肠杆菌科鉴定(全)

－
-
甘露醇
+ +
ONPG + －
枸橼酸盐
+
－
动力
+
－
侧金盏花醇
+
－
异 鸟氨酸
型 枸
+
－
橼丙 费
酸二 劳
杆酸 地
菌盐 枸
阴橼
性酸
枸杆
橼菌
酸
杆
赖氨酸
沙
志
+
－
门 菌
贺 菌
葡萄糖产气 耶 属
属
+
－
尔 森
大大 菌
肠肠 属
埃埃
希希
菌菌
（
不
活
泼
株.
－ －
H2S
+
－
迟 甲基红
缓 爱
+
－
德保 鲶
华科 鱼
菌爱 爱
德德
华华
斯 图 普 鲁 维 登 斯 菌
摩 根 菌
塔 特 姆 菌
斯斯
菌菌
.
七.葡萄糖酸盐阳性组各属鉴别
.
克 分类
雷 原克雷伯菌属（klebsiella）有5个种，2个亚种
伯 菌
➢肺炎克雷伯菌 臭鼻亚种
鼻硬结亚种
属 ➢产酸克雷伯菌
➢解鸟氨酸克雷伯菌
.
克
雷 伯
培养特征
菌 ➢ 血琼脂上菌落较大，呈 属 黏液状，以接种环挑取
靛基质 +
-
-
-
鸟基酸 -
+
-
-
木糖 +
+
+
-
.
2.普鲁维登菌属各种的鉴别
试 验 产碱
斯图
普鲁维登斯菌 普鲁维登斯菌
雷极 普鲁维登斯菌
侧金盏花醇 +
-
+
甘露醇
+
-
-
.
生化反应 雷氏 斯氏 产碱 拉氏 海氏
吲哚产生 + + + + -
肌醇
++ -- V
海藻糖 - + - - -
戊五醇 + - + - +
肠杆菌科鉴定流程
主讲人：王曦晖
.
一.分布
9版伯杰鉴定细菌手册分为24个属， 108个种 现增加到31个属,常见的15个属 1.占临床分离菌总数50% 2.占G-杆菌总数80% 3.占败血症50% 4.占尿路感染70
.
二.临床意义
有些菌属对人类有明显的致病作用 1、鼠疫耶耳森菌--引起烈性传染病 2、 埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、
苯丙氨酸
+ + + － － － － － － － － － －
葡萄糖酸盐 － － －
+ + + + － － － － － －
.
六.苯丙氨酸阳性组的各属鉴别
试 验 变形杆菌属 普鲁维登菌属 摩根氏菌属 塔特姆属
H2S
+
-
-
-
枸橼酸盐
+/-
+
-
-
靛基质
+/-
+
+
-
.
1.变形杆菌属内各种的鉴别
试 验 普通变形杆菌 奇异变形杆菌 潘氏变形杆菌 产粘液变形杆菌
侧, 吲哚
硝酸盐还原
+
嗜麦芽
.
－ 不动
概
种属鉴定
述
科的特征
硝酸盐还原＋ 葡萄糖发酵 氧化酶 －
触酶＋
属间鉴定特征
种间鉴定特征
血清学分型
.
报告细菌种名 报告细菌血清型
五、肠杆菌科的初步分群
可用苯丙氨酸和葡萄糖酸盐试验将肠杆菌 科分为四大组
.
菌属名 变形杆菌属 普鲁维登斯菌属 摩根氏菌属 克雷伯菌属 肠杆菌属 沙雷菌属 哈夫尼亚菌 埃希菌属 志贺菌属 沙门菌属 枸橼酸杆菌属 爱德华菌属 耶尔森菌属
菌
据其不同的血清型别、毒力和临床症状
属
致泻性E.coli分为5类：
肠毒素型大肠埃希菌 (ETEC)
肠致病性大肠埃希菌 (EPEC)
肠侵袭型大肠埃希菌 (EIEC)
肠出血型大肠埃希菌 (EHEC)
肠凝聚型大肠埃希菌 (EAggEC)
.
埃 鉴定要点
希 不活跃大肠埃希菌与志贺菌易混淆，需相互鉴别 菌 属
.
3.摩根菌属种的鉴定
试验
摩根摩根菌 摩根菌(生物1群)
赖氨酸
-
+
动力
+
-
.
4 .苯丙氨酸阳性组菌属鉴别索引图
苯丙氨酸+
+
H2S
－
靛基质
+
－
枸橼酸盐
+
－
普 通 变 形 杆 菌
鸟氨酸 侧金盏花醇 靛基质
+
－+
－+
－
奇 异 变 形 杆 菌
潘 氏 变 形 杆 菌
甘露醇 _- + 雷产 极碱 普普 鲁鲁 维维 登登
.
