食用菌栽培01菌种生产

分装试管 勿污管口，控制装量
包扎成捆
准备灭菌
三、培养基的配制
母种培养基配制过程
三、培养基的配制
❖ 原种、栽培种培养基
主料 辅料
棉籽壳培养基 棉籽壳87，麦麸10 白糖1，石灰1，过磷酸钙1
配制
棉壳、麦麸干混 余料溶于水后浇入主料 清水翻拌至含水量
三、培养基的配制
❖ 原种、栽培种培养基
谷粒培养基
三、培养基的配制
培养基种类
原料 来源
天然：天然有机物 合成：已知成分的化学药品 半合成：
液体：营养液
类 型
状态
固体
固体：天然固体原料 固化：加1.5%~2%琼脂
表面 斜面培养基
形状 平板培养基
三、培养基的配制
培养基成分：
水分 碳源：单糖、双糖、多糖 氮源：有机氮（氨基酸、蛋白质、尿素）、铵态氮（硫酸铵） 无机盐：磷、钾、钙、镁、硫等。磷酸氢二钾对pH变化具有缓冲
一、菌种的生产类型及生产流程
母种
一、菌种的生产类型及生产流程
原种
一、菌种的生产类型及生产流程
栽培种
一、菌种的生产类型及生产流程
三级菌种之间的关系
菌种类型
制种容 器
培养 基
菌株来源
用途
要求
一级菌种 （ 母种、 试管种）
试管
PDA、 PSA
种菇（孢 子或菌肉
组织）
扩制二级 种
菌种保藏
纯度高，质 量好，绝对 无杂菌
清洁→物品放缓冲间→消毒 使用 →移物至接种间→ 喷消毒液
→ 10min 后接种→消毒液清洁
二、菌种生产的基本设备
❖ 接种设备 接种室
二、菌种生产的基本设备
接种箱
紫外灯 操作孔 观察窗
二、菌种生产的基本设备
超净工作台（净化工作台）
二、菌种生产的基本设备
超净工作台（净化工作台）
双人
单
人
二、菌种生产的基本设备
❖ 菌种厂的布局
仓库
配料室
灭菌室
接种室
门 口
晒料场
栽培棚 办公室 培养室
二、菌种生产的基本设备
❖ 接种设备 接种室
高2.2~2.5m
要求 面积7~9m2
缓冲间：2~3m2 接种间：5~6m2
6个面平滑 两门错开、平拉式 顶装紫外灯
二、菌种生产的基本设备
❖ 接种设备 接种室
消毒：只杀死病原菌，未伤及芽孢 防腐：暂时抑制微生物生长 除菌：用冲洗、过滤等法，除去微生物
四、消毒与灭菌
❖ 物理消毒灭菌法
热力灭菌
（一）原理
高温
使菌体蛋白质、核酸、酶 等凝固或变性失活。
四、消毒与灭菌
❖ 物理消毒灭菌法
热力灭菌
（二）方法
干热灭菌
湿热灭菌
四、消毒与灭菌
干热灭菌 热源 火焰及热空气
第二章 食用菌菌种生产
本章主要内容
菌种生产类型及生产流程 菌种生产的基本设备 培养基的配制 消毒与灭菌 接种与培养 菌种的分离方法 菌种的保藏与复壮 液体菌种生产
一、菌种的生产类型及生产流程
❖ 菌种： 是指以适宜的营养培养基为载体进行纯培养的菌丝体，也 就是培养基质和菌丝体的联合体。或者说是指人工培养， 并供进一步繁殖的食用菌的纯菌丝体。
PDA 培养基
PSA 培养基
马铃薯（去皮） 200g
马铃薯（去皮） 200g
葡萄糖 琼脂 水
20g 18～20g 1000ml
蔗糖 琼脂 水
20g 18～20g 1000ml
三、培养基的Baidu Nhomakorabea制
母种培养基配制过程
制马铃 薯滤液
