鞭毛染色
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实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
鞭毛染色流程图：
倾斜 制片
风干， A液 染色4～6分钟
蒸馏水洗
B液冲洗，染 色， 加热 复染
蒸馏水洗 自然干燥
镜检
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实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
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实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
影响鞭毛染色的因素较多。主要有： 1.菌种的活化程度：实验前，应将菌种用斜
面底部有少量冷凝水的新鲜培养基斜面转接 2～3次，以使菌种活化，处于良好的生理状 态，其鞭毛的生长才正常； 2.染色液的新鲜程度：用于鞭毛染色的染色 液，应随用随配。搁置一段时间的染色液的 染色效果较差； 3.载玻片的洁净程度：用于鞭毛染色的载玻 片应无油污、无划痕，洁净干燥。
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实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
〈三〉菌落形态观察： 取普通变形杆菌的营养琼脂培养基平板划线
培养物，从菌落的大小、颜色、高度、有无 蔓延等方面观察并记录细菌菌落特征，找出 有鞭毛细菌的细胞形态和菌落形态间的相关 性。
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实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
5.染色处理： ①滴加鞭毛染色A液于载玻片上，染色处理
4～6分钟，蒸馏水充分洗净A液； ②用B液冲去残留的水，再加B液于玻片上，
微火加热至微冒汽，保持0.5～1分钟，注意 勿使B液干涸，应随时补加B液，蒸馏水清 洗，自然干燥； 6.镜检：油镜。菌体深褐色，鞭毛很纤细， 呈浅褐色；可多调整几个视野，仔细观察。
实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
〈二〉活细菌的运动性观察： 1.洁净载玻片一张，中央加一滴美蓝； 2.取菌并于美蓝液中轻沾数次； 3.加盖玻片，镜检，油镜。可见呈浅蓝色的
细菌细胞，有些作直线运动（一般认为此时 鞭毛逆时针旋转）；有些细菌细胞作翻筋头 运动（转向运动，一般认为此时鞭毛顺时针 旋转）。
实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
五、实验结果、
1.图示普通变形杆菌鞭毛染色的结果，注明 鞭毛的形态。
2.说明你看到的普通变形杆菌活细胞的运动 状态。
3.记录、说明普通变形杆菌的菌落形态及与 细胞形态的相关性。
4.整理实验设备，清理实验台。
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实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
使用对生物细胞无毒的美蓝ຫໍສະໝຸດ Baidu色液，可以观 察到活的普通变形杆菌细胞的运动状态。
生鞭毛的细菌的菌落形态一般具有较平坦， 有蔓延的趋势等特点。
实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
三、实验材料：
1.实验菌种及培养基：普通变形杆菌（Proteus vulgaris）营养琼脂培养基斜面和平板，32℃， 16～18及48小时培养物；
实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
一、实验背景及目的：
鞭毛是某些细菌生长在细胞外的长丝状蛋白质 附属物。
通过鞭毛的高速旋转，可使有鞭毛的细菌呈现 运动性，是鞭毛的主要功能。鞭毛也是有鞭毛 的细菌实现其趋性的最有效方式。
原核生物的鞭毛在组成和结构上不同于真核生 物9+2型的鞭毛。
1.学习、掌握鞭毛染色技术和活细菌运动性的 观察方法；
2.实验试剂：染色液：鞭毛染色A液、B液； 0.1%美蓝液
3. 实验设备及器材：恒温培养箱；恒温干燥箱； 高压蒸汽灭菌锅；显微镜；酒精灯；接种环；滴 瓶；试剂瓶；双层瓶；镊子；载玻片；φ90mm培 养皿；500ml标本缸；15×150试管；火柴（或打 火机）；吸水纸；镜头纸；棉花；
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2.了解生鞭毛细菌的细胞形态和菌落形态间的 相关性。
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实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
二、基本原理：
原核生物的鞭毛化学组成主要是蛋白质，其 直径一般为0.02微米，小于光学显微镜的 0.2微米的分辨率。所以，鞭毛染色时需经 媒染剂处理，使其沉积在鞭毛上加粗鞭毛的 直径并使鞭毛着色，以便于观察。
实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
四、实验步骤和方法：
〈一〉鞭毛染色： 银染色法： 1.取洁净载玻片一张，在玻片的一端加一滴
