转基因动物研究概况PPT幻灯片
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9
头型
头大，额皮中部 隆起成块，俗称
“盖碗”
嘴筒长直
10
头中等大，面微凹
头中等大，面直
11
猪的耳型描述
耳大下垂
耳大下垂
12
耳小而立
耳小向前平伸，
13
耳型
耳特大，下垂
耳小竖立
14
耳型
耳中等大，竖立
耳小向前平伸
15
体型
腹大下垂，背平
腹大拖地，背凹
16
体型
腹大下垂，不拖地
腹大下垂，不拖地
17
34
为了能够人为地控制外源性猪生长激素基因的表达，采取了 基因融合表达的战略，用羊的重金属螯合蛋白 MT－1基因启 动子来驱动猪的生长激素结构基因表达.
1、分离了2.5kb的一个猪生长激素基因片段，除去了它的5ˊ端和3ˊ端调控 序列，只保留它的4个外显子和3个内含子。
2、将这个2.5kb的猪生长激素基因融合到长度为1.1kb羊MT－1基因启动 子的下游,构建成oMT／pGH融合基因，是目的基因的基本表达结构。
30
此外一些与猪生产性能有关的基因
• 猪应激敏感基因(RYR1), Ch6, PSE肉, 应激 • 雌激素受体基因(ESR), Ch1, 产仔数 • 促卵泡素β亚基基因(FSHβ), Ch2，产仔数 • RN基因, Ch15, 酸肉, Napole产量 • 黑素皮质激素受体4(MC4R)基因, Ch1, ADG,BF,FI • 心脏脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因, Ch6, IMF • 脂肪细胞脂肪酸结合蛋白(A-FABP)基因, Ch4, IMF • 猪肌肉生长抑制素(MYOG), Ch9, 瘦肉率
• 水份、 • 蛋白质、 • 肌内脂肪、 • 大理石纹 • 其它指标
25
3、猪是单胃动物，饲料的主要成份是粮食和 块根、块茎。所以，猪的饲料和人的口粮是 竞争性关系，不是互补的关系。养猪太多和 猪的饲料转化效率太低，将会给种植业带来 很大负担。
26
27
养猪主产区主要分布在粮食主产区应为比较 合理的布局
28
4、在制订“863”计划生物技术领域“七五”计划 时，很自然的把利用转基因技术生产生长速度快、 饲料报酬高的基因工程猪作为动物生物技术的首 要课题。
5、课题的目标是通过10-15年的研究，利用在猪体 内表达外源性猪的生长激素基因，生产出增重速 度提高20％，饲料消耗节约15％，并能保持我国 猪肉特有品质的基因工程猪品种。
22
眼肌面积测量
最后肋骨处 背最长肌
横断面面积， 用硫酸纸描绘
眼肌面积 （2次）
23
眼肌面积测量2
• 用硫酸纸描绘眼肌面 积（2次），用求积仪 或方格计算纸求出眼 肌面积（cm2）
• 或用下列公式：眼肌 面积（cm2）=眼肌高 度（cm）×眼肌宽度 （cm）×0.7
眼肌高度
眼肌宽度 24
肉质性能
四肢
外展
内展 X型
18
几个概念
• 活体重 • 胴体重 • 瘦肉率 • 眼肌 • 肉质性能
19
猪的宰前活重（kg)
• 宰前12小时停食称重 • 屠宰日龄按当地习惯
并注明 •
20
胴体重
• 胴体重：去除头、 • 蹄、尾、内脏、 • 包括板油、肾的 • 左右两半胴体 • 总重。
21
来自百度文库
瘦肉率
• 用手工剥离半胴体,分 成瘦肉、脂肪、皮、 骨四部分，分别称重， 再相加，作为100%； （不计算分割过程中 的损耗，不包括板油、 肾 ）。分别计算瘦肉、 脂肪、皮、骨所占的 比例。
转基因动物前景广阔
➢提高动物的生长速度 ➢改善畜产品的品质 ➢珍稀药用蛋白的生产
（生物反应器或乳房生物反应器） ➢提供器官移植的供体
1
2
第一节 猪的基因工程育种
一、立项背景和研究目标
1、我国是传统的养猪大国，是世界上养猪最 多的国家。
就全国而言,生猪存栏和出栏基本保持平稳发展, 存栏和出栏呈现同步发展的趋势。2008年3月存栏 4.1亿头，6月达到4.7亿头。能繁母猪比重超过12%。
3
不同品种猪-毛色
黑色
毛色为黑白花、除头、耳、背、
腰、臀为黑色外，其余均为 白色，黑白交界处有4～5cm
的黑皮白毛的灰色带 6
毛色为中间白，两头乌 为特征。又称“两头乌”。但也
有少数猪在背部有黑斑。
体毛黑色， 四肢末端为白色
7
全白
棕红色
8
被毛黑色，在肩和 前肢有一条白带围绕
被毛灰白，夹有黑斑， 杂有部分红色。
第一、是没有异种蛋白质表达，生产出的猪仍 然是纯天然的；
第二、基因表达适度和可控性强，表现在生产 出生长速度比对照快70％的转基因猪，而健康状 况同正常猪没有差别；
目的基因的分离和表达载体的构建 以猪生长激素为例
