细菌学弧菌属讲义

TCBS培养基/4号琼 脂/庆大霉素琼脂
生长现象 生化反应 血清分群
PCR扩增ctxA、rfb
• 医学微生物学 （第9版）
四、防治原则
控制传染源：隔离治疗患者。及时补充水和电解质，预防低血容量性 休克和酸中毒是治疗霍乱的关键；可选用的抗菌药物包括：多西环素、 红霉素、环丙沙星等。有耐药菌。
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一、生物学性状
（三）培养特性
耐碱不耐酸，在pH8.8~9.0的碱 性蛋白胨水或碱性琼脂平板上生 长良好，初次分离常用碱性蛋白 胨水增菌 在普通盐浓度环境中可生长
霍乱弧菌在碱性蛋白胨水中的培养物。（邵世和 临床微生物学 检验 第5版 配套光盘）
左测试管为对照，右侧试管为经4～6小时培养的霍乱弧菌，大 量繁殖，培养液混浊，形成菌膜。
O139群的保护性免疫以针对脂多糖和荚膜多糖的抗菌免疫为主，抗毒素免 疫为辅。O1群获得的免疫不能交叉保护O139群感染。
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三、微生物学检查法
标本
“米泔水”样粪便、肛拭、呕吐物
快速诊断 分离培养 基因检测
形态及活菌运动观察
免疫制动试验、O1和O139群血清凝集试验
碱性蛋白 胨水增菌
细菌学弧菌 属
第一节 霍乱弧菌 第二节 副溶血性弧菌
重点难点
掌握 1.霍乱弧菌的形态特征、培养特性、分类（群、型）、致病性； 2.副溶血性弧菌的培养特性和致病性。
熟悉 霍乱弧菌的免疫性、微生物学检查和防治原则。
了解 1.霍乱弧菌的抵抗力； 2.副溶血性弧菌的抵抗力、微生物学检查和防治原则。
第一节
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二、致病性与免疫性
（三）所致疾病
O1群和O139群：引发霍乱（甲类传染病），可从无症状或轻型腹泻到严 重的致死性腹泻（占5%-10%）。典型病例：剧烈腹泻和呕吐，排出“米 泔水”样粪便；脱水、肌肉痉挛、低钾血症、代谢性酸中毒、低容量性休 克、肾功能衰竭、意识障碍。未经治疗者死亡率高达60%，及时治疗后死 亡率可小于1%
非O1群和O139群霍乱弧菌引发轻症腹泻
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二、致病性与免疫性
（四）免疫性
感染后可刺激机体产生牢固免疫力，可维持3年以上。稻叶型与小川型之间 有交叉免疫保护。
患病后，可出现保护性抗毒素抗体及抗菌抗体，包括肠黏膜表面的sIgA和 血清中的IgM和IgG，主要是sIgA发挥作用。
黏膜上皮细胞表面；可充当噬菌体CTXΦ的受体
HapA：有助于细菌穿透至小肠黏膜层
趋化蛋白（xis protein）：cep编码的黏附性因子
鞭毛：有助于细菌穿过黏液层而接近肠壁上皮细胞 形成生物膜
霍乱弧菌黏附于患者小肠黏膜上皮细胞（电 镜）（邵世和 临床微生物学检验 第5版 配套
一、生物学性状
（四）生化反应
氧化酶和触酶试验阳性 能发酵葡萄糖、蔗糖和甘露醇等糖和醇，产酸不产气 能还原硝酸盐 吲哚试验阳性
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一、生物学性状
（六）抵抗力
在河水、井水及海水中可存活1~3周。黏附于藻类或甲壳类动物时，可形 成生物膜样结构，存活期会延长
对热和酸敏感 对含氯消毒剂敏感
A1 A2
A亚单位
B亚单位
霍乱毒素结构模式图（韩俭制作）
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霍乱毒素的作用机制：B亚单位 与小肠上皮细胞表面的神经节苷 脂GM1受体结合，介导A亚单位 进入细胞，激活腺苷酸环化酶， 使细胞内cAMP水平升高，刺激 肠黏膜细胞主动分泌Cl-和HCO3-， 抑制对Na+的摄入，水伴随着离 子大量丢失而丢失，导致患者出 现严重腹泻与呕吐。
霍乱毒素作用机制模式图（韩俭制作）
AC： 腺苷酸环化酶（adenylate cyclase） Gsα：腺苷酸环化酶G亚单位 ADPR：ADP核糖 PKA：蛋白激酶A
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二、致病性与免疫性
（一）致病物质
与定植有关的因素
毒素共调解菌毛A（TcpA）：介导细菌黏附和定植于小肠
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一、生物学性状
（三）培养特性
在碱性琼脂平板上形成圆形、透明或 半透明S形、无色、扁平菌落 在硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖 （TCBS）培养基上形成黄色菌落
霍乱弧菌在TCBS琼脂平板上形成发酵蔗糖的较大的黄 色菌落（邵世和 临床微生物学检验 第5版 配套光盘）
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一、生物学性状
（二）基因组特征
由2条环状染色体组成 大环：2.96Mb，携带2690个基因，编码2534个蛋白 小环：1.07Mb，携带1003个基因，编码970个蛋白 前噬菌体基因组：产生霍乱毒素（cholera toxin）的霍乱弧菌基因组含有前噬
菌体CTXΦ基因组，携带10个基因（rstR、rstA、rstB、psh、cep、orfU、ace、 zot、ctxA和ctxB）， ctxA和ctxB编码霍乱毒素
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二、致病性与免疫性
（一）致病物质
霍乱毒素（cholera toxin） ：目前已知的致泻毒素 中最为强烈的毒素。
来源：O1群和O139群携带前噬菌体CTXΦ的溶原性 霍乱弧菌产生
结构：由一个A亚单位和5个相同的B亚单位构成，A 亚单位由A1和A2两条肽链组成。
光盘）
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二、致病性与免疫性
（一）致病物质
其它致病物质：副霍乱肠毒素、紧密连接毒素、神经氨酸酶、溶血毒素、空 泡毒素、RTX毒素等
O139群存在多糖荚膜和特殊LPS毒性决定簇
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二、致病性与免疫性
（二）流行环节
传染源：患者和带菌者 传播途径：粪-口途径 易感人群：O1群儿童更易感；O139群感染的70%为成人 影响流行的因素： 个人因素：胃酸、饮食卫生习惯 其他因素：自然因素和社会因素
霍乱弧菌 Vibrio cholerae
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一、生物学性状
（一）形态染色
菌体一端有单鞭毛，运动活泼，在病 人“米泔水”样粪便或液体培养物中 呈快速飞镖样或流星样运动
有菌毛，无芽胞，O139群有荚膜
霍乱弧菌的端单鞭毛（电镜）（邵世和 临床微生物学检验 第5版 配套光盘）