传统菊花名品的组培复壮及快繁

第25卷第2期 唐山师范学院学报 2003年3月 Vol. 25 No.2 Journal of Tangshan Teachers College Mar. 2003
────────── 收稿日期：2002-11-02 作者简介：陈超（1966-），男，天津人，唐山师范学院生物科学技术系副教授，理学硕士。

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传统菊花名品的组培复壮及快繁
陈 超1，王桂兰1，石洪凌1，崔凯勋2
（1.唐山师范学院 生物科学技术系，河北 唐山 063000；2.唐山市园林处西郊花卉基地，河北 唐山 063000）
摘 要：对十个传统菊花品种进行组织培养，筛选出了适合它们生长的增殖培养基和生根培养基配方，在增殖培养中进行了抗病毒剂复壮处理，提出了一套利用组培进行复壮快速繁殖的简便技术流程,并在养护过程中观察到复壮组培苗比扦插苗具有长势壮，分枝多,花大，抗病性强的特点。

关键词：菊花；组织培养；复壮
中图分类号：Q949.783.5 文献标识码：A 文章编号：1009-9115（2003）02-0021-02
菊花（Chrysanthemum morifolium ）品种繁多，分布很广，主要利用扦插繁殖。

许多传统菊花名品由于扦插的原因，品种特性已经严重退化，有的濒临灭绝，为了保存和发展传统名优品种，国家每两年举行一次“全国菊花品种展”大型活动，各参展商为了养出高规格的菊花，想尽一切办法在栽培上下功夫，但他们却忽略了重要一点——高规格的花要以好的种苗做基础。

本试验对十个传统菊花品种（其中有3个品种经过我们组培复壮而获得了全国菊花品种展金奖）组培脱毒复壮及复壮组培苗的栽培反应进行了研究，旨在提出进行菊花品种复壮及快速繁殖的生产流程，以获取优质种苗。

此研究尚未见报道。

1 材料与方法 1.1 品种
所用菊花品种为：（1）绿毛龟，（2）碧海英风，（3）金钟震宇，（4）钢铁意志，（5）秋节晚红，（6）千丝万缕，（7）十八凤环，（8）一枝浓艳，（9）蕊珠宫，（10）得义缘。

这十个菊花品种均为第四届全国菊花品种展规定参展品种。

1.2 方法
取新生脚芽，用自来水冲洗干净，除去较大叶片，70%酒精浸30s ，0.1％升汞消毒8min ，用无菌水冲洗4~5遍后，切取小芽5mm 左右，接于不同培养基上进行培养。

增殖培养基采用MS ，并补加不同浓度和比例的6-BA 和NAA 。

培养基中加3％的蔗糖，0.6％的琼脂，PH5.8。

生根培养基为MS 和1/2MS ，附加NAA3mg/L ，蔗糖15g/L ，PH5.8。

生根基质为蛭石，装于罐头瓶中，培养温度为26±2℃，光照强度为1000~2000lux 。

在增殖培养基中加抗病毒剂板兰根和病毒唑[1]进行种苗的脱毒复壮处理，浓度为每升培养基加4支板蓝根针剂（相当于4克板蓝根原药）和10mg 病毒唑，于
消毒前加入培养基中。

2 结果与分析 2.1 试管无性系的建立
根据有关资料和试验[2][3]，选定了10个激素配比水平（见表）。

将经消毒的菊花脚芽切取顶部5mm 左右接于培养基中。

15d 后开始生长形成丛生的小苗。

1mon 后小苗长到1~2cm 高，此时转接到新的培养基上继代培养。

新转接的小苗1w 后基部膨大并开始生长，比初代培养生长快。

以后每次将小苗切段转接扩增，每个切段带1~2个芽，到第3次继代试管苗已基本驯化，不仅生长快，而且每个切段都产生5个左右的丛生苗，总增殖倍数为5~10倍，苗的高度也比较一致，有的品种20d 就能长到3cm 以上，经过1mon 的培养，丛生苗高度多在3.5~5.0cm 之间。

所试验菊花品种在这些增殖培养基上的表现不同，其中2、4、5号培养基增殖率、生长和伸长均较好，在这3种培养基中，2号培养基适应于品种7，5号培养基适应于品种8，其余品种在4号培养基上生长较好。