煮沸20min，取定量滤液
融化琼脂 滤液沸时加入，融后加余料
调节pH值 1%NaOH或HCl
孢子或组织分离
一级种培 养基制备
斜面
高压灭菌
接种
培养
筛选 提纯
原始种
中试后确 定一级种
保存
二级种培 菌种瓶
养基制备
高压灭菌
接种
一级种转管、扩大
培养
二级菌种
三级种培 养基制备
罐头瓶 菌种袋
高压或 常压灭菌
接种
培养
三级菌种
栽培
一、菌种的生产类型及生产流程
菌种制作的四个基本环节
配制培养基 灭菌 接种 培养
二级菌种 （原种）
菌种瓶
固体 培养 基
一级菌种
扩制三级 菌种
三级菌种 罐头瓶、 （栽培种） 菌种袋
固体 培养 基
二级菌种
用于栽培
纯度高，质 量好，无杂
菌
高纯度，高 质量，无杂
菌
一、菌种的生产类型及生产流程
菌种生产流程：
种菇
一级菌种 二级菌种 三级菌种
栽培
一、菌种的生产类型及生产流程
菌种生产工艺流程：
特点 简便、快速、范围有限 酒精灯烧 小的金属、玻璃器皿
方法 烘箱烤 大的玻璃、金属器皿
四、消毒与灭菌
四、消毒与灭菌
干燥箱
使用 注意
主料 麦粒、玉米粒等98.5%
辅料 石膏粉1%,碳酸钙0.5%
配制
颗粒洗净，1%石灰水泡胀 文火煮沸15~20min 晾至无明水后拌入余料
调pH 与分装
pH：一般为8.0左右 原种培养基装大口瓶 栽培种培养基装菌种袋
四、消毒与灭菌
❖ 基本概念
杀死一切微生物，包括芽孢。
灭菌 分为 杀菌：菌体尚存
溶菌：菌体消失
二、菌种生产的基本设备
接种工具 要求：前端为导热性好的金属材料
环
枪
针
匙 接种 耙
钩
镊
铲
二、菌种生产的基本设备
❖ 培养设备 培养室：培养大量菌种的恒温房
要求
光线暗； 密闭好、通风性强； 能升温、降温（空调机）； 有培养架
二、菌种生产的基本设备
培养室：培养大量菌种的恒温房
二、菌种生产的基本设备
作用 生长素：B族维生素 凝固剂：琼脂
三、培养基的配制
琼脂
属天然植物多糖 融点96℃以上 凝点40 ℃以下 冷水中不溶 透明度好、粘着力强 不被微生物分解利用
条状 粉状
三、培养基的配制
三、培养基的配制
❖ 母种培养基
PDA培养基和PSA培养基是一级菌种最常用的培养基，适用 于大部分食用菌菌种的分离、培养和保藏，既是一种广泛培 养基，也是一种基础培养基。
❖ 菌种的生产类型： 食用菌菌种是通过三级逐步扩大培养的方式来生产的，在 生产上通常把菌种分为一级菌种（母种）、二级菌种（原 种）和三级菌种（栽培种）。
一、菌种的生产类型及生产流程
一级菌种
从孢子分离培养或组织分离 培养获得的纯菌丝体。
菌 种
二级菌种 由一级菌种扩大繁殖成的
菌丝体。
三级菌种
由二级菌种扩大繁殖成的菌丝 体，是直接用于栽培的菌种。
培养箱 培养少量菌种的恒温电器（20~40℃）
二、菌种生产的基本设备
❖ 灭菌设备
高 外锅：装水
压 内锅：装物
锅
锅盖
安全阀 排气阀
压力表
手提式高压灭菌锅
三、培养基的配制
❖ 培养基 概念：采用人工的方法，按照一定比例配制各种营养物质， 以供给食用菌生长繁殖的基质。 要求：含有该菌生长发育所需要的营养物质；水分、pH 适宜；必须经过严格的灭菌，保持无菌状态。