真菌 PPT课件

四、微生物学检查
1.直接镜检：墨汁法 2.培养检查 沙保培养基：酵母型菌落 3.生化反应:尿素酶阳性、酚氧化酶试验 糖同化及发酵试验
第三节 曲霉菌（Aspergillus）
少数属于条件致病菌，以熏烟色曲霉菌（A. fumigatus）最为常见
致病性 – 侵犯机体许多部位，所致疾病有直接感染、变 态反应及曲霉菌毒素中毒等类型 – 肺曲霉菌病 – 全身性曲霉菌病 – 中毒与致癌
3.玻片培养-小培养
– 适用于浅部真菌培养
四、鉴定
1.糖（醇）类发酵试验 2.同化碳源试验 鉴别酵母菌 3.同化氮源试验 鉴别酵母菌 4.明胶液化试验 鉴别着色真菌、放线菌等 5.尿素分解试验 6.测定淀粉样化合物 7.牛乳分解试验 酸化、凝固、胨化、碱化
第二十三章 浅部感染真菌
浅部感染真菌：引起皮肤、粘膜和皮下 组织感染的真菌
二、直接检查
（一）显微镜检查 1.不染色标本 （1）标本处理
– 10%~40% KOH液处理标本（常用10%） – 标本长期保存：加入10%~25%甘油 – 适用对象：致密、不透明的标本
（2）检查方法：检查菌丝及孢子
2.染色标本的检查 （1）革兰染色：各种真菌均为阳性 （2）乳酸酚棉兰染色：真菌染成蓝色 （3）墨汁：检查新型隐球菌，为负染法 （4）瑞氏染色或姬氏染色
Imperfecti）
第二节 生物学性状
一、形态特性
真菌分为单细胞和多细胞两大类
单细胞真菌
多细胞型真菌
– 酵母型真菌（Yeast） – 霉菌（Mold）
– 类酵母型真菌
– 由菌丝和孢子组
（Candida albicans）
成
单细胞真菌
圆形、椭圆形 无菌丝，有假菌丝体
多细胞真菌
菌丝（hypha） 孢子（Spore）
第二十二章
真菌学总论
概念：真菌（fungus）是一类有细胞壁 和典型细胞核结构，但不含叶绿素，不分 根、茎、叶，能进行无性或有性繁殖的一 类真核细胞性微生物。
重要的医学真菌
包括4个亚门
子囊菌亚门（ Ascomycota ） 担子菌亚门（ Basidiomycota ） 接合菌亚门（ Zygomycota ） 半知菌亚门（ Mitosporic Fungi ， Fungi
表面感染真菌
叠瓦癣
花斑癣
糠秕孢子菌毛囊炎
皮下组织真菌感染 Subcutaneous Mycoses
经外伤感染皮下，一般只侵犯局部，也 可通过淋巴管扩散至周围组织
种类有孢子丝菌和着色真菌
（一）着色真菌
一般经外伤侵入人体，感 染多发生于皮肤暴露部位， 感染多发生于颜面、下肢、 臀部等暴露部位，病损皮 肤呈境界鲜明的暗红色或 黑色区，故称着色真菌病 (chromomycosis) 。
芽管形成试验
快速显色培养基
C. albicans (green)白念 C. tropicalis (blue)热带 C. parapsilosis (white)近平滑 C. glabrata (pink). 光滑/克柔
第二节 新生隐球菌 Cryptococcus neoformans
一、分类 属隐球菌属，包括17个种和8个变种，其中
伤口接触 淋巴管的慢性炎症 慢性肉芽肿 深部感染
第二十四章 深部感染真菌 Systemic Mycoses
深部感染真菌是指可引起机体深部组织和 内脏疾病的一群深在性真菌
致病性真菌、条件致病性真菌
