第十四、十五、十六章

荧光模型
cANCA（PR3） pANCA （MPO）
pANCA （CG/LF/LYS）
相关疾病
韦格纳氏肉芽肿80-95% 微多动脉炎
韦格纳氏肉芽肿5-20% 微多动脉炎40—80% 溃疡性结肠40—80% 克罗恩病10-40% 系统性风湿病 原发性硬化性胆管炎 自身免疫性肝炎
（七）抗磷脂抗体(APLA)
PM、DM、弥漫 型PSS
ANA/ANA谱检测临床意义
荧光核型
抗核抗体 临床意义
核膜型
抗板层素抗体
或核孔复合物 (GP210)
1.自免肝 2.血细胞减少 3.血管炎
（三）类风湿因子及分型
【临床意义】 RF阳性见于
1）类风湿性关节炎 2）其它自身免疫性疾病 3）随着年龄的增长RF阳性率增加
RF 分型（IgM 、IgG、IgA、IgE） 与预后、相关临床症状、骨质破坏等有关
（四）抗角蛋白抗体
（五）抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体
• 可应用于早期RA的诊断（80%临床敏感性） • RA高度临床特异性诊断指标（特异性>97%） • 高预后价值：在侵蚀性和非侵蚀性RA之间具有很
好的鉴别能力 • 适用于RA筛检及指导临床治疗
（六）抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）
1.间接荧光免疫法检测总ANCA A.胞浆型ANCA（cytoplasmic ANCA，cANCA） B.核周型ANCA（perinuclear ANCA，pANCA）
(5)新生儿先天性心脏传导阻滞:
30-40%
5.抗Scl-70抗体
Scl-70抗原为为100kD DNA拓扑异构酶I [临床意义] 见于25-75％的弥散型 PSS
5.1抗着丝点抗体 靶抗原为着丝粒蛋白A,B,C [临床意义] 局限型PSS阳性率为70-90%
（一）ENA谱常见检查项目
6.抗Jo-1抗体 Jo-1靶抗原是组胺酰-tRNA 合成酶 [临床意义]
ANA/ANA谱检测临床意义
荧光核型
均质型
抗核抗体 dsDNA
临床意义
SLE：70-90%
抗组蛋白抗体 抗核小体抗体
SLE：50-70% DIL： 95%
SLE：97-99%
ANA/ANA谱检测临床意义
荧光核型 抗核抗体
临床意义
颗粒型
Sm nRNP SSA
SSB
SLE特异性99%
MCTD：95-100 ％ SLE： 30-40％
Jo-1抗体是肌炎(伴肺纤维化) 诊断以及疗效观察的一项有意义 的指标，阳性率为25-35％
7.抗核糖体P蛋白抗体(抗rRNP抗体) 靶抗原是核糖体60S亚单位的3个蛋白： P0, P1, P2。
[临床意义] • 主要见于活动期SLE，
阳性率在10%～20% • 抗rRNP抗体与抗dsDNA抗体的消长平行，
自身免疫性肝病自身抗体
• 抗平滑肌抗体（SMA） • 抗肝-肾微粒体抗体（抗LKM1） • 抗肝细胞质抗原I型（抗LC1） • 抗可溶性肝抗原抗体（抗SLA） • 抗线粒体抗体（AMA） • 抗中性粒细胞胞浆抗体（pANCA）
自身免疫性肝病自身抗体
抗肝-肾微粒体抗体（抗LKM1）
靶抗原是细胞色素P450蛋白， 分子量为50KD [临床意义] • II型AIH血清特异性抗体 • ＨＣＶ患者中约2-10%阳性
【临床意义】
IgG IgA IgM IgE ↑ ↑↑ ↑ ↑ NN N N↑N N NN↑ N NNN ↑ ↓↓ ↓ ↓
疾病 慢性感染、慢性肝炎、自身免疫病
IgG型MM、高丙种球蛋白血症 IgA型MM 巨球蛋白血症 IgE型MM、过敏疾病、寄生虫感染 低丙种球蛋白血症、免疫缺陷病、 肾病、应用免疫抑制剂
可持续1～2年后才转阴。
8.dsDNA 抗体
• SLE血清特异性抗体，活动期SLE：80%—100% • 可用于SLE疾病活动期判断和药物疗效观察 • 抗体滴度上升但临床症状不明显的患者，
抗体检测后5年内80%患者进入活动期
9.抗核小体抗体
核小体靶抗原是组蛋白 （H1、H2A、H2B、H3 和H4 ）和dsDNA
传统定义：是指抗细胞核抗原成分的自身 抗体的总称 狭义 定义
现代定义：是指抗细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称。对 ANA的理 解已不再局限于核成分，而是指抗核酸和核蛋白抗 体的总称 广义定义
