第四十四章 抗病毒药和抗真菌药

病毒感染性疾病严重威胁人类健康和生命,已成为困扰医学界的一大难题,特别是某些病毒感染性疾病的增长速度相当快,严重影响着全人类的健康。翻开人类瘟疫的历史我们更能看到一些令人触目惊心的数字,公元1555 年,墨西哥天花大流行,200 万人不治而亡;1918 年世界范围内发生流感造成2000 万人死亡,大约是打了四年的第一次世界大战死亡人口的一倍。尽管药物和疫苗的发明及应用让人类走出了传染病的历史阴影,然而,我们发现人类的喜悦是那么短暂,今天我们仍然被形形色色的传染病所困扰,尤其是那些层出不穷的新病毒更成为人类心头一块挥之不去的阴霾。仅二十世纪后半页,1969 年西部非洲出现拉沙病毒,1976 年非洲大陆出现了埃博拉病毒,1981 年被称为世纪灾难的AIDS 出现,还有汉坦病毒、尼巴病毒、马尔堡病毒等等,特别是自1981 年以来艾滋病全球感染者人数已达134000 万,已成为一种严重的灾难性和全球性流行的疾病,世界上没有一个国家和人群能够幸免,自艾滋病在全球流行以来,已有1170 万人死于这种疾病。非典的到来,更使人们措手不及。因此,研究和开发新的抗病毒药物和新的治疗方案是摆在我们面前艰巨的任务。

1. 抗病毒药物的应用抗病毒药物是病毒性感染疾病治疗的主要药物,特别是自艾滋病流行以来,抗病毒药物的研究与开发进入了鼎盛时期,新的药物不断面市。归纳起来主要有以下几种:

（1）核苷类药物，系化学合成的抗病毒药物,其主要品种有无环鸟苷(阿昔洛韦,acyclovir)，羟甲基无环鸟苷(更昔洛韦,ganciclovir) 等。

（2）非核苷类药物，主要有膦甲酸钠(foscarnet sodium)，三氮唑核苷(利巴韦林,vibarvirin) 和金刚烷胺(amantadine)。

（3）几种新上市的药物，扎那米韦(zanamivir,商品名:Relwnza) 和磷酸奥司它韦(oseltamivir phosphate,商品名达菲)，是一种神经氨酸酶抑制剂，可选择性的抑制流感病

毒表面的神经氨酸酶，抑制流感病毒的复制。

（4）抗病毒药物存在的缺陷迄今临床应用的抗病毒药物种类极少，且其作用机制相似，它们大都是对活跃复制的病毒有效，而不能清除潜伏状态或非复制期病毒。长期使用不仅可产生药物的毒性作用，而且易诱导产生耐药的病毒株。且停药后易复发，这大大限制了它的使用。已有报道表明，在有的HIV 感染病人经过长达100周以上的高效抗逆转录(HAART) 治疗后，仍可发生病毒毒力的回复。

2．干扰素(interferon，IFN) 干扰素是一类能提高机体免疫力，具有抗病毒抗肿瘤作用的细胞因子，干扰素有两个主要亚型，即Ⅰ型和Ⅱ型，它们可被不同的受体识别，IFN-tau 是Ⅰ型干扰素的新成员，它有其它Ⅰ型干扰素所具有的治疗作用，但它在高浓度时对细胞的毒性作用比其它Ⅰ型干扰素小，并且它没有种属特异性，它可在口服给药后仍有活性。

（1）干扰素的抗病毒作用机制：各种细胞表面都存在IFN 受体， IFN 与同种细胞受体结合后，经细胞内途径激活干扰素刺激基因( ISG) ，诱导合成几种抗病毒蛋白，最终使病毒RNA降解或最终抑制病毒蛋白翻译，从而使细胞在数分钟内形成抗病毒状态。

（2）常用的几种干扰素:①单一亚型干扰素IFN-α-2a、IFN-α-2b、IFO-α-2c等。最近，Lau GK 等通过将814 名HBeAg 阳性的慢性乙型肝炎患者分成三组，分别给予IFN-α-2a、IFN-α-2a 联合拉米夫定(lamivudine)、拉米夫定(lamivudine)。经过72 周的治疗观察后发现，单独给予IFN-α-2a 或IFN-α-2a 和拉米夫定(lamivudine)联合应用的患者HBeAg和HBsAg 的血清转阴率和对乙型肝炎病毒(HBV)DNA的抑制效率明显比单独给予拉米夫定(lamivudine) 的患者高。这表明对于HBeAg 阳性的慢性乙型肝炎患者，IFN-α-2a 的疗效明显优于拉米夫定(lamivudine)。②复合干扰素(consensus interferon，CIFN)，是一种以基因工程技术合成的新型干扰素，目前用于丙型肝炎的抗病毒治疗。③长效干扰素(peg-IFN) ，是第二代干扰素，系IFN-α与惰性分子聚乙烯二酸( PEG) 的结合物分子量增大至1.2 Kda，使其半衰期较长，可在体内较长期维持有效的血药浓度，每周只注射一次，现有peg-IFNα-2a和peg-IFNα-2b 两种试剂，目前也主要用于治疗慢性丙型肝炎。

