二班四组氯霉素含量测定

紫外分光光度法测定氯霉素滴眼液的含量

一．实验原理：已知氯霉素在278nm 处有最大吸收峰，根据朗伯-比尔定律物质的含量在一定条件下与它最大吸收峰吸收程度成正比，由此可得该物质的含量。

二．实验仪器与药品：氯霉素滴眼液[含量为8ml/25mg],紫外分光光度计754，水 ，溶液配制器材。

三．实验步骤

1.吸收曲线的制作：移取氯霉素标准液适量，稀释至约20μg/ml 溶液，在200，210，220，230，240，250，260，265，270，271，272，273，274，275，276，277，278，279，280，290，300，310，320，330，350，360，380，400nm 测吸光度。做出吸收曲线，选定最大吸收峰位置作为测定波长。 吸光度

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

1.4

200220240260

280300320波长系列1

2.工作曲线的制作：精密吸取氯霉素标准品适量，按氯霉素每10mg 加乙醇1ml 使其溶解，加水制成1mg/ml 溶液。精密吸取此液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml 分别置于100ml 容量量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。以水为空白，用实际提供的分光光度计

在已测的最大吸收峰波长处测定吸光度。记录数据,并画出工作

曲线。

4.氯霉素样品测定：精密量取氯霉素滴眼液适量，加水稀释

成浓度为20μg/ml溶液，另取氯霉素标准品适量，精密称定，按

氯霉素每10mg加乙醇1ml溶解，加水定量稀释成浓度为20μ

g/ml的溶液，在已测得最大吸收峰波长处分别测定二者吸收度，

参照工作曲线计算，即得氯霉素滴眼液氯霉素的含量。

四.数据的记录与处理

波长/nm 200 210 220 230 240 250 260 265 吸光度 1.229 0.839 0.539 0.314 0.327 0.489 0.662 0.714 波长/nm 270 271 272 274 276 278 280 290 吸光度0.742 0.745 0.742 0.738 0.726 0.710 0.688 0.622

0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 样品

标准品浓

度ug/ml

吸光度0.195 0.378 0.564 0.745 0.924 0.353

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

0.7

0.8

0.9

1

0123

456样品吸光度系列1

样品吸光度为0.353. 浓度为18.78mg/8ml

五.注意事项

1.开机需预热20min 。

2.仪器使用前由于机械振动、温度变化、灯丝变形等导致示数不准确，因此需检查校正。

3.每改变一次入射光的波长时，都应调节参比溶液的透射比为100%。