二班四组氯霉素含量测定
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紫外分光光度法测定氯霉素滴眼液的含量
一.实验原理:已知氯霉素在278nm 处有最大吸收峰,根据朗伯-比尔定律物质的含量在一定条件下与它最大吸收峰吸收程度成正比,由此可得该物质的含量。
二.实验仪器与药品:氯霉素滴眼液[含量为8ml/25mg],紫外分光光度计754,水 ,溶液配制器材。
三.实验步骤
1.吸收曲线的制作:移取氯霉素标准液适量,稀释至约20μg/ml 溶液,在200,210,220,230,240,250,260,265,270,271,272,273,274,275,276,277,278,279,280,290,300,310,320,330,350,360,380,400nm 测吸光度。做出吸收曲线,选定最大吸收峰位置作为测定波长。 吸光度
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
1.4
200220240260
280300320波长系列1
2.工作曲线的制作:精密吸取氯霉素标准品适量,按氯霉素每10mg 加乙醇1ml 使其溶解,加水制成1mg/ml 溶液。精密吸取此液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml 分别置于100ml 容量量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀。以水为空白,用实际提供的分光光度计
在已测的最大吸收峰波长处测定吸光度。记录数据,并画出工作
曲线。
4.氯霉素样品测定:精密量取氯霉素滴眼液适量,加水稀释
成浓度为20μg/ml溶液,另取氯霉素标准品适量,精密称定,按
氯霉素每10mg加乙醇1ml溶解,加水定量稀释成浓度为20μ
g/ml的溶液,在已测得最大吸收峰波长处分别测定二者吸收度,
参照工作曲线计算,即得氯霉素滴眼液氯霉素的含量。
四.数据的记录与处理
波长/nm 200 210 220 230 240 250 260 265 吸光度 1.229 0.839 0.539 0.314 0.327 0.489 0.662 0.714 波长/nm 270 271 272 274 276 278 280 290 吸光度0.742 0.745 0.742 0.738 0.726 0.710 0.688 0.622
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 样品
标准品浓
度ug/ml
吸光度0.195 0.378 0.564 0.745 0.924 0.353
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
1
0123
456样品吸光度系列1
样品吸光度为0.353. 浓度为18.78mg/8ml
五.注意事项
1.开机需预热20min 。
2.仪器使用前由于机械振动、温度变化、灯丝变形等导致示数不准确,因此需检查校正。
3.每改变一次入射光的波长时,都应调节参比溶液的透射比为100%。