凝血因子v活性测定
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Xiangya Hospital of Central south university
一、原理
将乏V 因子血浆和稀释的病人血浆,凝血酶原酶一起孵育,可使外源性凝血途径激活。记录从加凝血酶原酶到血块形成所需时间。
二、标本准备
用枸橼酸钠抗凝管采集新鲜静脉血约3ml (抗凝剂与血液比约为1:9),混匀后及时分离血浆(2500rpm/min 离心10min ),避免溶血,血浆应在2小时内进行测定,如果不能在2小时内完成检测,应将血浆低温保存(-在-20℃中保存2周)。
三、试剂准备
试剂存储于2-8℃冰箱,开盖后上机按图标,打开试剂装载画面。等待试剂装载位前方的信号灯变为绿色,然后将所需要的试剂托架插入仪器(确保试剂条码处于中缝中且转到左边。
2)每瓶试剂的条码号、产品名称、批号会自动识别,选择
“Vial #”旁边的
图标,打开现有试剂瓶号,选择适当瓶号,点击图标确认,试剂位会显示试剂的名称。
3)如有试剂显示为红色,取出带有要更换试剂的试剂托架,
然后取下要更换的试剂瓶,更换新的试剂重新扫描条码
四、操作步骤
1. 开机
打开仪器开关和操作电脑,双击电脑桌面上的Destiny MAX GUI
图标并输入登录密码,软件启动,在触摸屏上显示主菜单。
2. 开机检查和日常保养
按图标打开保养菜单,进行开机检查和日常保养
装载质控并测试
1.按打开“试剂装载” 窗口。将按要求复溶
好的质控品装载到相应的质控/定标托架(1301)
上,并将其插入到试剂装载轨道2,3,4和5.
2.按“工作列表”窗口按打开“QC and
Calibration” 命令窗口。
3.装载的质控品会在质控/定标托架上显示。用当前装载的试剂、标准品和质控可进行的
检测将以白色背景显示。点击“QC”栏相应检测处为。
4.点击开始运行质控测试。
3.装载标本,运行标本测试
a)装载标本并测试
1)质控通过后,在标本托架中插入标本,按进
入工作列表。等待标本装载区域的信号灯变为绿色,
然后将标本托架插入仪器。如果标本使用条码功能,
确保标本条码处于中缝中,标本ID号可以通过条码自动
读取;
2)如要更改标本ID号,按标本ID区域,出现对话框后,
按,删除不正确的ID后,输入正确的ID号,按
确认。在项目测试栏,选择测试项目,按启动标
本测试。
4. 测试完毕,重新清洗加样针并关机
当所有标本测试完毕后,进入保养菜单。分别打开“Daily”和“Other”页面,进行试剂针和加样针的去污染。点击图标,用纱布加酒精清洁加样针头的外表面;点击图标数次,进行加样针的清洗。
在主界面按图标退出操作软件并关闭操作电脑,此时关闭仪器电源即可。
一、临床意义
1.考值70%-120%
2.血浆中凝血因子V检测可用于诊断先天性或获得性V因子缺乏症。先天性缺乏比较罕见,获得性V因子缺乏多见于肝功能混乱,消耗性凝血病,高血纤维蛋白溶解和肿瘤病人。
六、注意事项
1、采血
①防止组织损伤,避免外源因子进入。
②尽快送检。
③避免从输液管取血,以防稀释,用药。
④抽血时的压力、时间长短会影响局部血液的浓缩,可影响血小板释放和某些凝血因子的活性。
2、收集管要求:硅化玻璃管或塑料管,最好使用真空采集管,不推荐使用注射器
3、抗凝剂选择
①推荐用0.109mol/L(3.2%)枸橼酸钠(5H2O),PH7.10-7.35,能有效阻止Ⅴ和Ⅷ降解。
②抗凝剂与血液的比例为1:9。
4、采集过程:
①加压:使用止血带或不太紧的血压带,时间不超过1分钟。
②最佳采集状态:病人处于休息,平静状态;静脉穿刺没有造成明显损伤。
③舍弃第一毫升血或不使用第一管血
④确保血液迅速均匀地流动
⑤抽出的静脉血必须立即轻微上下颠倒3-4次,保证与枸橼酸钠充分的混合。
不允许反复冷冻