桦褐孔菌多糖提取工艺

桦褐孔菌多糖提取工艺

桦褐孔菌多糖提取工艺桦褐孔菌是一种生活在寒带的木腐菌，引起白桦、银桦、榆树、赤杨的白腐，桦褐孔菌菌丝能耐-40。C的低温，是极耐寒的种类。是一种民间要用真菌。主要分布在北半球北纬45~50。C的地区，俄罗斯、中国黑龙江、吉林省长白山均有发现。桦褐孔菌(lnonotusobliquus)是90年代新兴的一种食药兼用菌,富含多种生物活性成份。目前,国外关于桦褐孔菌多糖免疫活性的研究不多,而国内尚未见这方面的报道。本文以桦褐孔菌子实体为材料提取粗多糖,研究不同因素对多糖浸提的得率和纯度的影响,最终通过正交确定了最佳多糖提取条件。

1．材料与方法： 1.1供试材料：野生桦褐孔菌菌核；95%乙醇；无水乙醇；丙醇；浓硫酸； 6%苯酚；葡萄糖

1.2主要仪器： UV-1800紫外分光光度计；真空干燥箱；高速水平离心机；恒温水浴锅；索氏提取器；分析天平；烧杯；移液管

1.3试验方法：

1.3.1桦褐孔菌脱脂取桦褐孔菌200g，将其放入索氏提取器中，加入300ml石油醚，对其今天脱脂，时间为2h

1.3.2 热水浸提发取脱脂后的桦褐孔菌15g，将其分为三组，分别加入100ml、150ml、200ml的蒸馏水，放于90℃的恒温水浴锅中用热水抽提3次，每次2h，过滤，合并3次滤液减压浓缩，浓缩至原体积的1/10。再加入3倍量的95%的乙醇溶液，置于4℃冰箱中

静置24h，4000r/min离心5min，弃上清，取沉淀。依次用无水乙醇、无水乙醚进行洗涤，再次离心，将沉淀放入干燥器中进行干燥，称重，用标准曲线计算粗糖含量.

1.3.3碱液提取法取热水浸提后的桦褐孔菌2g，加入15-30倍量的水，在一定温度下提取2-6h，离心，收集上清液，用1mol/L HCL 中和提取液，适当浓缩，加入约4倍浓缩体积的95%乙醇，0℃静置过夜，过滤、沉淀物放入60℃的烘箱得到碱提桦褐孔菌多糖.

1.3.4 标准曲线的绘制配制0.1mol/ml的葡萄糖溶液，取10支事关，加入一定量梯度的葡萄糖溶液，加入

2.5ml浓硫酸，使其生成糖醛，然后加入苯酚生成橙黄色化合物，用分光光度计绘制曲线.