条件深部真菌感染
Conditional Deep Infection Fungus
Candida albicans（白假丝酵母菌） Cryptococcus neoformans（新生隐球菌） Aspergillus（曲霉菌） Mucor（毛霉菌）
代表菌有裴氏着色真菌 (Fonsecaea pedrosoi) ， 卡氏着色真菌 (Cladosporium carrionii) 等
（二）申克孢子丝菌
Sporotrichum schenchii
属于腐生性真菌，广泛存在于土壤、木材 及植物表面等，为双相性真菌，在组织中 呈酵母型，在沙保培养基中呈菌丝型
第一节 白假丝酵母菌
一、分类 属假丝酵母菌属Saccharomyces 本属菌有81个种，其中有11种对人有
致病性,其中以白假丝酵母菌为最常 见的致病菌
二、临床意义
机体抵抗力下降或菌群失调是其侵入机体 的主要原因
念珠菌病（Candidiasis）
皮肤、粘膜感染：鹅口疮、阴道炎 内脏感染：肺炎、肾炎、膀胱炎 中枢神经系统感染：脑膜炎、脑膜脑炎
种类
– 表面感染真菌：角层癣菌 – 皮肤癣真菌：毛癣菌属、表皮癣菌属和小孢
子菌属 – 皮下组织感染真菌：孢子丝菌、着色真菌
第一节 毛 癣 菌 属 （Trichophyton）
毛癣菌属有20余种，其中14种能引起人和动 物的感染。
临床上常见的有
– 红色毛癣菌、须癣毛癣菌、许兰毛癣菌、紫色毛 癣菌、断发毛癣菌
5.真菌菌落
酵母型菌落（yeast colony）：湿润、柔 软而致密，形态似一般细菌菌落
–类酵母型菌落（yeast-like colony）
霉菌型菌落（filamentous colony）：也 称为丝状菌落
青霉菌 曲霉菌
真菌的繁殖方式
无性繁殖（asexual reproduction） 有性繁殖（sexual reproduction）
表皮癣菌：菌落初 为白色鹅毛状,以 后变为黄绿色粉末 状。粗棒状薄壁大 分生孢子。菌丝球 拍状
第三节 小 孢 子 菌 属
我国常见的有铁锈色小孢子菌、石膏 样小孢子菌和狗小孢子菌等。
小孢子菌属感染皮肤和毛发，很少感 染甲板。
小孢子癣菌：菌落 为灰色、橘红色或 棕黄色，厚壁大分 生孢子，菌丝有结 节状、梳状和球拍 状
三、生物学特性
白假丝酵母菌呈圆形或卵圆形，直径 3~6μm
革兰阳性，着色不均匀 出芽方式繁殖，在组织内可见芽生孢子、
假菌丝， 在玉米粉培养基中可产生厚膜孢子。
四、 微生物学检验
1.标本直接检查
直接镜检：革兰染色，芽生孢子、假菌丝 抗原检测 核酸检测
2.分离培养与鉴定 （1）分离培养
分生孢子头和足细胞组成
黄曲霉菌
黑曲霉菌
毛霉菌
毛 霉 菌 (Mucor)属 接合菌亚门
胞融合，经减数分裂形成
无性孢子种类
分生孢子（conidium）
– 由生殖菌丝末端的细胞分裂或收缩形成 – 包括大分生孢子和小分生孢子
叶状孢子（thallospore）
– 菌丝内细胞直接形成 – 包括芽生孢子、关节孢子、厚膜孢子
孢子囊孢子（sporangiospore）
生殖菌丝末端细胞分 裂或收缩形成；也可 从菌丝侧面出芽形成
可引起发癣、体癣、甲癣
毛癣菌：菌落灰白、 红、橙或棕色,表面呈 绒毛状、粉粒状或蜡 样。大分生孢子细长 棒状薄壁。菌丝有螺 旋状、球拍状、鹿角 状和结节状
