免疫学技术-单抗技术及其应用

疑难问题：在教学中，选修3是《现代生物技术专题》，需要重点关注生物技术，如基因工程技术、植物组织培养技术等，同时也要关注技术的应用。这次的选考加试中检测了杂交瘤技术，利用单抗识别抗原的特殊部位，特异性强。选修3教材中第33页“单抗可作为特异探针，研究相应抗原蛋白的结构、细胞学分布及其功能”。这是单克隆抗体的应用，首先需要了解什么是单抗，其次就是单抗的应用。

一、单克隆抗体制备原理

抗体主要由经过免疫过的B淋巴细胞合（效应B细胞）成。动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系，不同的效应B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时，抗原分子上的许多决定簇（抗原表位）分别激活各个具有不同的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成该细胞的后代，即克隆由许多个被激活B细胞的分裂增殖形成多克隆，并合成多种抗体。如果能选出一个制造一种专一抗体的细胞进行培养，就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群，即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的抗体，称为单克隆抗体。

效应B淋巴细胞能够产生抗体，但在体外不能进行无限分裂，而瘤细胞虽然可以在体外进行无限传代，但不能产生抗体。将这两种细胞融合后得到的杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性。

二、单克隆抗体的应用

1．作为亲合层析的配体

单克隆抗体能与其相应的抗原特异性结合，因而能够从复杂系统中识别出单个成分。只要得到针对某一成分的单克隆抗体，利用它作为配体，固定在层析柱上，通过亲合层析，即可从复杂的混和物中分离、纯化这一特定成分。

2．作为生物治疗的导向武器

质体是由既亲水又亲油的两亲磷脂组成的连续双分子层微囊，内含水相空间，可包裹水溶性物质。包有细胞毒剂的脂质体膜上偶联抗体，可定向攻击靶细胞，称为免疫脂质体。这种“导向治疗”，在动物试验与体外试验中已获得满意效果。

3．作为免疫抑制剂

抗人T淋巴细胞单抗(McAb)作为一种新型免疫抑制剂，已广泛应用于临床治疗自身免疫疾病和抗器官移植的排斥反应。其作用机理有赖于McAb的种类及其免疫学特性。注射抗小鼠Thy-1抗原的单抗，可以抑制小鼠同种皮肤移植的排斥反应。

4．作为研究工作中的探针

单克隆抗体只与抗原分子上某一个表位(即抗原决定簇)相结合，利用这一特性就可把它作为研究工作中的探针。此时，可以从分子、细胞和器官的不同水平上，研究抗原物质的结构与功能的关系，进而并可从理论上阐明其机理。如用荧光物质

标记单抗作为探针，能方便地确定与其结合的相应生物大分子(蛋白质、核酸、酶等)在细胞中的位置和分布。

5．增强抗原的免疫原性

1984年以来，Celis等发现，抗乙肝病毒(HBs)IgG可增强HBs抗原对特异性人T细胞克隆的刺激增殖，并可诱生干扰素。在小鼠中发现，当低剂量的HBs

抗原不产生免疫反应时，加入抗HBs抗体组成的复合物，则可有效地诱生免疫反应。根据这一作用，现已研制出乙肝的抗原－抗体复合物型治疗性疫苗。

6．作为医学检验试剂

单克隆抗体作为医学检验试剂，更能充分发挥其优势。单克隆抗体的特异性强，大大提高了抗原—抗体反应的特异性，减少了和其它物质发生交叉反应的可能性，使试验结果可信度更大。单抗的均一性和生物活性的单一性，使抗原－抗体区应结果便于控制，利于标准化和规范化。