在培养过程中，我们观察到外植体从自养到异养需要一定时期的驯化才能达到生理适应。

初代培养物由于外植体经消毒等一系列操作过程会受到不同程度的损伤，所以开始需要有一个恢复过程，生长较慢。

另外，第1代培养获得的丛生苗是外植体自身营养和培养基营养共同作用的结果。

从第2代开始试管苗才过渡到真正的异养，一般要经过3~4次继代才能得到驯化的试管苗，这大约需要3~4个月。

驯化前试管苗一般生长较慢，苗呈丛状，很少拔节伸长。

而一但驯化，试管苗生长迅速，繁殖率高，生长整齐，适于快速繁殖。

2.2 试管苗的生根
当试管苗长到3cm 以上时，将其从基部切下，转到以
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蛭石为基质附加生根培养液的生根培养基中，散射光培养。

1w 后试管苗的切口处开始膨大，有少数已开始出现白嫩的短根。

15d 大部分苗长出根，20d 统计生根率为100%。

所试验的菊花品种在这两种生根培养基中的生根情况相差不大，看来菊花这种植物在生根过程中对营养元素的要求不很严格。

在菊花的生根培养中，我们用蛭石代替琼脂作为培养基
质，取得了很好的效果。

由于蛭石是颗粒状的，有良好的通气性，利于生根和根的生长。

另外，在蛭石中长出的根具有根毛，这样可省去用琼脂培养基生根移栽时必须在蛭石中过渡这一步，简化了移栽程序，降低了成本。

同时生根时采用罐头瓶代替三角瓶，增加了接种小苗的数量（每瓶20株）便于操作，又降低了成本，更适于快速繁殖的需要。

表1 增殖培养基的激素配比（mg/L ）
Table plant regulator proportion of various propagation media(mg/l)
培养基 Culture media 激素种类 Kinds of regulator
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 6-BA 1 2 2 2 2 3 3 3 3 4 NAA
0.5
0.05
0.1
0.2
0.5
0.05
0.1
0.2
0.5
0.5
2.3 试管苗的移栽
在生根15d 时将罐头瓶从培养室移到荫棚下，这时的光照要求在10 000~30 000lux 。

1w 后将封口膜的绳解开，封口膜稍揭开透气，3d 后将封口膜揭掉，锻炼3d 后将小苗取出栽于花盆中，基质用常规菊花栽培的培养土，保湿养护，成活率在95%以上。

2.4 经复壮后的试管苗生长开花情况
根据以往的工作经验，我们在菊花的增殖培养基中加入抗病毒剂进行种苗脱毒复壮处理，结果显示抗病毒剂对试管苗的生长有一定的抑制作用，但影响不大，经复壮处理的生
根小苗进入正常栽培管理后比用脚芽扦插的小苗生长快，分枝多，花期一般提前一周左右，花朵较正常开花的有明显增大，而且对各种病害的抗性较扦插苗有明显提高，说明此方法在传统菊花品种的提纯复壮中，具有很大的应用前景。

3 总结
经一系列试验，我们认为较适宜的菊花复壮快繁生产程序为：试管无性系建立→加抗病毒剂的脱毒复壮→琼脂培养基快速繁殖→蛭石培养基生根→栽于培养土中保湿养护→自然条件下粗放管理。

参考文献：
[1] 陈超,王桂兰.中、西药剂在苹果褪叶斑病毒脱除中的作用[J].落叶果树,1995,(1):1-2. [2] 陈显君,黄楚才.植物组织培养简报摘编[J].植物生理通讯,1988,(3):57. [3] 罗紫绢,蒋培森.植物组织培养简报摘编[J].植物生理通讯,1988,(6):45.
Tissue Culture Rehealthy and Rapid Propagation on Traditional
Noble Cultivars of Chrysanthemum
CHEN Chao 1, WANG Gui-lan 1, SHI Hong-ling 1, CUI Kai-xun 2
(1.Department of Biology Science and Technology, Tangshan Teachers Collage, Hebei Tangshan 063000;
2. West Suburban Flower Base of Tangshan Landscape Department, Hebei Tangshan 063000)
Abstract: Tissue culture was done on ten traditional cultivars of chrysanthemum. Some kinds of tissue culture medium suitable for propagation were selected and rooted growth. Through experiments, a set of simple and convenient produce procedure was improved about tissue culture rehealty and rapid propagation. Rehealthy treatments were done during propagating culture using anti-virus agent. During growth period, we observed that tissue culture plants were strong than cuttage plants, they also had more shoots, big flower and strong disease resistance.
Key words: chrysanthemum; tissue culture; rehealthy
责任编辑、校对：李春香。