第二节 表 皮 癣 菌 属
表皮癣菌属（Epidermophyton）目前只 有一个种，即絮状表皮癣菌（E.floccosum）
絮状表皮癣菌是一种常见的皮肤癣菌，可 引起皮肤感染如股癣、足癣、体癣、手癣 和甲癣，不感染毛发。
仅新生隐球菌及其变种具有致病性 环境腐生菌 新生隐球菌的发病率越来越高
二、临床意义
1.传播途径：呼吸道传播 2.所致疾病：亚急性慢性脑膜炎
肺部感染 皮肤粘膜损害 3.好发人群：免疫力低下者（AIDS）
三、生物学特性
1.圆形或卵圆形，直径一般在4~6μm 2.有荚膜、不形成假菌丝 3.非致病性隐球菌无荚膜 4.培养：沙保培养基上形成酵母样菌落
含动物蛋白培养基
多细胞型： 普通培养基25℃ 丝状菌
沙保氏培养基25℃
二相性真菌（Dimorphism）
二、培养特性
1.培养基
– 沙保培养基（Sabouraud medium）
• 鉴定真菌以沙保培养基形成的菌落形态为准
2.最适酸碱度为pH 4～6 3.最适的温度为22℃～28℃
– 深部感染真菌在37℃下生长良好 4.需较高的湿度和氧气
（二）抗原检测
采用免疫学方法检测真菌抗原，常用的方 法有胶乳凝集试验、ELISA、半定量放射 免疫测定法。
三、分离培养
培养方法 1.平皿培养-大培养
– 优点：易于观察菌落形态 – 缺点：水分易蒸发；容易造成环境污染 – 适用于生长繁殖较快的深部真菌的培养
2.大试管培养
– 适用于皮肤癣菌的培养及菌种保存
大分生孢子的形态
芽生孢子
芽生孢子： 菌丝体细胞出 芽生成
厚膜孢子： 由菌丝内胞浆 浓缩和胞壁增 厚形成
厚膜孢子
关节孢子
关节孢子：
由菌丝体细胞分化形 成长方形节段链状排 列，胞壁增厚形成
源自文库
孢子囊孢子
二相性真菌
– 有些真菌因环境条件改变，可有一种形态 转变为另一种形态
机体内寄生37℃
单细胞型：
酵母菌
1.菌丝（hypha）
概念：由孢子生长嫩芽，长出芽管，芽 管逐渐延长呈丝状称为菌丝
分类
– 按功能：营养菌丝、气生菌丝、生殖菌丝 – 有无横隔：有隔菌丝、无隔菌丝 – 按形状：螺旋状、球拍状、鹿角状等
2.孢子（Spore）
真菌的繁殖体，由生殖菌丝产生
– 无性孢子：菌丝上的细胞分化或出芽形成 – 有性孢子：由同一菌体或不同菌体上的2个细
三、变异性与抵抗力
对干燥、阳光、紫外线及常用消毒剂有强 抵抗力
不耐热，菌丝与孢子60℃ 1小时均可杀死 2﹪石炭酸、10%甲醛、0.1%升汞、2.5%碘
酊敏感 抗真菌药物
–灰黄霉素、制霉菌素B、二性霉素B、氟康唑和 酮康唑
–对抗生素不敏感
第二节 真菌感染的病原学诊断
一、临床标本采集和检验流程 （一）临床标本类别 毛发、皮屑、指（趾）甲、分泌物、脓、血 （二）采集标本注意事项 1.采集合适的标本 2.用药前采集 3.采集的标本量要足 4.严格无菌操作 5.立即送检
沙保培养基：奶油色、类酵母样菌落 （2）鉴定
1）芽管形成试验
– 标本接种于0.2~0.5ml人或动物血清中
2）厚膜孢子形成试验：
– 接种玉米粉聚山梨醇-80琼脂培养基
3）糖同化和糖发酵试验：
– 葡萄糖、麦芽糖、乳糖
4）TZC试验：
– 白假丝酵母菌：不变色 – 热带假丝酵母菌：深红色或紫色
5）动物试验：家兔、小鼠