无菌水； 2.取菌：在玻片的无菌水中轻沾数次，成菌
悬液； 3.制片：将玻片有菌悬液端抬高，使玻片倾
斜，菌悬液流向玻片的另一端成菌膜； 4.风干：
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实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
鞭毛染色流程图：
倾斜 制片
风干， A液 染色4～6分钟
蒸馏水洗
B液冲洗，染 色， 加热 复染
蒸馏水洗 自然干燥
镜检
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实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
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影响鞭毛染色的因素较多。主要有： 1.菌种的活化程度：实验前，应将菌种用斜
面底部有少量冷凝水的新鲜培养基斜面转接 2～3次，以使菌种活化，处于良好的生理状 态，其鞭毛的生长才正常； 2.染色液的新鲜程度：用于鞭毛染色的染色 液，应随用随配。搁置一段时间的染色液的 染色效果较差； 3.载玻片的洁净程度：用于鞭毛染色的载玻 片应无油污、无划痕，洁净干燥。
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〈三〉菌落形态观察： 取普通变形杆菌的营养琼脂培养基平板划线
培养物，从菌落的大小、颜色、高度、有无 蔓延等方面观察并记录细菌菌落特征，找出 有鞭毛细菌的细胞形态和菌落形态间的相关 性。
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5.染色处理： ①滴加鞭毛染色A液于载玻片上，染色处理
4～6分钟，蒸馏水充分洗净A液； ②用B液冲去残留的水，再加B液于玻片上，
微火加热至微冒汽，保持0.5～1分钟，注意 勿使B液干涸，应随时补加B液，蒸馏水清 洗，自然干燥； 6.镜检：油镜。菌体深褐色，鞭毛很纤细， 呈浅褐色；可多调整几个视野，仔细观察。
实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
〈二〉活细菌的运动性观察： 1.洁净载玻片一张，中央加一滴美蓝； 2.取菌并于美蓝液中轻沾数次； 3.加盖玻片，镜检，油镜。可见呈浅蓝色的
细菌细胞，有些作直线运动（一般认为此时 鞭毛逆时针旋转）；有些细菌细胞作翻筋头 运动（转向运动，一般认为此时鞭毛顺时针 旋转）。
实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
五、实验结果、
1.图示普通变形杆菌鞭毛染色的结果，注明 鞭毛的形态。
2.说明你看到的普通变形杆菌活细胞的运动 状态。
3.记录、说明普通变形杆菌的菌落形态及与 细胞形态的相关性。
4.整理实验设备，清理实验台。
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实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
使用对生物细胞无毒的美蓝ຫໍສະໝຸດ Baidu色液，可以观 察到活的普通变形杆菌细胞的运动状态。
生鞭毛的细菌的菌落形态一般具有较平坦， 有蔓延的趋势等特点。
实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
三、实验材料：
1.实验菌种及培养基：普通变形杆菌（Proteus vulgaris）营养琼脂培养基斜面和平板，32℃， 16～18及48小时培养物；
实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
一、实验背景及目的：
鞭毛是某些细菌生长在细胞外的长丝状蛋白质 附属物。
通过鞭毛的高速旋转，可使有鞭毛的细菌呈现 运动性，是鞭毛的主要功能。鞭毛也是有鞭毛 的细菌实现其趋性的最有效方式。
原核生物的鞭毛在组成和结构上不同于真核生 物9+2型的鞭毛。
1.学习、掌握鞭毛染色技术和活细菌运动性的 观察方法；
2.实验试剂：染色液：鞭毛染色A液、B液； 0.1%美蓝液
3. 实验设备及器材：恒温培养箱；恒温干燥箱； 高压蒸汽灭菌锅；显微镜；酒精灯；接种环；滴 瓶；试剂瓶；双层瓶；镊子；载玻片；φ90mm培 养皿；500ml标本缸；15×150试管；火柴（或打 火机）；吸水纸；镜头纸；棉花；
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2.了解生鞭毛细菌的细胞形态和菌落形态间的 相关性。
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二、基本原理：
原核生物的鞭毛化学组成主要是蛋白质，其 直径一般为0.02微米，小于光学显微镜的 0.2微米的分辨率。所以，鞭毛染色时需经 媒染剂处理，使其沉积在鞭毛上加粗鞭毛的 直径并使鞭毛着色，以便于观察。
实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
四、实验步骤和方法：
〈一〉鞭毛染色： 银染色法： 1.取洁净载玻片一张，在玻片的一端加一滴
无菌水； 2.取菌：在玻片的无菌水中轻沾数次，成菌
悬液； 3.制片：将玻片有菌悬液端抬高，使玻片倾
斜，菌悬液流向玻片的另一端成菌膜； 4.风干：
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