克隆的猪生长激素基因全长约5.0kb，由4个外显子和3 个内含子以及5ˊ端和3ˊ端调控序列组成。
猪生长激素Genomic基因结构序列被置于羊MT基因启动 子控制之下，转基因在猪体内将受重金属离子诱导而表达。 5′MAR有屏蔽相邻基因影响的作用，而3′端增加微卫星旨在 提高整合率。
• 当前我国生猪生产主要集中在四川盆地、黄淮流 域玉米、小麦主产区、东北玉米主产区和长江中 下游水稻主产区等四大地区。
• 从畜牧经济学角度出发，养猪业为耗粮型畜牧业， 需要消耗大量的玉米等粮食作物，为降低成本， 将粮食就地转化为畜产品，以提高农作物附加值， 养猪主产区主要分布在粮食主产区应为比较合理 的布局。
29
二、目的基因的分离和表达载体的构建
在我国设立转基因猪的研究课题之前，已有 美国、英国和澳大利亚等三个国家设立了同样的 课题。美国利用现成的人生长激素基因作为目的 基因，英国利用牛的生长激素基因，澳大利亚则 构建了含有猪生长激素基因cDNA片段和染色体 组基因片段的混合结构（mini-gene）。
31
兰尼定受体(RYR1)/氟烷基因(Hal)
1843C>T突变位点是造成猪应激综合症的主效基因位点。
Hha Ⅰ酶切
对于Hal基因，淘汰nn、Nn个体，留用NN个体。 32
雌激素受体基因(ESR)
ESR基因是影响猪产仔数的主效基因
发现BB 型比AA 型猪头胎总产仔数高3.37 头 PvuⅡ酶切 33
3、为了基因的整合效率，还在融合基因的下游3’增加了一段猪的微卫星 DNA序列；
4、而在它的5ˊ端，又装上鸡溶菌酶基因的MAR序列，目的是为了克服或 者更准确地说是减少基因表达时受邻近基因的干扰，便于从体外调控 基因的表达。
35
36
我国是首先使用猪的染色体组基因生产转基因猪 的，实践证明，这种结构是有很多优点的。
头型
头大，额皮中部 隆起成块，俗称
“盖碗”
嘴筒长直
10
头中等大，面微凹
头中等大，面直
11
猪的耳型描述
耳大下垂
耳大下垂
12
耳小而立
耳小向前平伸，
13
耳型
耳特大，下垂
耳小竖立
14
耳型
耳中等大，竖立
耳小向前平伸
15
体型
腹大下垂，背平
腹大拖地，背凹
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体型
腹大下垂，不拖地
腹大下垂，不拖地
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为了能够人为地控制外源性猪生长激素基因的表达，采取了 基因融合表达的战略，用羊的重金属螯合蛋白 MT－1基因启 动子来驱动猪的生长激素结构基因表达.
1、分离了2.5kb的一个猪生长激素基因片段，除去了它的5ˊ端和3ˊ端调控 序列，只保留它的4个外显子和3个内含子。
2、将这个2.5kb的猪生长激素基因融合到长度为1.1kb羊MT－1基因启动 子的下游,构建成oMT／pGH融合基因，是目的基因的基本表达结构。
30
此外一些与猪生产性能有关的基因
• 猪应激敏感基因(RYR1), Ch6, PSE肉, 应激 • 雌激素受体基因(ESR), Ch1, 产仔数 • 促卵泡素β亚基基因(FSHβ), Ch2，产仔数 • RN基因, Ch15, 酸肉, Napole产量 • 黑素皮质激素受体4(MC4R)基因, Ch1, ADG,BF,FI • 心脏脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因, Ch6, IMF • 脂肪细胞脂肪酸结合蛋白(A-FABP)基因, Ch4, IMF • 猪肌肉生长抑制素(MYOG), Ch9, 瘦肉率
• 水份、 • 蛋白质、 • 肌内脂肪、 • 大理石纹 • 其它指标
25
3、猪是单胃动物，饲料的主要成份是粮食和 块根、块茎。所以，猪的饲料和人的口粮是 竞争性关系，不是互补的关系。养猪太多和 猪的饲料转化效率太低，将会给种植业带来 很大负担。
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27
养猪主产区主要分布在粮食主产区应为比较 合理的布局
28
4、在制订“863”计划生物技术领域“七五”计划 时，很自然的把利用转基因技术生产生长速度快、 饲料报酬高的基因工程猪作为动物生物技术的首 要课题。
5、课题的目标是通过10-15年的研究，利用在猪体 内表达外源性猪的生长激素基因，生产出增重速 度提高20％，饲料消耗节约15％，并能保持我国 猪肉特有品质的基因工程猪品种。
22
眼肌面积测量
最后肋骨处 背最长肌
横断面面积， 用硫酸纸描绘
眼肌面积 （2次）
23
