肠杆菌科细菌介绍

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大肠埃希菌
大肠埃希菌(E.coli)是埃希菌属典型代表。 ➢ 分布:婴儿出生后数小时即进入肠道,并终生伴随,是人体
肠道正常菌群的重要构成菌。 ➢ A:分解代谢产物,抑制痢疾杆菌等致病菌的生长
B:合成 ViB、ViK等,供人体吸收利用。 C:天然抗原, ➢ 致病:正常菌群------------肠道外感染
小肠粘膜——以免被肠蠕动、肠分泌液所清除 释放 肠毒素 由细菌的质粒DNA编码
不耐热肠毒素(heat labile enterotoxin,LT)
65℃30分钟失去活性
耐热肠毒素(heat stable enterotoxin,ST)
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100℃加热20分钟仍不被破坏
不耐热肠毒素(LT) B亚单位—— 受体:肠粘膜上皮细胞膜 表面的GM1神经节苷脂 A亚单位(毒性活性部分)
附于粘膜表面,与细菌的侵袭力有关,如:大肠杆菌的Ki抗 原和伤寒杆菌的Vi抗原。
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易变异
通过 接合
转导
溶源性转换
自发突变
引起
耐药性变异 毒力性变异 生化反应性变异
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肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别
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临床意义
致病物质 所致疾病
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致病物质
菌毛或菌毛样结构 荚膜或微荚膜 外膜蛋白 内毒素 外毒素
肠杆菌科细菌
主讲:戈红雨 2013-1-28
LOGO
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革兰氏阴性菌(Gram-negative)
革兰氏阴性菌泛指革兰氏染色反应呈红色的细菌 。在革兰氏染色实验中,首先添加了结晶紫( crystal violet),再添入另一种复染染料( 通常使用番红(safranin)),从而将所有的 革兰氏阴性菌染成红色或粉色。
1. 形态染色相似 革兰阴性杆菌 (两端钝圆,无芽胞。多数
细菌有周身鞭毛,能运动,个别细菌有荚膜。多数细菌有菌毛。 本科细菌为需氧和兼性厌氧菌,营养要求不高,在普通培养基上 生长良好,各种细菌菌落大小相似,直径2~3μm。)
2. 培养特性相同 普通培养基上生长良好 3. 生化反应活泼 发酵葡萄糖,氧化酶阴性,触酶阳性
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所致疾病
肠道感染 腹泻、食物中毒、旅行者腹泻、肠热症
肠道外感染 (志贺菌除外) 泌尿道感染、肺炎、脑膜炎、伤口化脓、菌血
症等
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治疗
在尚未有病原学报告时, 对泌尿道感染和腹膜炎--可按革兰氏阴性 杆菌联合使用抗生素, 对肺炎和败血症者--需兼顾革兰氏阴性和 阳性菌。
氨基糖苷类和氟喹诺酮类抗生素有较长的 抗生素后效应,与内酰胺类连用可增强抗 菌活性,延长抗菌作用时间,有利于感染 组织内获得有效的药效浓度。
➢质粒编码粘附素、使细菌吸附在肠粘膜细胞表面。 ➢分泌肠毒素、导致肠液大量分泌。 ➢婴儿水样腹泻。
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治疗
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第二节 志贺菌属 shigella
是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌, 通称痢疾杆菌dysentery bacteria
特殊菌株------------肠道内感染
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细菌特性
形态特征 培养特性 生化反应 抗原结构
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生物学性状
➢ G— 小杆菌,有鞭毛、菌毛、多数菌株有多糖微荚膜。
➢ 发酵多种糖类,产酸并产气,大部分菌株迅速发酵乳糖,但引起 肠内感染的菌株(致病性大肠杆菌)不发酵或缓慢发酵乳糖;在 肠道鉴别培养基上呈现有色菌落;IMViC++--,脲酶试验阴 性、硫化氢试验阴性。
42、44、3、86
疾病与症状
致病机制
旅行者腹泻,婴幼儿腹泻,LT 和(或)ST 肠毒素,大
水样便,恶心,呕吐,腹 量分泌液体和电解质
痛,低热
水样便,少量血便,腹痛, 质粒介导侵袭和破坏结肠粘
发热
膜上皮细胞
婴儿腹泻,水样便,恶心,粘附和破坏上皮细胞
呕吐,发热
水样便,大量出血,剧烈 SLT-I 或 SLT-II,中断蛋白质
腹痛,低热或无,可并发 合成
HUS、血小板减少性紫癜
婴儿持续性腹泻,呕吐, 集聚性粘附上皮细胞,阻止
脱水,低热
液体吸收
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1. 肠产毒性大肠杆菌 (ETEC)
ETEC 粘 定居因子(colonization factor) 附 又称粘附素(adhesin)
是细菌的特殊菌毛 CFAⅠ/CFAⅡ ( colonization factor antigenⅠ,Ⅱ)
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大肠埃希菌检验程序
