实验大黄的薄层色谱鉴别与显微鉴别

注意：薄层板浸入展开剂不能超过点样线，否则样品不在薄板上分离而直接 进入展开剂。取出薄板后，马上用铅笔在展开剂上升前沿处划一记号， 否则呈现的前沿很快消失，无法记录展开剂前沿至原点中心距离，而无 法计算比移值。
④ 检测：将薄层板于紫 外灯下（365nm）检测， 检测样品色谱与标准品色 谱荧光斑点。
唐古特大黄
药用大黄
2、性 状：（形状，颜色，表面，断面等）
▪ 大黄根茎呈圆柱形、马蹄形或卵形。 ▪ 表面黄棕色或红棕色，有的可见类白色的
网状纹理（系类白色的薄壁组织夹有棕红色的射线）；残 留的外皮表面暗棕色，有纵横粗皱纹。
▪ 断面淡红棕色或黄棕色，颗粒性；皮部极 窄，可见暗色形成层环纹，髓宽广，有多 数放射状星点（异形维管束）散在，呈大理石 样纹理，习称“锦纹”。
流动相：石油醚(30~60℃)∶甲酸乙酯∶甲酸（15∶5∶1）。 点样量：对照品溶液1~2l ，供试品溶液2~4 l 。 展 距：8cm。 检 视：紫外光灯365nm。
① 样品提取：取大黄、撅子黄粉末各0.5g，分别置小三角烧 瓶中，加15ml甲醇，用保鲜膜封口，超声提取0.5小时。
② 点样：取薄层板1块，在距板底部1cm处画一横线， 平行点样：大黄提取液
实验四、大黄的显微鉴别与 薄层色谱鉴别
实验目的：1. 熟悉根茎类生药的鉴别方法； 2. 掌握大黄的植物来源、
理化鉴别及显微鉴别方法。 实验内容：1.观察大黄的组织切片及粉末；
2. 进行大黄薄层色谱鉴别。
1、来 源：
大黄药材来源于 蓼科植物掌叶大黄 Rheum palmatum L.、 唐古特大黄R. tanguticum Maxim et Balf. 或药用大黄R. officinale Baill.的根茎。
晶及淀粉粒。
显微鉴别
大黄根茎—部分髓的横切面：
（1）木栓层、皮层：多已除 去；
（2）韧皮部：筛管群明显。 射线细胞内含棕色蒽醌类物 质；
（3）形成层：成环；
（4）木质部：导管常１至数 个相聚，稀疏排列，不木化；
（5）髓：宽广，异型维管束 排列成环状或散在。
大黄（根茎）横切面简图
1.木栓层2.皮层3.草酸钙簇晶4.韧皮部 5.形成层6.射线7.导管8.木质部9.髓
撅子黄提取液 大黄酸标准品 大黄素甲醚标准品
要求：划起始线时，要轻，不要刺破薄层；样品溶液原点 应尽可能小，一般直径不超过3毫米为适宜。点样力求迅速，一 般不超过5分钟。因为薄层板暴露的时间过长，会吸收空气中的 水份而改变活度，影响分离效果。
③ 展开：将已点好样的薄层板直接放入装有展开剂的层析缸内 展开。当展开剂上升至距薄层板上沿1cm取出，并挥干试剂。
掌叶大黄
异形维管束 (星点)
唐古特大黄 药用大黄
3、显微鉴别 1
大黄根茎—部分髓的横切面
（髓部的异形维管束为内韧型维管束）
1. 木质部，导管常1～数个
2
相聚，壁非木化或微木化；
2.形成层细胞扁平，排列成
3
环；3.韧皮部位于形成层内
侧，近形成层可见粘液腔；
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4.射线呈星芒状，含棕色物
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4
质；5.薄壁细胞含草酸钙簇
实验作业
▪ 1. 简述大黄组织特征，并绘一个星点的组 织简图、大黄粉末中的草酸钙簇晶图；
▪ 2. 简述大黄薄层色谱操作过程及鉴定结果， 并绘色谱特征图。
1 .木质部 2 .形成层 3 .韧皮部 4.射线
一个异型维管束
大黄粉末特征：
草酸钙簇晶直径20～ 160m，少数至196m。 具缘纹孔导管、网纹导 管、螺纹导管及环纹导管 非木化。 淀粉粒甚多，单粒类球 形或多角形，脐点星状； 复粒由2～8分粒组成。
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4、大黄薄层层析：
薄层板：硅胶预制板 对照品溶液的制备：取大黄酸、大黄 素甲醚，加甲醇溶解，制 成1mg/ml 的溶液，作为对照品溶液。