靶抗原分布：细胞核细胞浆
ANA荧光染色模型
细胞核
细胞浆 细胞骨架 细胞周期
均质型 颗粒型 周边型
着丝点型 核糖体型 肌动蛋白 型
1.SS：40-80％；2.SLE：30-40%； 3.PBC：20%；4.新生儿SLE : 100% 5.新生儿先天性心脏传导阻滞:30-40%
SS：40-90%； Sቤተ መጻሕፍቲ ባይዱE：10-20%
ANA/ANA谱检测临床意义
荧光核型
抗核抗体
临床意义
核仁型
Scl-70 PM-Scl
弥漫型PSS: 25-75％
抗SSA是核小体糖蛋白， 分子量52kD、60kD [临床意义] (1)SS：40-80%；
SS-B抗原是一种分子量为 47kDa的磷蛋白
[临床意义]
(2)SLE：30-40%
(1) SS ： 40-95%；
(3)PBC：20%
(2) SLE： 10-20%
(4)新生儿SLE ：100%
(3)男 :女 1 :29
1. nRNP/2.Sm
nRNP/Sm抗原是一组核糖核蛋白抗原系统 [临床意义] （1）Sm抗体是SLE的标志性抗体，
SLE患者Sm阳性率为10-40％。 （2）高滴度nRNP是 MCTD的标志性抗体，
阳性率95 -100% （3）其他自身免疫性疾病:SS、PSS、PM/DM、RA
3.抗SSA抗体(Ro抗体) 4.SSB抗体(La抗体）
APLA靶抗原是广泛存在于血细胞、组织细胞膜上磷脂，以心磷 脂
抗体（ACL）为主。 抗磷脂综合症：患者ACL阳性，动脉血栓形成，血小板减少，反 复流产和神经系统损伤。 【临床意义】 1. 习惯性流产：10%～30% 2. SLE：阳性率70% 3. RA： 阳性率30-40% 4. 血小板减少
（八）抗平滑肌抗体（SMA）
第十四章 风湿性疾病实验诊断
吉林大学白求恩第一医院实验诊断教研室 黄晶
第一节 概述
自身免疫性疾病： 由于某些原因造成免疫系 统对自身成分的免疫耐受 性减低或破坏，致使自身 抗体损伤引起的疾病。
自身免疫病
第二节风湿性疾病实验检测
一、一般实验检测
（一）抗“O”测定 抗链球菌溶血素“O”（anti-streptolysinＯ，
5-20
30-70
（三）干燥综合症
主要相关抗体 阳性率（%） 实验室方案
抗核抗体 SS-A SS-B RF
70 40-75 30-50 60-90
1.ANA+RF 2.ENA15项
（四）多肌炎/皮肌炎
主要相关抗体 阳性率（%）
实验室方案
抗核抗体 Ku Jo-1 PM-Scl
30-50 30-55 25-35 8
核少点型 核多点型
颗粒型 线粒体型 高尔基体型
波形纤维 蛋白型
细胞角蛋 白型
中心体型 纺锤体型 纺锤丝型
核仁型
PCNA型 溶酶体型 原肌球蛋 中间体型 白型
ANA荧光染色模型—细胞核型
ANA检测临床意义
1.系统性红斑狼疮 80-100 % 2.混合性结缔组织病95-100% 3.药物性狼疮95-100% 4.硬皮病70-90% 5.干燥综合征60-80% 6.多发性肌炎/皮肌炎40-60% 7.类风湿关节炎30-50% 8.其它自身免疫性疾病 9.正常人5-10%
（五）补体C3、C 4检测 【临床意义】 （1）补体↑多见于急性感染、传染病、肿瘤、排斥反应。 （2）补体↓ a 先天性缺陷 b 后天性缺陷
合成↓：肝病、营养不良（合成原料不足） 消耗↑：肾小球肾炎、SLE、大失血
二、自身抗体实验检测
（一） 抗核抗体（anti-nuclear antibodiesANA）
自身免疫性肝病自身抗体
抗肝细胞质抗原I型（抗LC1）
靶抗原为58-62KD的肝细胞胞液 多肽蛋白，肝脏特异性细胞溶质。 [临床意义] 为II型AIH的血清特异性抗体， 阳性率30-70%，常与抗LKM-1 抗体同时存在与疾病活动性具有相关性。
自身免疫性肝病自身抗体
抗可溶性肝抗原和抗肝胰抗体（抗SLA/LP）
主要靶抗 原为46KD的肌动蛋白 波状纤维蛋白、微管蛋白
【临床意义】
• 高滴度的SMA对AIH诊断敏感性 至少90％
• 低滴度的SMA可见于酒精性肝硬化 或病毒性肝炎
（九）HLA-B27
【临床意义】
1.HLA-B27在强直性脊柱炎患者中其阳性率可高达 90%以上
2.在强直性脊柱炎患者的一级亲属中约有50%其HLAB27 抗原为阳性
[临床意义]
• 重叠综合症的诊断标志，表现为肌炎 和硬皮病症状 (阳性率 50-70%).