眼肌面积测量2
• 用硫酸纸描绘眼肌面 积（2次），用求积仪 或方格计算纸求出眼 肌面积（cm2）
• 或用下列公式：眼肌 面积（cm2）=眼肌高 度（cm）×眼肌宽度 （cm）×0.7
眼肌高度
眼肌宽度 24
肉质性能
四肢
外展
内展 X型
18
几个概念
• 活体重 • 胴体重 • 瘦肉率 • 眼肌 • 肉质性能
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猪的宰前活重（kg)
• 宰前12小时停食称重 • 屠宰日龄按当地习惯
并注明 •
20
胴体重
• 胴体重：去除头、 • 蹄、尾、内脏、 • 包括板油、肾的 • 左右两半胴体 • 总重。
21
来自百度文库
瘦肉率
• 用手工剥离半胴体,分 成瘦肉、脂肪、皮、 骨四部分，分别称重， 再相加，作为100%； （不计算分割过程中 的损耗，不包括板油、 肾 ）。分别计算瘦肉、 脂肪、皮、骨所占的 比例。
转基因动物前景广阔
➢提高动物的生长速度 ➢改善畜产品的品质 ➢珍稀药用蛋白的生产
（生物反应器或乳房生物反应器） ➢提供器官移植的供体
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第一节 猪的基因工程育种
一、立项背景和研究目标
1、我国是传统的养猪大国，是世界上养猪最 多的国家。
就全国而言,生猪存栏和出栏基本保持平稳发展, 存栏和出栏呈现同步发展的趋势。2008年3月存栏 4.1亿头，6月达到4.7亿头。能繁母猪比重超过12%。
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不同品种猪-毛色
黑色
毛色为黑白花、除头、耳、背、
腰、臀为黑色外，其余均为 白色，黑白交界处有4～5cm
的黑皮白毛的灰色带 6
毛色为中间白，两头乌 为特征。又称“两头乌”。但也
有少数猪在背部有黑斑。
体毛黑色， 四肢末端为白色
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全白
棕红色
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被毛黑色，在肩和 前肢有一条白带围绕
被毛灰白，夹有黑斑， 杂有部分红色。
第一、是没有异种蛋白质表达，生产出的猪仍 然是纯天然的；
第二、基因表达适度和可控性强，表现在生产 出生长速度比对照快70％的转基因猪，而健康状 况同正常猪没有差别；
目的基因的分离和表达载体的构建 以猪生长激素为例
克隆的猪生长激素基因全长约5.0kb，由4个外显子和3 个内含子以及5ˊ端和3ˊ端调控序列组成。
猪生长激素Genomic基因结构序列被置于羊MT基因启动 子控制之下，转基因在猪体内将受重金属离子诱导而表达。 5′MAR有屏蔽相邻基因影响的作用，而3′端增加微卫星旨在 提高整合率。
• 当前我国生猪生产主要集中在四川盆地、黄淮流 域玉米、小麦主产区、东北玉米主产区和长江中 下游水稻主产区等四大地区。
• 从畜牧经济学角度出发，养猪业为耗粮型畜牧业， 需要消耗大量的玉米等粮食作物，为降低成本， 将粮食就地转化为畜产品，以提高农作物附加值， 养猪主产区主要分布在粮食主产区应为比较合理 的布局。
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二、目的基因的分离和表达载体的构建
在我国设立转基因猪的研究课题之前，已有 美国、英国和澳大利亚等三个国家设立了同样的 课题。美国利用现成的人生长激素基因作为目的 基因，英国利用牛的生长激素基因，澳大利亚则 构建了含有猪生长激素基因cDNA片段和染色体 组基因片段的混合结构（mini-gene）。
31
兰尼定受体(RYR1)/氟烷基因(Hal)
1843C>T突变位点是造成猪应激综合症的主效基因位点。
Hha Ⅰ酶切
对于Hal基因，淘汰nn、Nn个体，留用NN个体。 32
雌激素受体基因(ESR)
ESR基因是影响猪产仔数的主效基因
发现BB 型比AA 型猪头胎总产仔数高3.37 头 PvuⅡ酶切 33
3、为了基因的整合效率，还在融合基因的下游3’增加了一段猪的微卫星 DNA序列；
4、而在它的5ˊ端，又装上鸡溶菌酶基因的MAR序列，目的是为了克服或 者更准确地说是减少基因表达时受邻近基因的干扰，便于从体外调控 基因的表达。
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36
我国是首先使用猪的染色体组基因生产转基因猪 的，实践证明，这种结构是有很多优点的。