标本 肠外感染:尿液;脓液;血液 肠道感染:粪便
分离培养 计数培养 纯培养 形态学检查 生化反应 毒素检测 血清学试验 报告结果
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卫生学指标
在环境和食品卫生学上,常被用作粪便污染的检测指标
大肠菌群指数 细菌总数
每1000ml水中大肠菌群数 每1ml或1g样品中细菌总数
我国的卫生标准:
通过这种测试我们可以区分两种细胞壁结构不同 的细菌。革兰氏阳性菌在反应后的除色溶液中将 呈现龙胆紫的颜色。
革兰氏阴性菌细胞壁中肽聚糖含量低,而脂类含 量高。当用乙醇处理时,脂类物质溶解,细胞壁 通透性增强,使结晶紫极易被乙醇抽出而 脱色;再度染上复染液番红的时候,便呈现红色 了。
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革兰氏阴性菌的病原能力通常与其细胞壁 组成相关,具体说来有脂多糖( lipopolysaccharide,又称为LPS或 者内毒素(endotoxin))层。在人体 中,LPS可以激发一种固有免疫反应( innate immune response)这种反 应是通过细胞素制造和免疫系统活化等来 描述其特征的。比如,红肿就是细胞素产 生并释放导致的。因为脂多糖在革兰氏阴 性菌的细胞墙表皮,所以大多数或旧型抗 生素都不能有效抑制此类细菌。
无外毒素---肠毒素,但有强的侵袭力(类似痢疾杆菌) 定位于结肠 侵入肠粘膜上皮细胞,生长繁殖,产生内毒素。
破坏细胞形成炎症和溃疡,
引起腹泻,呈脓血便 ,有里急后重, 临床症状酷似志贺菌感染,主要侵犯较大儿童、成人。
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3、肠致病性大肠杆菌( EPEC)
➢ 是婴儿腹泻的主要病原菌; ➢ 不产生肠毒素; ➢ 也无侵袭力; ➢ 但能粘附小肠粘膜上皮细胞,在小肠黏膜表面大量繁殖
种类:肠杆菌科、种类众多,30个菌属、 120多个菌种。
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包括 ——埃希菌属 ——志贺菌属 ——沙门菌属 ——耶尔森菌属 ——肠杆菌属 ——变形杆菌属 ——克雷伯菌属 ——摩根菌属 ——枸橼酸菌属 ——肠杆菌属 ——沙雷菌属 ——普罗2wei
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致病菌
肠道正常菌群 条件致病菌 医院感染
肠杆菌科的共同特性
,破坏微绒毛,导致刷状缘破坏,绒毛萎缩,上皮细胞 结构、功能受损,干扰细胞的再吸收,造成严重腹泻, 严重者可致死; ➢ 最近报导,可产生类志贺毒素。
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4、肠出血性大肠杆菌(EHEC)
亦称为Vero毒素大肠埃希菌
➢ 主要血清型:O157:H7 ➢ 主要毒力因子: ❖ 菌毛——质粒编码,介导细菌与肠粘膜细胞结合。 ❖ 志贺样毒素(Shiga-like toxin,SLT)
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➢ H抗原:即细菌的鞭毛蛋白;
❖ 不耐热,60℃ 30分钟即被破坏; ❖ 其特异性取决于多肽链氨基酸的组成、排列顺序和空间构型 ❖ IgG型抗体 ❖ H抗原可能与细菌在尿路中的播散有关。多数肠杆菌科细菌
表面有菌毛,为一种蛋白成分,与细菌对粘膜表面的粘附能 力有关
➢ 表面抗原
❖ 不耐热,60℃ 30分钟即被破坏; ❖ 可阻断O抗原与相应抗体的结合。 ❖ 荚膜抗原能抑制细菌与0抗血清的凝集,并可促使细菌易于粘
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周质
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胞质膜(Cytoplasmic membrane): 存在于细胞质中各膜结合 细胞器中的膜,包括核膜、内质网膜、高尔基体膜、溶酶体膜、线粒 体膜、叶绿体膜、过氧化物酶体膜等。
肽聚糖薄层,比革兰氏阳性菌要薄得多 外层膜(outer membrane),是在肽聚糖层之外的膜,内含有脂
多糖,核糖,O抗原 外层膜中还有孔蛋白,允许特定的分子通过 周质(periplasmic space): 指肽聚糖层和外层膜之间的空间 S层直接与外层膜相连,而非肽聚糖层 如果有鞭毛,表毛有四个支撑环而不是两个 没有磷壁酸(teichoic acids)或者脂磷壁酸 多糖骨架上有脂蛋白 大多数革兰氏阴性菌中含有胞壁质脂蛋白(Braun's lipoprotein
——噬菌体编码 ——细胞毒素 ➢ 主要临床症状: 出血性结肠炎、伴以剧烈腹痛、血便。
轻重不一。10%小于十岁患儿,有严重并发症,死亡率高
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E. coli O157:H7 – induced hemorrhagic colitis
in a three-year-old girl
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5、肠集聚性大肠埃希菌
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引起腹泻的大肠埃希菌
菌株
作用
部位
ETEC
6、8、15、25、 27、78、148、159
小肠
EIEC 大肠
28ac、29、112ac 124、136、143。。。
EPEC 小肠
2、55、86、111、 114、119、125-128、 142、158
EHEC 大肠
157、26、111
EAggEC 小肠
在婴儿、老年人:败血症、脑膜炎。
