干扰素的生产工艺

现状
目前可供临床选用的干扰素种类很 多。例如国产重组 IFN－α1型和 IFN－α2型，进口的干扰能（IFN －α2b）、罗扰素（ IFN－α2a）、 惠福仁（类淋巴母细胞干扰素）及 组合干扰素等等。
类别
各种亚型的干扰素-α（含α1或α2或 α2a或α2b）疗效近似；干扰素-β （IFNβ）也有相似效果，但它在 肌肉组织中易被灭活。干扰素-β制 剂进入血液后，稳定性差，确切疗 效尚在观察中，但可作为干扰素- α 的替代制剂。
3．诱导细胞凋亡：干扰素可以诱导肿 瘤细胞凋亡，从而杀灭肿瘤细胞。
4.干扰素对体液免疫、细胞免疫均有免 疫调节作用，对巨噬细胞及NK细胞也 有一定的免疫增强作用。
作用机制 :
干扰素不能直接灭活病毒，而是通过 诱导细胞合成抗病毒蛋白（AVP）发 挥效应。干扰素首先作用于细胞的干 扰素受体，经信号转导等一系列生休 过程，激活细胞基因表达多种抗病毒 蛋白，实现对病毒的抑制作用。
适应症：
1.用于多种恶性肿瘤，包括毛细胞白血 病、慢性白血病、非何淋巴瘤、骨髓 瘤、膀胱癌、卵巢癌、晚期转移性肾 癌及胰腺恶性内分泌肿瘤、黑色素瘤 和Kaposi肉瘤等。
2.与其他抗肿瘤药物并用。 3.作为放疗、化疗及手术的辅助治疗剂。 4.病毒性疾病的防治。
不良反应：
1.全身反应主要表现为流感样症状，即寒战、 发热和不适。
路线4：
动物无限细胞系培养生产工艺：
上市产品：rhuIFN β-1a 1996， Avonex(Biogen)； 2002， Rebif(Serono) 表达产物：166 aa 糖基化蛋白，22.5 ku 工艺特点：分泌表达，产量低，成本高,过程严格
路线5：
基因工程假单胞杆菌发酵生产工艺： 宿主：腐生型假单胞杆菌（Pseudomonas putida） 上市产品：IFN α-2b/安福隆 表达产物：无糖基化可溶性蛋白质，具有天然分子
路线3：
基因工程大肠杆菌发酵生产工艺:
上市产品：重组人干扰素rhuIFN 1986，rhuIFNα-2a， rhuIFNα-2b； 1990，rhuIFNγ-1b；1993，rhuIFNβ-1b； 2001－2002： PEG化IFN，PEG-Intron, Pegasys 表达产物：无糖基化，N-met，无活性包涵体 工艺特点：发酵过程，随后变性、复性过程。
结构和生物活性 工艺特点： 发酵周期短：几个小时 无需变性、复性过程，获得有活性产品 纯化过程：淘汰抗体亲和层析
基因工程假单胞杆菌的构建与保藏
基因工程假单胞杆菌菌种建立： 第一步：干扰素α-2b基因的克隆 第二步：表达载体的构建 第三步：工程菌的构建
第一步：干扰素α-2b基因的克隆
制备白细胞，病毒诱导，分离mRNA,反录酶合 成cDNA,PCR，
干扰素生产工艺路线:
路线1：
体外诱生干扰素制备工艺：
Sendai病毒诱导人白细胞 1989年：IFNα-n3/Alferon，批准上市 产量低：1g IFNα，需要 3亿ml人血白细胞 来源困难，工艺复杂，收率低，价格昂贵
潜在的血源性病毒污染的可能性
路线2：
人源转化细胞系培养生产工艺： 1999年：IFN α-n1/Wellferon, 批准用于临床。 优点：首次实现大规模商业化生产。 缺点： 活性低，退出临床应用。
干扰素的生产工艺
中文名称： 干扰素
英文名称：
interferon;IFN 药物类别：
抗肿瘤药，抗病毒药 所属类别：
生物反应调节剂
干扰素简介
70年代中期人们发现慢性乙型肝炎 患者自身产生干扰素的能力低下， 在应用外源性干扰素后，不仅产生 了上述抗病毒作用，同时可以增加 肝细胞膜上人白细胞组织相容性抗 原的密度，促进T细胞溶解感染性 肝细胞的效能 .
基因连接质粒, 转化E.coli,筛选鉴定克隆。 测序：编码人IFNα-2b基因序列,501bp，
相关药物国内生产企业
1.α1b干扰素 中国预防医学科学院 卫生部长春生物制品研究所 卫生部上海生物制品研究所 深圳科兴生物制品有限公司（赛若金）
2.人α2a干扰素 卫生部长春生物制品研究所 广州医学院 沈阳三生制药股份有限公司（因特芬） 海南新大洲药业有限公司（贝尔芬） 浙江东阳市吴守联合生物技术研究所 深圳科兴生物制品有限公司 武汉天奥制药有限公司（栓剂）
然就能产生干扰素，经一定的制剂加 工过程也能制造成药物-干扰素制剂。
药理作用：
1.抗病毒作用：其抗病毒活性不是杀灭而是 抑制病毒，它一般为广谱病毒抑制剂，对 RNA和DNA病毒都有抑制作用。
2.抑制细胞增殖。干扰素抑制细胞分裂的活 性有明显的选择性，对肿瘤细胞的活性比 正常细胞大500～1000倍。干扰素抗肿瘤效 果可以是直接抑制肿瘤细胞增殖，或通过 宿主机体的免疫防御机制限制肿瘤的生长。
什么是干扰素（IFN）?
干扰素是由病毒和其他种类的干扰 素诱导剂，通过刺激网状内皮系统 （人体免疫系统的一种）、巨噬细 胞、淋巴细胞以及体细胞所产生的 一种糖蛋白。这种蛋白具有多种生 物活性，包括抗增殖、免疫调节、 抗病毒和诱导分化作用。
干扰素的相对分子质量小，对热稳定， 4℃可保存很长时间，-20℃可长期保存 其活性，56℃则被破坏，pH（酸碱度） 2~10范围内干扰素不被破坏。人体自
3 .人α2b 干扰素 长春生物制品研究所 安徽安科生物 高科技有限公司(安达芬) 丽珠集团苏州新宝药厂（隆化诺） 哈尔滨金亚哈尔滨生物制品有限公司（利能） 上海华新生物高技术有限公司 天津华立达生物工程公司 苏州新良药厂
4. 人γ干扰素 上海生物化学研究所 中国预防医学科学院 卫生部上海生物制品研究所 第二军医大学 上海克隆生物高技术有限公司 珠海丽珠制药有限公司
2.骨髓抑制在用药中可出现白细胞、血小板 和网状红细胞减少。
3.局部反应部分患者在注射部位可出现 红斑，并有压痛，24小时后即可消退。
4.其他脱发、皮疹、血沉加快、嗜睡、 一过性肝损伤。偶见过敏性休克，用 药前作过敏试Βιβλιοθήκη Baidu。
临床上常用的干扰素有哪些制剂
自然干扰素 人体白细胞重组干扰素 复合干扰素