12.抗增殖细胞核抗原抗体
PCNA是一种分子量为36kDa的DNA 聚合酶辅助蛋白，参与DNA的修复作用
[临床意义]
• 抗PCNA抗体对系统性红斑狼疮具 有很高的特异性，但阳性率仅为3％
• 与肾脏和CNS及血小板减少相关
3.牛皮癣、溃疡性结肠炎、克隆氏病等疾病HLA-B27 抗原也呈阳性反应。
4.目前HLA-B27仍为检查早期强直性脊柱炎的方法之 一。
第三节 风湿性疾病的实验诊断
一、类风湿关节炎 • ESR、CRP • 抗环瓜氨酸肽抗体（CCP） • 抗角蛋白抗体（AKA） • 抗核周因子抗体（APF） • RF及RF分型（IgA、IgG、IgM）
[临床意义] • 抗核小体抗体对SLE的特
异性几乎为100%
10.抗组蛋白抗体
组蛋白靶抗原是DNA相关蛋白 分子量11.2 -21.5 kDa [临床意义]
• 药物诱导红斑狼疮阳性率为95%
• 系统性红斑狼疮30-70%的
• 类风湿性关节炎15-50%
11.PM-Scl
PM-Scl主要的靶抗原是分子量分别 为75和100kDa的两种多肽分子
二、抗核抗体谱
• 可提取核抗原 extractable nuclear antigen • 由许多小分子多肽组成 • 免疫印迹法
1. nRNP/Sm 2.抗SSA抗体 3.抗SSB抗体 4.抗Jo-1抗体 5.抗Scl-70抗体 6.抗核糖体P蛋白抗体 7. PM-Scl
8.抗着丝点抗体 9.抗组蛋白抗体 10.抗核小体抗体 11.抗增殖细胞核抗体 12.抗dS-DNA
人白细胞弹性蛋白酶（HLE）
组织蛋白酶G（CG）
溶菌酶（LYS）
天青杀素（AZU）
防御素（DEF）
β-葡萄糖醛酸酶（β-glucuronidase）
人溶酶体相关膜蛋白2（H-LAMP 2）
α-烯醇酶
核质成分
（α-enolase） （lamina ）
催化酶（catalase）
肌动蛋白（actin）
（2）ANCA自身抗体临床意义
ANCA两种荧光染色型
核周型ANCA（pANCA） 胞浆型ANCA（cANCA）
2.ELISA法检测特异性ANCA
已知的ANCA靶抗原及其在中性粒细胞胞浆中分布
嗜天青颗粒
特异性颗粒 胞质 核板层
蛋白水解酶3（PR3）
乳铁蛋白（LF）
髓过氧化物酶（MPO）
溶菌酶（LYS）
杀菌/通透性增高蛋白（BPI）
靶抗原为肝细胞角蛋白8/18， 分子量55 KD、45 KD [临床意义]
III型AIH的血清学标志 阳性率约11-25%
自身免疫性肝病自身抗体
ANA+ANA15项
（五、六）自身免疫性肝病自身抗体
• 自身免疫性肝炎（ AIH ） autoimmune hepatitis
• 原发性胆汁性肝硬化（ PBC） primary biliary cirrhosis
• 原发性硬化性胆管炎（PSC） primary sclerosing cholangitis
ASO） 【临床意义】
1.ASO升高见于： 风湿性关节炎、肾小球肾炎、 感染性心内膜炎、扁桃体炎
２.判断风湿活动期指标之一。
（三）C反应蛋白（CRP）
一种急性时相蛋白
【临床意义】 1.急性细菌感染炎性指标 2.AMI评估指标 3.评估自身免疫病的活动状态
（四）免疫球蛋白 【参考值】
IgG 7.0—16.0g/L IgA 0.7—5.0g/L IgM 0.4—2.8g/L
二、系统性红斑狼疮
主要相关抗体
抗核抗体 dsDNA 核小体 Sm SS-A
SS-B 心磷脂、β2糖蛋白 U1-RNP 核糖体P蛋白 组蛋白
阳性率（%） 实验室方案
80-100 30-90 10 10-30 20-60
1.ANA+dsDNA 2. ANA+dsDNA+ANA15
10-20
20-40
15-40