癫痫动物模型的制备

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若无发作或发作未达到Ⅲ-Ⅴ级, 则每隔 30min腹腔注射PILO 10mg/（kg· ,最多6 次) 次, 其间癫痫发作>Ⅲ级的大鼠认为致成功。
方法特点
PILO首次剂量为20mg/kg,以后小剂量给 予PILO(10mg/kg), 简单易用，可按个体差 异控制PILO的用量，成功率较高。
此方法的致癫痫率和自发发作的出现率 基本一致,明显优于传统方法。是研究颞叶 癫痫的理想模型。
2.癫痫模型制备原理
利用药物制备癫痫模型，通过破环脑部神 经递质释放的平衡，阻断兴奋性氨基酸的循 环通路，从而诱发癫痫形成与发作。
利用手术制备癫痫模型，主要用于模拟外 伤后癫痫。具体的发病机制尚不十分明确， 目前研究显示与各神经元细胞之间的突触连 接的改变有关。
3.不同的癫痫模型制备方法
癫痫动物模型
实验动物学
癫痫动物模型的制备
张 睿 2010109116
概述
1
癫痫流行病学介绍 癫痫模型制备原理
2
3
不同的癫痫模型制备方法
讨论与展望
4
1.癫痫流行病学介绍
癫痫是一种脑部疾患，特点是存在能产生 癫痫发作的脑部持久性改变，并出现相应神 经生物学、认知、心理学以及社会学等方面 的后果。
中国癫痫患病率约为7‰，每年新发病40 万例，患者总数超过900万，其中超过一半 是儿童及青少年。
以上介绍的几种癫痫动物模型，都有其独 特之处。不同方法制备的癫痫动物模型，将 会为癫痫发病机制和治疗的研究做出贡献。
4.讨论与展望
导致癫痫发病的因素非常复杂, 癫痫的发 病类型多, 目前还没有一种动物模型能够模 拟出所有的癫痫发作类型。
以上介绍的几种癫痫动物模型，都有其独 特之处。不同方法制备的癫痫动物模型，将 会为癫痫发病机制和治疗的研究做出贡献。
3.1.3穿刺注射海人酸法
点燃模型(Kindling model)是通过重复 给予一个首发阈下电或化学刺激引起部分或 全面性癫痫发作的癫痫模型, 具备慢性、自 发性和复发性特征。
海人酸(kainic acid ,KA)具有很强的神 经毒性作用,海马富含KA受体, KA脑内注射 能使动物产生长时间肢体型癫痫发作。
1.药物建模
通过药物注射 的方式建立癫痫 动物模型。
2.手术建模
利用外科手术 的方法建立癫痫 动物模型
3.1药物建模的几种方法
1 注射 合成红藻氨 酸制备大鼠 癫痫模型
2 注射 氯化锂-匹罗 卡品致大鼠 癫痫模型
3 穿刺注射 海人酸杏仁 核点燃大鼠 癫痫模型
3.1.1注射合成红藻氨酸法
红藻氨酸(kainic acid, KA)是红海藻的 提取物，可作用于脊椎动物中枢神经系统的 谷氨酸受体,可直接兴奋神经元,又可增强钠 离子的通透性而使神经细胞去极化,诱发癫 痫的发生。 利 用 KA 的 人工 合成品 , 即合 成红藻 氨酸 (syn thetical kainic acid, SKA)制作大 鼠癫痫模型。
合成红藻氨酸诱发大鼠癫痫发作的阶段性 明显、行为学表现规律、稳定,死亡率低， 适宜大规模建立癫痫动物模型 。
3.1.2注射氯化锂-匹罗卡品法
注 射 氯 化 锂 （ Licl ） 和 匹 罗 卡 品 (pilocarpine, PI-LO)致癫痫模型在动物行 为、脑电图、病理及药理特性上与人类颞叶 癫非常类似。
制备过程
Wistar大鼠麻醉后30min用5μL微量注射 器吸KA1μL,颅骨穿刺以右侧杏仁基底核为 KA注射部位，速度为1μL/min ,留针5min， 以确保药物被完全吸收。
实 验 大 鼠 在 KA 杏 仁 核 注 射 后 平 均 41 和 61min分别依次出现部分性发作和癫痫性大 发作
方法特点
用KA杏仁核微量注射, 为全身给药点燃用 量的万分之一, 点燃成功率高达90%。
点燃一旦建立, 动物的这种脑细胞及惊厥 行为敏感性可长期维持, 是研究脑细胞兴奋 性、可塑性以及学习和记忆、癫痫发病机制、 癫痫外科手术预后判断的理想动物模型 。
3.2机械损伤制备大鼠癫痫模型
颅脑外伤是癫痫的常见病因之一。外伤后 癫痫(PTE)的发病机制目前尚未阐明。现有 研究表面，突触重建在PTE的发病发展过程 中起着重要作用。
突触素(synaptophysin.p38)和苔藓纤维 (mossy fiber，MF)与突触重建关系密切， 是突触功能和突触重建的重要标志之一。
制备过程
正 常 Wistar 大 鼠 用 2 ％ 戊 巴 比 妥 钠 (50mg/kg)腹腔麻醉后，矢状位切开头部皮 肤，剥离颅骨外膜，左侧顶距矢状缝旁 3.5mm，冠状缝后4.0mm处钻一直径3.0mm的 骨窗，保持硬脑膜完整。 此时接液压打击装置，压强152-202kPa， 时程40-50ms。打击后，缝合头皮，清醒后 自由进食、水。
液压打击手术部位图示
方法特点
手术后连续观察实验动物行为三个月，根 据不同等Байду номын сангаас的癫痫发作，可研究外伤后癫痫 的发病机制。
液压脑损伤制备的动物模型，较好的模拟 了人类PTE的显著特征—晚期、慢性、反复、 自发性发作。 是研究外伤后癫痫理想的动 物模型。
4.讨论与展望
导致癫痫发病的因素非常复杂, 癫痫的发 病类型多, 目前还没有一种动物模型能够模 拟出所有的癫痫发作类型。
制备过程
正 常 Wistar 大 鼠 腹 腔 注 射 10mg/kgSKA 后 约 5min,大鼠出现凝视行为 (Ⅰ级), 之分别在约 23min、97min、129min和140min动物顺序出现 Ⅱ-Ⅴ级癫痫发作。3h后症状减轻，7-8小时后 停止，14小时基本恢复正常。
方法特点
注射合成红藻氨酸诱发大鼠癫痫，SKA 512mg/kg 腹腔注射可诱发大鼠癫痫发作, 以 10mg/kg剂量为佳。
近年来一直被认为是研究颞叶癫痫的理想 模型。
制备过程
正 常 Wistar 大 鼠 经 过 腹 腔 注 射 LiCl 125mg/kg,18-24h后腹腔注射PILO 20 mg/kg 达 到 Ⅲ-Ⅴ 级 发 作 则 为 进 入 癫 持 续 状 态 (status epilepticus, SE) ,致成功。