杂交瘤无血清培养

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杂交瘤细胞无血清培养基(hybridoma SFM)培养:

细胞扩培至T75培养瓶中,细胞长满后(密度大于80%)换成无血清培养基;刚开始添加15ml培养基;待培养基变黄色后再添加15ml培养基;待培养基再次变黄色后添加补料培养基;细胞开始大量死亡时收集培养上清。计算细胞活率,细胞活率不低于50%。

无血清培养基(hybridoma SFM):hybridoma SFM+2.5% low-IgG FBS+1×谷氨酰胺+1×双抗。

10×浓缩补液培养基(用hybridoma SFM培养基配制):葡萄糖200mM;谷氨酰胺20mM。使用时终浓度添加到1×。

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