植物体细胞杂交

（3）现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观 察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是
由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故
活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料 能够进入死细胞内而着色）
。
（4）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目， 最好选用细胞分裂到
5 试管婴儿、试管苗和克隆羊这三者可以说是现代
生 物 科 技 的 杰 出 成 果 , 下 列 对 其 生 物 学 原 理 及 技 术
的叙述,正确的是 A.都属于无性生殖 B.都利用了细胞工程的某些技术 C.都不会发生基因重组 ( )
D.都体现了已分化的细胞具有全能性
（7）从中你知道获得多倍体的方法还有哪些？
（8）该技术最大的优点（意义）是什么？
（一）植物体细胞杂交技术
（9）虽然得到的植物体没有达到人民预期目的（地上结番茄， 地下结马铃薯块茎），但一些科学家却坚信人们的目标终将实现， 你能说出其中的理由吗？
（二）植物组织培养技术
1．原理 植物细胞的 全能性 ，即具有某种生物全部遗传信息 的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。
（三）动物组织、细胞培养技术
4.应用 (1)生产细胞产品：干扰素、疫苗、单克隆抗体。 (2)检测并判断某毒性物质毒性的大小。 (3)临床医学研究。
（四）动物细胞融合技术
1、过程 2、融合的基础 3、人工诱导融合方法
4、仅考虑两两融合，融合的细胞 有几种类型？
（五）单克隆抗体制备技术
1、过程 2、需要筛选几次？目的是什么？ 3、杂交瘤细胞有什么特点？ 4、为什么先用抗原刺激小鼠，再提取小 鼠B细胞？ 5、单克隆抗体的优点是： 6、单克隆抗体的应用： 抗原抗体杂交、生物导弹
4.你认为细胞全能性大小与哪些因素有关？
5.请举例说明克隆动物的大致过程，你认为卵（母）细胞质在该过程中的 作用是什么？ 6.通过自己的学习，你认为获得全能性的动物细胞有哪些方法？
总结 一、细胞工程概念
是指应用现代细胞生物学、发育生物学、遗传学和分子生物学的理论与方法,按照 人们的需要和设计,在细胞水平上的遗传操作,重组细胞结构和内含物,以改变生物的结 构和功能,即通过细胞融合、核质移植、染色体或基因移植以及组织和细胞培养等方法, 快速繁殖和培养出人们所需要的新物种的生物工程技术.
原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是
（ A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产 ）
生的血清抗体为单克隆抗体 B.体外培养单个B淋巴细胞可以获得大量针对SARS 病毒的单克隆抗体 C.将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱 导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D.利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异 性结合的方法可诊断出病毒感染者
A.细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡
C.动物细胞培养的目的只是获得大量的细胞分泌
蛋白 D.动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶
处理
2.回答下列有关动物细胞培养的问题： （1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 。 相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 接触抑制 此时，瓶壁上形成的细胞层数是 单层（或一层） 。要使贴壁的细胞从 胰蛋白酶 瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是 。 （2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现 的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发 衰老甚至死亡 生改变而变成 细胞，该种细胞的黏着性降低 ,细胞膜表面蛋白质 不死性 （糖蛋白）的量 。 减少
用什么方法可以达到呢？仅仅依靠有性生殖可以达到预 期的目的吗？为什么？
（一）植物体细胞杂交技术
思考：该过程的几个问题 （1）去除细胞壁的方法有哪些？ （2）融合完成的标志是什么？参与该过程的细胞器有哪些？ （3）人工诱导融合的方法有哪些？ （4）仅考虑两两融合，融合细胞有几种类型？ （5）该植物体细胞杂交过程中的理论基础是什么？ （6）得到的杂种植株可育吗？为什么？
4.下列哪项不属于体细胞核移植技术的应用
（ A.加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育 ）
B.保护濒危物种
C.获得组织器官异体移植的供体 D.大量产生紫杉醇
5.下列有关体细胞核移植技术的说法，不正确的是
（ A.体细胞核移植技术在多种动物中获得了成功， 成功率非常高 B.克隆技术的各个环节有待于进一步改进 C.大多数克隆动物还存在一些遗传和生理缺陷类 的健康问题 D.克隆动物食品的安全性问题仍然存在争议 ）
2．过程： 已经分化 的组织形成 愈伤组织 幼根 和芽→完整植株。
（二）植物组织培养技术
3．理论基础：植物细胞的全能性 脱分化、再分化的原因：基因选择性表达 4．植物组织培养条件：离体、无菌、植物激素（生长素、细 胞分裂素等）、营养物质、及适宜温度、PH、光照（再分化 时）等外界条件
（二）植物组织培养技术
5．应用
（1）植物脱毒 （2）快速繁殖 （3）细胞培养获得大量代谢产物如紫 杉醇、人参皂甙、紫草素 （4）人工种子 （5）单倍体育种
（三）动物组织、细胞培养技术
（三）动物组织、细胞培养技术
1、过程
2、理论基础： 3、培养条件 ①无菌、无毒的环境——无菌处理、加抗生素杀菌、定期更换培养液。 ②营养——葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐和微量元素+血清或血浆等 天然成分。 ③温度和pH——(36.5±0.5)℃和(7.2～7.4)。 ④气体环境——95%空气+5%CO2。
二、细胞工程技术手段
（一）植物组织培养技术 （二）植物体细胞杂交技术 （三）动物组织、细胞培养技术
（四）动物细胞融合技术 （五）单克隆抗体制备技术
（六）动物细胞核移植技术
练习
1.关于动物细胞培养的有关叙述，正确的是( 过程中 B.动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、 无机盐、生长素和动物血清等 )
中 期的细胞用显微镜进行观察。
（5）在细Baidu Nhomakorabea培养过程中，通常在 的 新陈代谢 速率降低。
冷冻（或超低温、液氮）条件下保 存细胞。因为在这种条件下，细 胞中 的活性降低，细胞 酶 （6）给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这 是因为机体把移植的皮肤组织当作 抗原 进行攻击。
3.利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗
（六）动物细胞核移植技术
1、过程 2、选择卵母细胞的原因是什么？ 3、理论基础 4、克隆羊的遗传物质来源 5、应用：
生殖性克隆与治疗性克隆
重组干细胞
（六）动物细胞核移植技术
预想的克隆人技术路线
1.人的DNA分子可以和大肠杆菌的DNA分子重组在一起的理论基础是什么？ 2.人的胰岛素基因可以在大肠杆菌内表达出人的胰岛素，该过程的理论基 础是什么？大肠杆菌作为受体细胞的优点有哪些？ 3.人的干扰素是一种糖蛋白，将人的干扰素基因导入大肠杆菌中表达出 大量的基因产物，但却没有活性。你认为其中的原因是什么？