3.肠杆菌属各种的鉴别
➢本菌属的细菌生化反应不典型，常用的商品化鉴定系统 ➢很难达到90％以上的鉴定正确率
.
4.哈夫尼亚菌属鉴定
葡萄糖酸盐 枸橼酸盐
+
－
棉子 糖 －
.
5.葡萄糖酸盐阳性菌属鉴别双岐索引图
葡萄糖酸盐+
侧金盏花醇
+
－
赖氨酸
+
+ 鸟氨酸 －
－
+
+
--
+
－
－
赖氨酸
鸟氨酸 －
－
+
－
产 靛基质
.
2.克雷伯菌自身菌落可拉出丝来
.
3.多源聚团菌在M-H. 平板上产生黄色
4.沙雷菌M-H 平板上产生铁锈红色
.
.
6.能产生H2S的菌株
变形杆菌 爱德华菌 伤寒沙门菌 费劳地枸橼酸杆菌 大肠杆菌
.
大肠杆菌的特点
对多种糖产酸产气,吲哚、甲基红、 VP 、枸橼酸盐(IMVC)+ + - -
五种致病性大肠杆菌要用特异性血 清凝集加以鉴别
属 雷登枸橼酸杆菌
（C. rodentium）
塞拉克枸橼酸杆菌 （C. sedlakii）
魏克曼枸橼酸杆菌 （C. werkmanii）
扬哥枸橼酸杆菌
（C. youngae）
吉乐枸橼酸杆菌
（C. gillenii）
穆利枸橼酸杆菌
（C. murliniae）
法玛丽枸橼酸杆菌 （C. farmeri）
.
菌菌
肠杆菌鉴定选用多少生化反应管为好
苯丙氨酸、葡萄糖酸盐、赖氨酸、鸟 氨酸、氨基酸对照、枸橼酸盐、硝酸 盐、侧金盏花醇、山梨醇、甘露醇、 ONPG、靛基质、双糖（H2S）
.
九.API鉴定系统(20E)
菌液制成0.5麦氏浊度,加入20E板条,
.
十、肠杆菌科某些菌株的 特殊性质
1.变形杆菌菌落呈迁延性生长
沙 常用血清：O多价血清（含A～F群）
门
O、H、Vi抗原因子血清
菌 方法：从临床标本中分离到菌株经纯培养后，符
属 合沙门 菌属生物学特性，则
采用A-F多价血清初步确定是否为Salmonella
1. 如阳性，即用O因子血清分群；再用第一相H 因子血清定型，也可用第二相辅助定型
2. 如阴性：应考虑是否有Vi抗原?
大肠埃希菌 大肠埃希菌 大肠埃希菌
在中国兰平板上为蓝色菌落 在伊红美蓝平板上为紫黑色菌落 在麦康凯和SS平板上为红色菌落
.
四 培养特征
沙 门 兼性厌氧菌 菌 营养要求不高 属 菌落呈中等大小、无
色、半透明、光滑
在SS平板上，因产生 H2S可形成黑色中心 的菌落
伤寒沙门菌菌落形态（SS平板）
.
血清学分型
加 热 或 传 去除Vi抗原 代
凝集：做O多价和单价凝集 不凝集：可能为A～F以外
.
.
③如是双相菌，进一步用复合血清1、2、5检查第 2相抗原。
.
志 贺
培养特性
菌
属 兼性厌氧菌
营养要求不高
普通平板：中等大 小、半透明、光滑
菌落形态（麦康凯平板）
鉴别培养基：乳糖不 发酵的菌落
.
志 贺
种属鉴定
1.枸橼酸杆菌属各种的鉴别
➢注意：很多鉴定系统的数据库中不包括枸橼酸杆菌属新种名称和分类资
.
2.爱德华菌属各种的鉴别
.
3.埃希菌属种的鉴别
.
临床意义 (Clinical Significance)
埃
E.coli以肠道外感染多见，主要有泌尿系统感染
希
E.coli中的致病菌株能引起各种类型的腹泻，根
耶耳森菌属可导致腹泻、食物中毒.伤寒 多数菌属是肠道正常菌群，也是条件致病菌
.
与人类感染有关的肠杆菌科细菌有31个菌属， 其中临床标本中常见的菌属有15种
克雷伯菌属
爱德华菌属
邻单胞菌属
变形杆菌属
普罗威登斯菌属 沙门菌属
耶尔森菌属
志贺菌属
沙雷菌属
肠杆菌属
埃希菌属
哈夫尼亚菌属
枸橼酸杆菌属 摩根菌属
多源菌属
.
