中药制剂的含量测定

聚酰胺
为常用的吸附剂，机理为通过与溶质形成氢键 而产生吸附作用。常用于黄酮类、酚、酸、醌 类化合物的分离。
硅藻土、纤维素
为常用的的亲水型填料，其原理为分配作用。 硅藻土和纤维素仅作为支持剂，是以水基质 液作为固定相，与水不相混溶的有机溶剂为 流动相，较亲脂的成分从固定相转移至流动 相中，而被洗脱。
线性范围
线性与范围可通过绘制标准曲线来确定。 例
精密吸取淫羊藿苷对照品溶液 (0.0464mg/ml)2、4、6、8、10µl注入 液相色谱仪，按拟定的色谱条件进行测定， 记录峰面积，测定结果下表。
对照品进 0.0928 0.1856 0.2784 0.3712 0.464 样量（μg）
色谱峰面 126195 238932 366405 482771 603967 积
硝酸-硫酸法：适用于大多数有机物质的破坏，无 机金属离子均氧化成高价态。与硫酸形成不溶性硫 酸盐的金属离子的测定，不宜采用此法。
硫酸-硫酸盐法：经本法破坏所得金属离子，多为 低价态。常用于含砷或锑的有机样品的破坏。
干法消化法
原理
将有机物灼烧灰化以达分解的目的，不适 用于含易挥发性金属（如汞、砷）有机样 品的破坏。
离子交换树脂
用于萃取样品中可解离化合物，如对于弱 酸性药物，可在中性或碱性条件下用阴离 子交换树脂，以水及有机溶剂清洗，再用 酸性溶液洗脱。
消化法
湿化消化 A 硝酸—高氯酸法 B 硝酸—硫酸法 C 硫酸-硫酸盐法
干法消化
湿法消化法
硝酸-高氯酸法：适用于血、尿、生物组织等生物 样品和含动植物药制剂的破坏，经破坏后所得无机 离子均为高价态离子，对含氮杂环类有机物破坏不 够完全。
如实验十三（P388页） 酸性染料比色法测 定华山参片总生物碱的含量，就是用此原理。
色谱法
常用色谱方法 吸附色谱 分配色谱 离子交换色谱 凝胶色谱
操作方式有柱色谱、薄层色谱、纸色谱 最常用的为柱色谱法
柱色谱常用的填料
硅胶 氧化铝 键合相硅胶 大孔树脂 聚酰胺 硅藻土 纤维素 离子交换树脂
中药制剂的含量测定
含量测定的目的
含量测定是质量标准的核心部分，它 是质量控制中最能有效考察产品内在 质量的项目，也是药品稳定性考察最 重要的依据。它能反映中药制剂中有 效成分、毒性成分、指标性成分含量 高低，可以衡量其制剂工艺和原料药 的质量优劣，从而保证中药制剂的质 量。
含量测定样品的预处理
硅胶、氧化铝
为传统的吸附剂，作用机制为溶质在吸附 剂表面的极性吸附作用。通常是当溶于有 机溶剂的样品加到柱上时非极性或极性低 的杂质先被洗出色谱柱，再用适当极性的 溶剂洗脱被测成分，而强极性的杂质仍保 留在柱上。
氧化铝能将黄酮类成份吸附在柱上，用于 生物碱、苷类等的测定。
如测定益母草浸膏中总生物碱含量时，使 用中性氧化铝柱，以乙醇洗脱生物碱，黄 酮类成分则保留在氧化铝柱上。
步骤 样品的粉碎 样品的提取 样品的分离净化
样品预处理的目的
将被测成分有效地从样品中释放出来， 并制成便于分析测定的稳定试样。
除去杂质、纯化样品，以提高分析方法 的重现性和准确性。
富集浓缩或进行衍生化，以测定低含量 被测成分。
使试样的形式及所用溶剂符合分析测定 的要求。
样品粉碎的目的
保证所取样品具有代表性 使样品中被测组分能更快地完全提
取出来
样品的提取方法
冷浸法 回流提取法 连续回流提取法 超声法 超临界流体提取法
样品的分离净化方法
沉淀法 蒸馏法 液-液萃取法
A 直接萃取法 B 离子对萃取法 色谱法 消化法
离子对萃取法
在适当的介质中，某些有机酸（碱）性物质 形成的离子与带相反电荷的离子（离子对试 剂）定量地结合成弱极性的离子对，而易溶 于有机溶剂，使之萃取分离。
硅胶适合于分离中性或酸性化合物，强烈 保留碱性化合物。
键合相硅胶
十八烷基键合相硅胶（简称C18或ODS）、 苯基、氰基键合硅胶相，其中十八烷基键合 相硅胶最常用，可用来分开脂溶性和水溶性 成分，如苷元和苷的分离。
大孔树脂
是最近十几年才出现的新型的高分子分离材 料，可分为极性和非极性型。极性型为丙烯 酰胺聚合物，对极性化合物有相对强的吸附 力，如商品XAD-7、8等。非极性型为苯乙 烯和二乙烯苯的共聚物，对非极性水溶性成 分有相对强的吸附力，如商品XAD-1、2、 4、5、D101，D101是最常用的
Y=1292438.5776X+3839.1000 r=0.9998 样品进样量在0.0928～0.464μg范围内，淫羊藿苷峰面积 与进样量呈现良好的线性关系。
精密度
指用该法经多次取样测定同一个均匀样品， 各测定值彼此接近的程度。
例 精密吸取淫羊藿苷对照品液 (23.2μg/ml)10µl注入液相色谱仪，连续进 样5次，测得淫羊藿苷峰面积的相对标准偏差， 结果见下表。
例 取已知含量的样品(16.361mg/g)6份，每份约 0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，每份依次精 密加入淫羊藿苷对照品溶液(0.3272mg/ml)4、4、 5、5、6、6ml，再加甲醇至100ml，照拟定的供 试品制备方法制备加样回收供试品溶液，精密吸取 10µl注入色谱仪中，测定峰面积，按下式计算回 收率，结果见下表。
实验次数
1 2 3 4 5
峰面积值
296661
平均峰面积 值
RSD（%）
295460
295382 295841.2 295117
0.24
296586
重复性
同一批号样品重复取样5次，按供试液制 备方法制备成5份供试液，测定其含量， 计算RSD%，求得含Leabharlann Baidu平均值。
准确度
是指测定结果与真实值或参考值接近的程度，表示 分析方法测量的正确性，一般以回收率来表示。在 考察准确度时常用加样回收法来计算回收率。
含量测定方法的效能指标
选择性 线性范围 精密度 重复性 准确度 耐用性
选择性
选择性是指在样品中有其他组分共存时， 该分析方法对被测物准确而专属的测定能 力。在中药制剂中，考察一个分析方法的 选择性时，主要是考察共存组分是否对被 测组分的测定是否有干扰。常用阴性对照 法来考察分析方法的选择性。