淀粉样物质染色
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淀粉样物质染色
一、定义:
淀粉样物质是一种无细胞的同质性的嗜伊红性物质,因为在用碘染色时与淀粉的反应相似,固称为淀粉样物。
二、淀粉样物的化学成分:
1. 90%淀粉样原纤维蛋白。
①、淀粉样轻链蛋白。
(由浆细胞分泌的免疫球蛋白)
②、淀粉样相随蛋白。
(来源于血浆中的免疫球蛋白)
2、10%为糖蛋白。
三、淀粉样物的性质
超微结构的研究证明它是由具有固定物理性质的蛋白原纤维构成。
每个纤维约为7.5豪微米宽Glenner 等人研究发明,淀粉样物是由排列呈β折叠结构的轻链多肽所构成。
四、HE染色后的形态:
用HE染色后,它被染为均匀一致的淡粉红色,与胶原纤维玻璃样变是基本一样,不易鉴别。
五、染色后的电镜观察:
1、微丝状构成的原纤维,刚果红染色具有绿色双折光性,
2、棒状体没有刚果红染色所具有的双折光性。
结论:两者的超微结构,物理特性及化学成分完全不同。
六、病变最常累及的器官:
肝、脾、肾和肾上腺。
七、病变累及器官的大体特征:
器官变大,坚实,切面呈灰白色半透明状,严重时组织呈蜡样结构。
八、淀粉样物的种类:
1、原发性淀粉样物:见于肌肉,心脏,皮肤和舌头。
2、继发性淀粉样物:见于肝、脾、肾脏和肾上腺。
3、多发性骨髓瘤并发的淀粉样物与免疫系统有关。
4、肿瘤和肿瘤有关的淀粉样物:如骨髓瘤、甲状腺髓样瘤。
九、显示淀粉样物的方法:
(一)、甲基紫法:
1、切片脱蜡至水,
2、1%甲基紫染色5min,
3、自来水洗,
4、1%醋酸水溶液分化,直至呈现粉红色或红色,胞核呈蓝色,
5、自来水洗,摔去多余的水分,
6、用Apathy氏或阿拉伯胶封固。
结果:淀粉样物为粉红色至玫瑰红色。
其余组织呈蓝色至紫色。
注意事项:
1、这是一种异色反应的方法,所谓异色反应即使用一种颜色的染液,最后形成的结果却为另外一种颜色,故称为异色反应。
2、该法的切片不能用酒精脱水,因酒精可将着染的颜色全部褪掉,也不宜用甘油明胶封固。
3、所用的甲基紫,也可用结晶紫代替效果基本一样。
4、由于切片是带水封固,因此不能做长期保存,如要摄影,应从速进行为好。
(二)、改良的刚果红甲醇法:
1、切片脱蜡至水,
2、用刚果红甲醇液染10min,
3、用碱性酒精分化几秒钟,需于镜下控制,勿使之过度分化,
4、流水冲洗3-5min,
5、浅染细胞核,
6、水洗10-15min,
7、常规脱水,透明,封固。
结果:淀粉样物呈粉红色至玫瑰红色,核呈蓝色。
试剂的配制:
(1)刚果红甲醇液
刚果红0.5g
甲醇80ml
甘油20ml
(2)碱性酒精分化液:
氢氧化钾0.2g
80%酒精20ml。