➢ 肠道内感染---------腹泻 ❖ 肠产毒性大肠杆菌(enterotoxigenic E. coli ETEC) ❖ 肠侵袭性大肠杆菌(enteroinvasive E. coli EIEC) ❖ 肠致病性大肠杆菌(enteropathogenic E. coli EPEC) ❖ 肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhagic E. coli EHEC) ❖ 肠集聚型大肠杆菌(enteroaggregative E. coli EAggEC)
≤ 3个大肠菌群/1L饮水 ≤ 100个细菌总数/1ml饮水
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重要的实验材料和研究对象
在分子生物学和基因工程实验中 也是重要的实验材料和研究对象
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致病物质
侵袭力 菌毛、K抗原 内毒素 肠毒素 耐热肠毒素(ST)
不耐热肠毒素(LT)
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致病性
➢ 肠道外感染-------机会性感染以化脓感染最为常见:泌尿系统感 染、伤口感染、腹膜炎、阑尾炎、胆囊炎。
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❖大肠埃希菌

❖肺炎克雷伯菌


❖沙门氏菌

❖痢疾志贺菌
❖阴沟肠杆菌
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埃希菌属鉴定
➢ 肠杆菌科:革兰氏染色阴性、触酶阳性、 氧化酶阴性、硝酸盐还原试验阳性。
➢ 定属和定种试验: ❖ KIA(K/AH2S-或A/AH2S-) ❖ IMViC(++--) ❖ MIU(-+-或++-) ❖ 多价血清和单价血清的凝集试验,确定血清型。 ➢ 致病性大肠杆菌: ❖ ETEC-毒素 ❖ EIEC-侵袭力试验。
➢ 三种抗原,血清型表示式-------- O:K:H O111:K58:H2
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大肠埃希菌革兰染色
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大肠埃希菌电镜图
大肠埃希菌菌落特征(血平板)
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大肠埃希菌菌落特征(MAC)
大肠埃希菌KIA(AA+-)MIU(++-)
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大肠埃希菌IMViC试验(++--) 右侧为对照(--++)
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大肠埃希菌抗原结构
,还原硝酸盐为亚硝酸盐,O/F试验为发酵型。 4. 抗原构造复杂 5. 抵抗力弱 6. 易变异
返回
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发酵型
O-F试验
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氧化型
产碱型
氧化酶试验 阳性:紫红色来自阴性:无色.硝酸盐还原试验
阳性:红色
阴性:淡黄色
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4、抗原构造复杂
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鞭毛抗原(H) K或Vi抗原 菌体抗原(O)
抗原结构: O抗原、H抗原、表面抗原
O抗原
❖ 耐热,100 ℃不被破坏。 ❖ 是肠道杆菌血清学分型和分群的主要抗原、如大肠杆菌
O157,霍乱弧菌O139。 ❖ IgM型抗体,凝聚反应 ❖ 0抗原可分三部分:①多糖侧链,肠杆菌科细菌具有不
同的糖成分,多糖的排列也不相同,决定了0抗原的特 异性;②核心部分,包括外核心区、骨架和核心糖脂, 肠杆菌科的核心部分相同;③类脂A,与内毒素有关, 可引起与内毒素血症相同的发热、炎症和血液动力学改 变的各种临床表现。
),其作用为通过共价键连接外层膜和多糖
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肠杆菌科
分布:是一大群寄居在人类和动物肠道中、 生物学性状近似的革兰氏阴性杆菌,可随人 和动物排泄物广泛分布于土壤、水和腐物中 。其中部分为致病菌,如:沙门菌属、志贺 菌属等;而多数为肠道正常菌群,在一定条件 下可以致病,故称为条件致病菌。
致病:正常菌群--条件致病菌--致病菌、引 起多器官、多组织的病变。
穿越细胞膜 活化 腺苷环化酶
ATP cAMP
水、电解质紊乱
腹泻
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LT 检测( CHO细胞培养)
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耐热肠毒素(ST)
鸟苷环化酶 GTP cGMP
水、电解质紊乱 腹泻
临床症状:轻度腹泻/严重的霍乱样症状 是婴幼儿和旅游者腹泻的重要病原菌
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ST检测(乳鼠灌胃试验)
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2、肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)
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