克隆启动子方法的比较及应用
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第 ４ 卷 第 ３期 １
２１ ０ ０年 ３月
东
北
农
业
大
学
学
报
４１３：１ ４￣ ６ （） ５ １ ０
Ｍａ ．２ １ ｔ ００
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克 隆启 动 子 方 法 的 比较 及 应 用
Ｃ ｉａ ｈｎ ）
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重要。文章就近几年来克隆植物基因启动子的各种 方法 做一综 述 ，为启 动子分 离技 术 的应用提 供理 论
参考 。
Ｗａｇ 根据 Ｇ ｎ ａｋ中拟 南 芥基 因组序 列 中 ｎ等 ｅＢ ｎ
ａ ｌ 核 酮糖 一 ，５ 二磷 酸 羧 化 酶小 亚 基 ） 因的 ｔ Ａ（ ｓ １ 一 基
１ 启 动 子 克 隆 的几 种 方 法
１１ Ｐ Ｒ技 术克 隆启动 子 ． Ｃ
对 于序 列 已知 的启 动子 ，即根 据发 表 的基 因序
列 ，设 计 引 物 ，用 Ｐ Ｒ技 术 克 隆基 因 的启 动 子 。 Ｃ
由于 Ｐ Ｒ法简便快捷 ，近年来被较多应用于克隆 Ｃ
基 因启 动 子 。
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随着基 因工程 的发 展 ，常 常需 要 构建一 种能 高 水平表 达异 源蛋 白质 的表达 载体 。启 动子对 外源基 因 的表 达水 平 影 响很 大 ，是 Ｒ Ａ 聚合 酶 能够 识 别 Ｎ 并与其 结 合 、从 而起 始基 因转 录的一 段 Ｄ Ａ序列 ， Ｎ 是基 因工 程表达 载体 的重要 元件 。基 因启动 子 的克 隆 ，对研 究植 物基 因表达 调控 和构建 表达 载体 至关
接头 Ｐ Ｒ、交错热不对称 Ｐ Ｒ等 ，为克隆启动子提供 了更可靠，更合理 的方法。文章着重介绍 了几种启动子的克 Ｃ Ｃ
隆 方 法 ，分析 了 它们 的 优 缺 点 ，并展 望 了今后 的研 究前 景 。 关键 词 ：启 动 子 ；反 向 Ｐ Ｒ；锚 定 Ｐ Ｒ；交错 热 不对 称 Ｐ Ｒ Ｃ Ｃ Ｃ
中图分类号 ：Ｑ ｏ ５３
文献标 志码 ：Ａ
文章编号：ｌＯ — ３ ９ ２ Ｌ） ３ ０ ５ — ７ Ｏ ５ ９ ６ （Ｏ Ｏ ０ — １４ ０
Ｃｏ ａ ｉｏ ｎ ｐ ｌ ａ ｉ ｎ ｏ ｒ ｍｏ ｅ ｌ ｎ ｍｐ ｒ ｎ ａ ｄ ａ ｐ ｉ ｔ ｆ ｐ ｏ ｔ ｒ ｃｏ ｅ ｍｅ ｈ ｄ ／ Ａ ｉｕ Ｚ Ａ ｓ ｃ ｏ ｔｏ ＳＨ Ｏ Ｄ ｉ Ｈ Ｏ ｑ，
郝迪荻 ，赵 琳 ，陈李淼 ，李 文滨
（ 东北农业大学大豆生物学教 育部重点实验室，大豆研究所 ，东北农业大学农学院 ，哈尔滨 １０ ３ ５ ０ ０）
摘
要：基 因的表达调控 已成 为分子生物学研 究热点之 一。启 动子是基 因表达调控的重要顺式元件 ，启动子
的克隆对于研 究基 因表达调控 、构建基 因工程载体、表达 目的蛋白有着重要 的意 义。启动子克隆的方法很 多，从 常用的启动子 陷阱技术 筛选启动子到 Ｐ Ｒ方法的应用 ，基于 Ｐ Ｒ克隆启动子技术有 ：载体锚 定 Ｐ Ｒ、反向 Ｐ Ｒ、 Ｃ Ｃ Ｃ Ｃ
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１１ Ｐ Ｒ技 术克 隆启动 子 ． Ｃ
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基 因启 动 子 。
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中图分类号 ：Ｑ ｏ ５３
文献标 志码 ：Ａ
文章编号：ｌＯ — ３ ９ ２ Ｌ） ３ ０ ５ — ７ Ｏ ５ ９ ６ （Ｏ Ｏ ０ — １４ ０
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郝迪荻 ，赵 琳 ，陈李淼 ，李 文滨
（ 东北农业大学大豆生物学教 育部重点实验室，大豆研究所 ，东北农业大学农学院 ，哈尔滨 １０ ３ ５ ０ ０）
摘
要：基 因的表达调控 已成 为分子生物学研 究热点之 一。启 动子是基 因表达调控的重要顺式元件 ，启动子
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