三.微生物特性
1.G-杆菌 ， 多数有鞭毛、菌毛 2.发酵葡萄糖，兼性厌氧 3. 氧化酶阴性
4.还原硝酸盐为亚硝酸盐 5.触酶（＋） 6.营养条件不高，
.
四、鉴定流程图 涂片：G-b
－
氧化酶试验
+
肠杆菌科细菌、不动、嗜麦芽菌
非发酵菌、弧菌
双糖试验
F
O
肠杆菌科细菌
不动、嗜麦芽
苯丙，葡盐, 枸, 硝, 赖, 鸟, 氨对, 山, 肌,
菌 属
➢
产气肠杆菌(E. aerogenes)
➢ 阴沟肠杆菌(E. cloacae)
后增加7个菌 ➢ 阿氏肠杆菌
➢ 杰高维肠杆菌
➢ 何氏肠杆菌
➢ 坂崎肠杆菌
➢ 溶解肠杆菌
➢ 泰洛肠杆菌 ➢ 中间肠杆菌 ➢ 聚团肠杆菌 ➢ 河生肠杆菌生物群1
➢ 超压肠杆菌 ➢ 克沃尼肠杆菌 ➢ 考伯肠杆菌 ➢ 帕瑞勒肠杆菌
时易拉成丝
➢ 在肠道培养基上呈发酵 乳糖小菌落
➢ 在液体培养基内生长混 浊、浓厚、可见菌膜， 管底有粘性沉淀物
K. pneumoniae 菌落（血平板）
.
1.克雷伯菌属各种的鉴别
.
沙雷菌属（普通营养平板）
.
2.沙雷菌属各种的鉴别
.
肠 分类：现有13个种2个生物型
杆 原有7个种2个生物型
➢ 河生肠杆菌生物群2
阴 丙二酸盐 枸橼酸盐
山梨醇 多
气 肠
+
－
沟 肠
+
－－
+
－
+
源 肠
杆 产 山梨醇 杆 鼻 臭 哈 山梨醇
贩
阴杆
菌酸 克
+
－菌
硬 结
鼻 克
夫 尼
－
崎 +肠
沟菌 肠
雷 肺红 伯 炎色 菌 克沙
克 雷 伯
雷 伯 菌
亚 菌
格 阿拉伯糖
高 菲
－
+
杆 菌
杆 菌
雷雷
菌
伯菌
菌
肠 杆 菌
粘 质 沙
液 化 沙
雷雷
.
菌菌
2. 如阴性：应考虑是否有Vi抗原?
加
凝集：做O多价和单价凝集
热 或 去除Vi抗原
不凝集：可能为A～F以
十一.沙门菌属的特点
所有动物可分离到沙门菌,有2000多血清 可引起人类胃肠炎、败血症、伤寒
.
沙门菌属的特点
肥达反应
.
十二.志贺菌属的特点
急性菌痢---发烧,腹痛,脓血便,痢疾 志贺菌引起的菌痢死亡率高达20%
慢性菌痢----反复发作二个月
.
志贺菌属的特点
志贺菌属与大肠埃希菌区别:动力阴性, 赖氨酸阴性,分解葡萄糖不分解乳糖
志贺菌属与伤寒沙门菌区别:动力阴性 H2S阴性,能于志贺菌因子血清凝集
.
血清学分型
沙 常用血清：O多价血清（含A～F群）
门
O、H、Vi抗原因子血清
菌 方法：从临床标本中分离到菌株经纯培养后，符
属 合沙门 菌属生物学特性，则
采用A-F多价血清初步确定是否为Salmonella
1. 如阳性，即用O因子血清分群；再用第一相H 因子血清定型，也可用第二相辅助定型
八.苯丙氨酸葡萄糖酸盐阴性组的各属鉴别
.
分类
枸 枸橼酸杆菌属（Citrobacter）包括11个种
橼 弗劳地枸橼酸杆菌 (C. freundii)
酸 差异枸橼酸杆菌（C. diversus）
库斯枸橼酸杆菌
杆 无丙二酸盐枸橼酸杆菌 (C. amalonaticus) （C. koseri）
菌 布拉吉枸橼酸杆菌 （C. braakii）
菌
属 菌属特征
发酵葡萄糖产酸不产气
赖氨酸（－）
H2S（－） 尿素（—）
动力（—）
.
5.志贺菌属的鉴定
先用志贺多价血清与菌种凝集，如多价血清凝集为志 贺菌，多价里不包含鲍氏C16-20再进一步用因子血清凝 集而定群。
.
6、苯丙氨酸、葡萄糖酸盐阴性组菌属鉴别 双歧索引图
苯丙氨酸、葡萄糖酸盐