --23 80 18 11 132 0 48 7 --0 60% 38.9% --8 79 26 11 124 0 39 5 --0 49.4% 19.2% ---
内
容
01
2017年省级实验室乙脑病毒IgM检测情况； 乙脑IgM抗体检测——IgM捕获ELISA法；
02
03
乙脑IgM检测标本要求。
1
2017年省级实验室乙脑病毒IgM检测情况
一、省级实验室收样情况（截止8.21日）
表1 日期 1.1-7.19 省级乙脑实验室收样情况 样品数 血清 23 脑脊液 8 小计 31