巴戟天的组织培养与栽培技术研究进展

巴戟天的组织培养与栽培技术研究进展

摘要:概述了通过组织培养技术再生巴戟天完整植株的影响因素，包括外植体种类、消毒程序、培养基、培养条件等，以及巴戟天高产栽培的主要技术及其研究成果，并提出巴戟天组织培养技术现存的问题和今后的发展方向。

关键词：巴戟天；组织培养；栽培；研究进展

Abstract：Summarizes by tissue culture technology regeneration morinda officinalis complete plant influencing factors, including the followed body type, disinfection procedures, culture medium, culture conditions, as well as morinda officinalis high yield cultivation technique and the main research results, and put forward the morinda officinalis tissue culture technology existing problems and the future direction of development.

Key words：Morinda officinalis；tissue culture；cultivation；research progress

巴戟天为茜草科（Rubiaceae）巴戟天属多年生攀援性木质藤本，别名巴戟、巴吉、鸡肠风，以肉质根入药，是我国著名的“四大南药”之一，其主要化学成分为蒽醌类化合物、糖类、有机酸类、氨基酸类、环烯醚萜类以及人体所必须的微量元素，味甘、辛，性微温，具有补肾壮阳、强筋骨、祛风湿的功效，在临床上主要用于治疗阳痿遗精，宫冷不孕，月经不调，少腹冷痛，风湿痹痛，筋骨痿软等症[1]。

随着现代医学技术的不断发展以及对巴戟天开发不断深入，巴戟天的应用围不断扩大，市场需求量逐年增加。由于长期的滥采滥挖，巴戟天野生资源受到较大的破坏，而巴戟天栽培种的产量和质量不能满足市场的需要。巴戟天组织培养是有效可行的无性繁殖途径，不仅具有繁殖快，不受场地、季节和环境条件限制等诸多优点，也克服了扦插繁殖速度慢、难生根、繁殖率低的缺点[2]。为了使我国巴戟天的生产及质量满足市场及人们生活的需求，同时保护野生资源不再被肆意采挖而导致珍贵种质资源的流失，以优良种质快速繁殖为目的，筛选出具优良性状的巴戟天优良单株，如产药部位产量高，有效成分含量高的巴戟天单株，并以此作为组培快繁的材料，对巴戟天进行组培快繁研究，为保护巴戟天野生种质资源及巴戟天的苗木工厂化育苗提供技术支撑，从而促进巴戟天中药材的现代化进程，具有重要的现实意义[3]。本文综述近年来巴戟天组织培养快繁和栽培技术的研究进展，并对其存在的问题和进一步研究的方向进行探讨，为进一步做好巴戟天的规化种植（GAP）和深入研究与开发利用巴戟天资源提供参考。

1 巴戟天组织培养

1.1 外植体的选择与处理

不同种类的植物以及同种植物不同的器官对诱导条件的反应是有差异的，有的部位诱导成功率高，而有的部位很难脱分化；有时，即使脱分化，再分化频率也很低，或者只分化出芽而不长根，或者只长根不长芽[4]。因此，外植体的取材和处理是组织培养成功与否的关键。不同植物用于诱导培养的外植体的选材和处理也不尽相同。常选用的外植体有：根、须根、茎、块茎、鳞茎、球茎、芽、子叶、叶片、叶柄、鳞片、花蕾、花序、花芽、花瓣、花药、花丝、子房、果肉、

果实、原生质体、珠芽等植物体的各个部位。目前为止，巴戟天进行过离体培养的有6种外植体，包括茎段、茎尖、叶片、果实、腋芽、顶芽等。

1.1.1 外植体选择的季节

何宗明等[5]通过对2008年4月、7月、8月、10月不同月份采取的当年生巴戟天带芽茎段外植体研究发现，在酷暑难耐的7月至8月，光照最强，空气较干燥，植物中促进生长的源激素含量最高，外植体污染率较低，其成活率高于4、10月份。敏[6]也对2008年4月、7月、8月、10月不同月份采取的当年生巴戟天茎段外植体研究发现，在7月至8月，气温高、光照最强，空气较干燥，外植体的污染率及褐化率均较低，成活率高，均高于4、10月份，其中7月成活率高于8月份，故采集巴戟天外植体的最佳月份为7月。敏还对阴雨天、晴天08：00-10：00、晴天14：00-15：00、连续3天及以上无雨的14：00-15：00不同天气采取的当年生巴戟天茎段外植体研究发现，连续3天及以上无雨的14：00-15：00取茎段外植体培养，污染率最低，为48．89％，成活率也最高，达到48．89％。可见巴戟天组培快繁外植体宜在7月连续3天及以上无雨的14：00-15：00取材。

1.1.2 外植体的消毒处理

外植体表面的灭菌中常用的消毒剂使用方法有：单一消毒剂灭菌、联合消毒剂灭菌、混合消毒剂灭菌和联合与混合并用。敏等比较了单一消毒剂灭菌和联合消毒剂灭菌的消毒效果，发现0.1％升汞和2％次氯酸钠联合使用的消毒效果最优[6]。原因可能是复合使用消毒剂可以减少损伤大的升汞消毒时间而增加低浓度

低损伤不易残留的次氯酸钠消毒时间，既降低污染率又降低褐化率，从而减少损伤提高成活率[7]。

外植体的消毒处理程序大致相同，其流程如下：巴戟天外植体→用洗洁精或5%洗衣粉漂洗5min→流水冲洗2～5h→用滤纸吸去多余的水分→移入超净工作台→不同的消毒处理方案→置于灭菌培养皿中→切小段(长0.5～1.5cm，带有1个腋芽或顶芽，切除药液接触过的伤口)→接种→诱导培养[5-6,9-12]。

1.2 培养基及培养条件筛选

培养基是外植体生长的营养基础，是植物离体培养成功与否的重要因素。不同植物所使用的培养基有所差别。常用的培养基有MS、B5、White、Heller、ER、Nitsch、NT等。此外，激素、碳源、光照、温度、气体状况、季节、pH 值等因素对培养也有较大的影响[8]。

1.2.1 基本培养基的筛选

贺红[9]等以MT培养基为基本培养基，附加不同浓度的BA和NAA组成不同的培养基，观察巴戟天不同外植体茎尖、带节茎培养的出芽率，带节茎出芽率最高，达97.5%，茎尖次之，为76.2%。黄宁珍[10]等以巴戟天的顶芽及嫩茎节为外植体，以MS为基本培养基，通过添加不同的激素种类及激素浓度的配比，建立了巴戟天的组培快繁体系。伟[11]等以巴戟天苗的叶片、茎尖、茎段为外植体，通过诱导出不定芽进行快速繁殖，该实验所用基本培养基为MS培养基，得到了95％的不定芽诱导率与85％的生根率，说明MS培养基适用于巴戟天的组培。林美珍[12]等以巴戟天幼嫩种子中的胚为外植体进行组织培养，所用基本培养基为