血清脂蛋白电泳原理和操作方法
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血清脂蛋白电泳原理和操作方法
导语:血清脂蛋白,当前在临床应用方面,它的作用还是比较大的,所以对于很多的患者,就想全面了解一下血清脂蛋白电泳原理和操作方法,为了你能尽
血清脂蛋白,当前在临床应用方面,它的作用还是比较大的,所以对于很多的患者,就想全面了解一下血清脂蛋白电泳原理和操作方法,为了你能尽快的了解,下面内容就做了详细的介绍,你可以充分的了解一下,相信会对自己以后有帮助.
原理
脂蛋白是在碱性pH条件下,以琼脂糖凝胶或醋酸纤维条带作为载体,从阳性方向来进行分离的。
形成的蛋白区带可以用脂肪染料如苏丹黑或者油红染色,它们只用于脂蛋白染色。
在琼脂中可能会有附加的聚阴离子和二价阳离子沉淀。
脂蛋白沉淀带用光密度计可立即定量分析。
脂蛋白区带也可以被切开后重新溶解,对各区带进行胆固醇浓度的直接酶法检测。
另外,有报道在用薄层琼脂糖凝胶上进行电泳分离后,可直接检测各脂蛋白组分中的胆固醇含量的方法。
操作方法
(1)将缓冲液加入电泳槽内,调节两侧槽内的缓冲液,使其处于同一平面。
(2)醋酸纤维素薄膜的准备:取醋酸纤维素薄膜(2cm×8cm)在毛面的一端(负极侧)1.5cm处用铅笔轻划一横线,做点样标记。
编号,并标明正、负极后,将薄膜置于巴比妥-巴比妥钠缓冲液中浸泡,待充分浸透后(一般为20min)取出,夹于洁净滤纸中间吸去多余的缓冲液。
(3)将醋酸纤维素薄膜毛面向上贴于电泳槽支架上拉直。
用微量吸管吸取无溶血血清3~5μl于横线处沿横线加样,样品应与薄膜的边缘保
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