肠杆菌科细菌鉴定 PPT
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红色为甲基红试验阳性(+),桔黄 色为阴性(-)
VP试验
枸橼酸盐利用试验(C)
红色为VP阳性。
斜面上有菌苔,且变成深蓝 色,为阳性;斜面上 无菌苔,仍是绿色为阴性。
表1 肠杆菌科细菌生化反应鉴定结果记录表 表2 肠杆菌科细菌生化反应鉴定数据参考表
药物敏感试验
实验原理:含有定量抗菌药物的纸片贴在己接种测试菌的 琼脂平板上,纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解 后便不断地向纸片周围区域扩散,形成递减的梯度浓度。 在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌的生长被抑制,形成 透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的 敏感程度,并与该药对测试菌的最低抑菌浓度 (MIC)呈 负相关,即抑菌圈愈大,MIC愈小。
糖发酵试验
1.不变黄,小管无气泡:糖发 酵为阴性(—)。 2.黄色,小管有气泡(产酸, 产气):糖发酵为阳性(+)。
黄色,小管无气泡(产酸, 不产气):糖发酵为阳性(+)。
大家有疑问的,可以询问和交流
可以互相讨论下,但要小声点
吲哚试验(I)
甲基红试验(MR)试验
结果:红色为吲哚试验阳性 (+),无变化为阴性(-)
肠杆菌科细菌鉴定
组员:李木生,颜大钧,郑伟坛,朱 俊林,胡思妙,王荣迎,陈琳蔓
肠杆菌科细菌一般性鉴定程序
未 知 肠 杆 菌
分 离 培 养
挑 取 可 疑 菌
纯 培 养
革 兰 染 色 镜
生 化 实 验 鉴
落
检定
药血 敏清 试学 验试
验
一.分离培养
• 无菌操作用接种环提取可疑肠道杆菌,在EMB上分区划线 接种。送37℃培养24小时。
(三).双糖铁琼脂斜面培养特征观察与动力观察
初步确定为大肠杆菌
Hale Waihona Puke Baidu
初步确定为伤寒杆菌
革兰染色镜检
短杆状,分散排列
生化试验鉴定
将需全面鉴定的可疑细菌从双糖铁琼脂斜面挑菌分别接 种于各种生化反应培养基。每株可疑菌需接种的培养基计 有糖发酵管(葡.乳.麦.甘.蔗)各1支,蛋白胨水1支 (I),葡萄糖蛋白胨水2支(M.Vp),枸橼酸盐琼脂斜面 1支(C)。接种完毕后,试管置于试管架上,送37℃温箱 培养24~48小时后观察记录结果。
(一)确定可疑菌落。 1.观察EMB表面的菌
落特征: (1).凡紫黑色的单
个菌落可初步定为 可疑大肠杆菌菌落, 标号为。 (2).凡光滑无色透 明的单个小菌落可 初步定为痢疾杆菌 属菌落或伤寒杆菌 属菌落,标号为。
二.纯培养
(二).可疑菌落纯化培养 无菌操作用接种针挑取已编号可疑菌落,分别接种在双 糖铁高层琼脂斜面和半固体培养基上,送37℃温箱培 养24~48小时。
实验方法 (一)接种肉汤培养基 (二)菌液均匀涂抹平板培养基 (三)分别夹取青霉素、链霉素、庆大
霉素和头孢拉定四种抗生素纸片贴在平 板上进行培养
实验结果
● 实验结果
三种菌对链霉素和庆大霉素敏感,但对青霉素和头孢拉定耐药。
血清学试验