3. 基因治疗在抗病毒治疗中的应用基因治疗(gene therapy)是指通过基因转移或基因修饰的方法，将具有表达功能的基因导入到相关细胞和组织中，使转录和翻译的产物发挥治疗作用的一种治疗方法。

（1）干扰素在基因治疗中的应用：干扰素的抗病毒机制在上面已详述，它作为一种有治疗作用的蛋白分子。由于它在血液中的半衰期比较短且在血液中的浓度不稳定，这些都限

制了它的应用。但如果将干扰素应用于基因治疗，即用合适的载体把干扰素的基因导入体内特异的组织，这样就可克服以上缺点，可在病毒感染部位产生恒定的浓度，而且可大大减少其副作用。

（2）反义策略：反义策略即利用寡核苷酸与互补的RNA 序列结合以抑制蛋白质的合成或病毒RNA 复制的方法。常用的反义核苷酸是一短的RNA 或DNA 片断，通常是2～12个核苷酸。反义核苷酸在导入机体前一般要经过一定的化学修饰，这样可使其抑制核酸酶对它的水解作用，从而增强其稳定性。核酶是指一类具有双重特性的RNA分子，一是能识别特异的靶RNA序列并与之结合具有反义核酸的特性;二是具有酶活性，能通过特异性位点切割降解靶RNA序列。核酶比反义RNA 阻断活性至少高100倍，它作为抗病毒基因的新型分子，已受到广泛的重视，成为抗病毒基因治疗研究中重要的组成部分。具有催化活性的RNA分子其主要成员是锤头状核酶和发夹状核酶。根据反义寡核苷酸和核酶的作用机制，我们可以人工合成特异序列的RNA分子，使其选择性的抑制病毒的mRNA，进而抑制病毒的复制，从而起到抗病毒的作用。几种锤头状核酶已成功应用于对HBV RNA 的灭活，其目标序列有poly (A) 和HBV 尾部的核心区域等。抗HPV 的核酶对HPV 的抑制作用也有成功的报道。

（3）RNA干扰：双链RNA(dsRNA)诱导与之同源的mRNA降解，从而导致基因沉默的现象或机制被称作RNA干扰(RNA interferene ， RNAi)。RNAi现象最初是在对植物和线虫的研究中发现的，它作为一种生物体内自然现象广泛存在于一些真菌、植物和动物中。RNA干扰是一种在进化上保守的抗病毒机制，可引起生物细胞内特异序列基因的缄默现象，RNA干扰是生物进化的结果，是生物体对病毒基因等外源性入侵核酸的一种保护性机制。许多病毒的基因组都是RNA ，即使是DNA 病毒在它的生活周期中也会产生双链RNA ，这就使RNA 干扰在细胞内发挥抗病毒作用成为可能。RNAi介导的病毒抑制效应可以在不改变病毒感染细胞基因表达的前提下来实现。RNAi现已通过抑制可以引起AIDS的细胞因子和病毒因子来抑制HIV 的复制，有研究表明已成功地通过siRNA来抑制HIV-1的tat 蛋白达到了抑制其复制的效果。Novina等设计了针对CD4分子的siRNA，导入细胞后可使细胞表面的CD4分子表达明显减少，可以防止病毒的入侵，从而保护细胞免受HIV的感染。Kapadia等通过针对HCV的siRNA也达到了对HCV 较好的抑制效应。Victor等认为尽管RNAi可对许多病毒产生抑制，但其在抗病毒方面的应用，在今后应该是通过siRNA来证实宿主细胞中哪些成分对病毒的复制是必需的，从而采取相应的措施来达到抗病毒的作用。与别的干扰基因表达的策略相比，RNA干扰有明显的优势表现在1) 高度的特异性，在RNA干扰中仅仅一个碱基的改变就会大大降低RNA干扰的效率。2)高效性，RNA干扰可使目的基因的表达降低90 %以上。3)长效性，RNA干扰产生的效